ESSAIS DE TRAITEMEJT DE TRYPANOSOMIASES ...
ESSAIS DE TRAITEMEJT DE TRYPANOSOMIASES
EXPERI?IENTALES PAR UI‘J COMPOSE A BASE
DE DIMINAZENE
ACETURATE ET DE
POTASSIUM-ALUMINIUM SULFATE
par S.M. TOURE (*>, B. KEBE (*> & M. SEYE (*>
INTRODUCTION
Il est établi que les trypanocides à tiaction alcaline forment avec la
suramine des complexes insolubles ayant une activité chimiopmphylactique mrquee
GJILLIAMSON et DESOWITZ, 1956)(3). Malheureusement ces complexes se sont révélés
inutilis~&les dans la pratique à cause des t'actions tissulaires qu'ils provoquent
à l'endroit où ils sont injectés. De tels complexes *associent deux tidicaments
trypanocides, mis il est pratiquement possible d'insolubiliser les trypanocides
usuels par d'autres composés chimiques non trypanocides. Nous nous sommes demandé
quelle serait 17activité de certains trypanocides lorsqu'ils sont associés à un
produit relativement simples le potassium~&luminiu sulfate, considé& comme un
adjuvant de l'immunité sur un plan e;énéral. Notre attention s'est d!abord portée
sur l'acéturate de diminazène.
MATERIEL ET METHODES
L'acéturate de diminazène utilisé dans les essais relatés ci-dessous pm-
vient de la pr&entation cormerciale du produit (*a>. Une solution à 5,s p.100 de
la sp&ialité est mélangée à parties &$Les avec une solution 0,Ol M de potassim-
ralminium sulfate KAl (SO41 2, 12 H2C). Le &%mge pticipite et, du fait de sa très
--------------------------------------_I__________________-----.~----------------
(*) Institut sénégalais de Recherches agricoles - L&oratoire national de 1'Elevage
et de Recherches vétérinaires - B.P. 2057 - DAKAR-HANN (Sérié@).
(**> B&-énil, Hoechst Farbwerke
-2
faible solubilit6 dans l'eau, le complexe se dépose au fond du -récipient. :?pres
élimination de la phase liquide, le prkipité obtenu est séché et conservé puis
utilisé dans des essais de thérapeutique. Les premières 6preuves ont porté sm
des rats infectés par Trypanosoma brucei brmcei. La posologie et le nombre de lots
figurent dans les résultats ci-dessous. Divers autres essais se rapportent à des
chèvres et des moutons infectés par T.vivax et à deux bovins Zébu inoculés avec
une souche de T.congolense, Fans tous les cas; les animaux n'ont 6té trait&
quvapr& constatation de parasitémie,
consécutivement 2 l'infection par la serin-,
gue. Après administration intrapéritonéale ou intramusculaire du complexe théra-
peutique, les animaux sont observés quotidiennement pour juger des effets de la
&dication. Des épreuves de réinfection, pratiquées plusieurs semines après le
traitant afin d'évaluer un pouvoir protecteur éventuel, intéressent l'ensenble
des anin-wx.
PXSULTATS
A - Activité trypanocide du pkipité
1. Epreuves sur rats infectés par T.brucei brucei
Tous les rats utilisés ont?%ucei brucei (stock IWA??G/S7/IMEL/k+)
qui entraîne la rrwt chez le Rat en 7 2 8 jours. Ils sont traités par le
composé en injection intrap&itonéal.e quand la parasitémie est manifeste.
Un premier lot de 4 rats a. reçu 1 mg/1 ml p<ar rat. Cette dose est nette-
ment insuffisante car il y a eu 3uLwntation de la parasitémie à lsobserva-,
tion pratiquée le lendemain. Aussi ce @me lot a-t-il reçu ce jour là une
seconde dose de 3 mg par rat, dose contenue dans 0,5 ml de suspension. Les
rats sont négatifs 48 heures ap&s. La parasitémie est réapparue chez un
rat 9 jours apr& traitement et chez un autre 33 jours après, avec mortali-
té respectivement au 3O jour et au 2O jour qui suivent la rechute.
Les &sultats obtenus dans deux autres lots de 4 rats chacun
tous traités à raison de 3 mg/055 mllrat. conduisent à la conclusion que la
dose administrée n'entraîne pas la cure : les trypanosomes disparaissent
du sang 24 3 72 heures aprk traitement mais &appcvaissent chez plusieurs
rats dans des délais de 9 \\$ 42 jours ; la mort survient chez ces rats 2 à
3 jours après la réinvasion par les parasites.
-3
Les épreuves ont é-t6 reprises en utilisant une dose plus élevée. %ux
lots, de 10 rats chacun, sont utilisés dans cette seconcie série, l'un traité par
lva&turate de diminxzène non tiifié, à la dose de 5 mg par rat, 17autre par le
clcxipsé aluné ) égaleront à raison de 5 mg/1 ml/rat. G.ns ce dernier lot les para*
sites disparaissent en 24 heures tandis que dans le premier les délais sont de
1+8 à 72 heures. De plus le trypanocide non modifié n'a pas complètement gugri les
rats à la dose administ&e puisque les trypanosomes ont &apparu dans le sang une
semG.ne après traitement, et 8 rats sur 10 sont mxts 3 à 6 jours après la rechute
Par contre le composé aluné entraîne une disparition des trypanosomes en 24 heures
sans rechute en 37 jours d'observation portant sur 9 des rats ; le dixième rat
est mort au 30° jour, sans toutefois pr&enter de parasitémie.
2. Sur chèvres et moutons infectés avec 'T.vivrax
Sixchèvres et deux moutons ont reçu T.vivax (stocks NBAO/75/LABEL/20 et
FWENGUINE/75/IABEL/21). Après constatation de la parasitémie, ces animaux
sont traités à raison de 5 mg/kg de composé ;aluné dilué à 7 p.100, voie
intramusculCaire. Tous sent négatifs 24 à 48 heures après le traitement. :iu-
curie rechute n'a été observée dans des d&ais de 17 jours au moins.
3, Sur bovins infectés par T.congolense
Deux bovins ayant reçu T.congolense (stock WILOR/64ILABELIl) sont trai-
tés quatre S=ine s après l'infection alors qu?ils sont fortement parasité-
miques. Ils sont négatifs 48 heures après et le demeurent pendant 33 jours.
B - Activité protectxice
Chez les divers animaux ci-dessus, l'é-tude de lvactivité tryp‘anocide di--
recte a été suivie de celle de l'activité chimiopro+ylactique du corryx>sé aluné
dans des épreuves de r%%n.fection. Les rats réinoculés avec T.brucei brucei dans 1:
deuxième série de 10 lots mentionnée ci-dessus se sont bien comportés : 8 sur les
9 qui ont survécu 37 jours apr& un premier traitement ont reçu T.brucei brucei
au bout de ce temps sans présenter aucun parasite pendant 44 jours d'observation
.*. / **.
-4
le 9O rat est mort au 5O jour de la r&infection mais en res+aut aparasitémique.
Concernant les chèvres4 les renseipements obtenus tendent à montrer une activité
protectrice relativement faible à la dose de 5 mg/kg et avec des réinfections par
des stocks homologues de Trypanosoma vivax. En des intervalles compris entre 17 et
61 jours les &infections ont régulièrement provoqué la parasitémie des chèws.
Plus intéressants sont les &sultats obtenus chez les deux bovins infectés de
T,congolense : ils ont reçu chacun à la première épreuve 7 x 107 trypanosows,
puis 7 x 108 tryp,anosomes à la seconde épreuve, pratiquée 33 jours apr& le trai-
tement de l'infection initiale. Suivis pendant un moisj ces deux bovins n'ont pé-
senté aucune parasit&ie consécutive à lgépreuve infectante.
CONCLUSIWS ET DISCUSSIOX
L'aceturate de diminazène, sous la présentation actuellement utilisée en
th&apeutique vétérinaire: lorsqu'il est en solution, pr&ipite par adjonction d'we
solution de potassium-aluminium sulfate. Le p&cipité obtenu a une grande activité
trypanocide ti la dose de 5 mg par kg puisqu'il guerit sans rechute les animaux infec
tés par T.brucei brucei, ou bien par T.vivax, ou enfin T.congolense, dans les
limites de l'e,xp&imentation relatée, Ce m$me pr&iG.t& pourrait sans doute avoir
.'
des Iropriétés chimiopréventives plus marquées que le produit de base. R la dose
d7utilisation il n'a ét& constaté aucune &action &nérale aprGs son administration
par voie intraperitonéale au Rat ou intramusculaire aux Ruminants. Chez deux des
chèvres 3 autopsiees pour la circonstance, le produit a été retrouvé in situ au
. .
I-
point d'injection dans le muscle popliteus, sans constatation de &action inflanma-
taire .
L'effet trypanocide du composé setile de même nature que ce qui a 6té
observé avec l'acéturate de diminazène seul, notamment 1' accentuation des structures
m&tachromatiques et des g-raaulations basophiles avant la mort des trypanosomes
(TOUFL, 1967) ('2). La mort des trypanosomes survient à partir de la 7' heure qui
suit le traitement. On observe alors la lyse cytoplasmique ou l'involution en des
formes arrondies mais Stans vacuolisation excessive. Les mononucléaires monocytes du
sang ont une activite de phagocytose et leurscytoplasmes renferment de nombreuses
inclusions basophiles ; plusieurs sont accolés à des trypanosomes. Les parasites
disparaissent du sang en 24 heures (les observations qui indiquent 48 heures se rap-
portent à des analyses pratiquées le lundi au lieu du dimanche),
/
. . . ..O
- 5
Concernant le pouvoir protec-teur les résult&s sont cependant discordants
du fait qu'une du&e relativement courte a ité obtenue chez les petits ruminants,
alors qu'elle dépasse 30 jours chez les r&s et les deux bovins. C'est que,dms le
cas des chèvres et des n~utons,l'objectif était d'induire une tisistance des <mi--
mux par infection suivie de traitement puis par &infections massives (plusieurs
fois 10' trypanosomes par animal) suivies dfautres traitements. Trois à quatre
cures consécutives n'ont pas produit l'effet escompté. QuFen serait-il dans des
conditions mins &V&~S 3 Cela est 3 élucider par d'autres épreuves.
~J~US avons souvent d&&gé jusqu fZ maintenant le prkipité utilisé ;>ar
des appellations assez vagues, et c'est à dessein. S'agit-il d'un complexe à lgins-
tar des produits obtenus par association de suramine, trypanocide à saction acide
avec d'autres trypanocides à &action alcaline corme la quinapyramine ou les deri-
vés de la phénanthridine ? Liétude chimique est 2 faire. Un complexe est défini
comme étant un composé chimique ayant la structure d'un sel mais n'est pas un elec-
trolyte. Le composé obtenu avec le potassium-aluminium sulfate est faiblement solw
ble dans l'eau. La couleur de la suspension aqueuse est dPun jaune safran lé&+
ment plus pâle que la solution d'acéturate de dkinazène. Il serait hasardeux,de
notre part,de se prononcer sur la nature chimique exacte du prkipité testé dans
ces expériences, d'autant que selon F~AIXZLOUGH, 1962 (11, l'antipyrine (phenyldime
thylFyrazolone1 aurait été ajo& depuis 1959 au produit de base pur le stabiliser
Ce qu'on peut direj c'est qtie notre melange a une bonne activité trypanooide,
Dîautres experiences sont en cours avec ce &me COT& et d'autres trypanocides
associés à l',alun. Vais le potassium-altiiwn sulfate à 0,Ol M ne précipite pas 1~
quincpyramine, ni le bromure de dimidium, ni 19isom&tamidium à 0,Ol P! j le pyrithi-
dium à O,Ol M n'est que faiblement prkipité. Puisque l'alun de potassium est un
adjuvant de l'innnunité,
on peut fonder quelque espoir sur des formulations l'osso
ciant aux divers trypanocides à des doses dénuées d'effet toxique.
. . ./ . . .
BIRLIOGRAPWIE
l- Ff~RCIDJGfl (R. >.- A sumary of the use of Berenil in Kenya. 1 S C T R,
9O &Union, Conakry 1962, OIJA/CSTRj publication n083, pp* 81 - 86.
2 -- TOURE (S.X. >.- Cinétique de la rmrt in vitro de Trypanosom vivax et
T.congolense au contact de &dicaments trypanocides.
Rev.Elev.r,~éd.vet.Pays trop., 1967, 20
- (1) : 109-114.
3- WILLIAXSOH (J.) et DESOVITZ (R,S.).- Prophylactic activity af 3xmmi11
complexes in animal Trypanosomiasis. ?.Jature, London, 1956, 177,
1074 - 1075.
EXPERI?IENTALES PAR UI‘J COMPOSE A BASE
DE DIMINAZENE
ACETURATE ET DE
POTASSIUM-ALUMINIUM SULFATE
par S.M. TOURE (*>, B. KEBE (*> & M. SEYE (*>
INTRODUCTION
Il est établi que les trypanocides à tiaction alcaline forment avec la
suramine des complexes insolubles ayant une activité chimiopmphylactique mrquee
GJILLIAMSON et DESOWITZ, 1956)(3). Malheureusement ces complexes se sont révélés
inutilis~&les dans la pratique à cause des t'actions tissulaires qu'ils provoquent
à l'endroit où ils sont injectés. De tels complexes *associent deux tidicaments
trypanocides, mis il est pratiquement possible d'insolubiliser les trypanocides
usuels par d'autres composés chimiques non trypanocides. Nous nous sommes demandé
quelle serait 17activité de certains trypanocides lorsqu'ils sont associés à un
produit relativement simples le potassium~&luminiu sulfate, considé& comme un
adjuvant de l'immunité sur un plan e;énéral. Notre attention s'est d!abord portée
sur l'acéturate de diminazène.
MATERIEL ET METHODES
L'acéturate de diminazène utilisé dans les essais relatés ci-dessous pm-
vient de la pr&entation cormerciale du produit (*a>. Une solution à 5,s p.100 de
la sp&ialité est mélangée à parties &$Les avec une solution 0,Ol M de potassim-
ralminium sulfate KAl (SO41 2, 12 H2C). Le &%mge pticipite et, du fait de sa très
--------------------------------------_I__________________-----.~----------------
(*) Institut sénégalais de Recherches agricoles - L&oratoire national de 1'Elevage
et de Recherches vétérinaires - B.P. 2057 - DAKAR-HANN (Sérié@).
(**> B&-énil, Hoechst Farbwerke
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faible solubilit6 dans l'eau, le complexe se dépose au fond du -récipient. :?pres
élimination de la phase liquide, le prkipité obtenu est séché et conservé puis
utilisé dans des essais de thérapeutique. Les premières 6preuves ont porté sm
des rats infectés par Trypanosoma brucei brmcei. La posologie et le nombre de lots
figurent dans les résultats ci-dessous. Divers autres essais se rapportent à des
chèvres et des moutons infectés par T.vivax et à deux bovins Zébu inoculés avec
une souche de T.congolense, Fans tous les cas; les animaux n'ont 6té trait&
quvapr& constatation de parasitémie,
consécutivement 2 l'infection par la serin-,
gue. Après administration intrapéritonéale ou intramusculaire du complexe théra-
peutique, les animaux sont observés quotidiennement pour juger des effets de la
&dication. Des épreuves de réinfection, pratiquées plusieurs semines après le
traitant afin d'évaluer un pouvoir protecteur éventuel, intéressent l'ensenble
des anin-wx.
PXSULTATS
A - Activité trypanocide du pkipité
1. Epreuves sur rats infectés par T.brucei brucei
Tous les rats utilisés ont?%ucei brucei (stock IWA??G/S7/IMEL/k+)
qui entraîne la rrwt chez le Rat en 7 2 8 jours. Ils sont traités par le
composé en injection intrap&itonéal.e quand la parasitémie est manifeste.
Un premier lot de 4 rats a. reçu 1 mg/1 ml p<ar rat. Cette dose est nette-
ment insuffisante car il y a eu 3uLwntation de la parasitémie à lsobserva-,
tion pratiquée le lendemain. Aussi ce @me lot a-t-il reçu ce jour là une
seconde dose de 3 mg par rat, dose contenue dans 0,5 ml de suspension. Les
rats sont négatifs 48 heures ap&s. La parasitémie est réapparue chez un
rat 9 jours apr& traitement et chez un autre 33 jours après, avec mortali-
té respectivement au 3O jour et au 2O jour qui suivent la rechute.
Les &sultats obtenus dans deux autres lots de 4 rats chacun
tous traités à raison de 3 mg/055 mllrat. conduisent à la conclusion que la
dose administrée n'entraîne pas la cure : les trypanosomes disparaissent
du sang 24 3 72 heures aprk traitement mais &appcvaissent chez plusieurs
rats dans des délais de 9 \\$ 42 jours ; la mort survient chez ces rats 2 à
3 jours après la réinvasion par les parasites.
-3
Les épreuves ont é-t6 reprises en utilisant une dose plus élevée. %ux
lots, de 10 rats chacun, sont utilisés dans cette seconcie série, l'un traité par
lva&turate de diminxzène non tiifié, à la dose de 5 mg par rat, 17autre par le
clcxipsé aluné ) égaleront à raison de 5 mg/1 ml/rat. G.ns ce dernier lot les para*
sites disparaissent en 24 heures tandis que dans le premier les délais sont de
1+8 à 72 heures. De plus le trypanocide non modifié n'a pas complètement gugri les
rats à la dose administ&e puisque les trypanosomes ont &apparu dans le sang une
semG.ne après traitement, et 8 rats sur 10 sont mxts 3 à 6 jours après la rechute
Par contre le composé aluné entraîne une disparition des trypanosomes en 24 heures
sans rechute en 37 jours d'observation portant sur 9 des rats ; le dixième rat
est mort au 30° jour, sans toutefois pr&enter de parasitémie.
2. Sur chèvres et moutons infectés avec 'T.vivrax
Sixchèvres et deux moutons ont reçu T.vivax (stocks NBAO/75/LABEL/20 et
FWENGUINE/75/IABEL/21). Après constatation de la parasitémie, ces animaux
sont traités à raison de 5 mg/kg de composé ;aluné dilué à 7 p.100, voie
intramusculCaire. Tous sent négatifs 24 à 48 heures après le traitement. :iu-
curie rechute n'a été observée dans des d&ais de 17 jours au moins.
3, Sur bovins infectés par T.congolense
Deux bovins ayant reçu T.congolense (stock WILOR/64ILABELIl) sont trai-
tés quatre S=ine s après l'infection alors qu?ils sont fortement parasité-
miques. Ils sont négatifs 48 heures après et le demeurent pendant 33 jours.
B - Activité protectxice
Chez les divers animaux ci-dessus, l'é-tude de lvactivité tryp‘anocide di--
recte a été suivie de celle de l'activité chimiopro+ylactique du corryx>sé aluné
dans des épreuves de r%%n.fection. Les rats réinoculés avec T.brucei brucei dans 1:
deuxième série de 10 lots mentionnée ci-dessus se sont bien comportés : 8 sur les
9 qui ont survécu 37 jours apr& un premier traitement ont reçu T.brucei brucei
au bout de ce temps sans présenter aucun parasite pendant 44 jours d'observation
.*. / **.
-4
le 9O rat est mort au 5O jour de la r&infection mais en res+aut aparasitémique.
Concernant les chèvres4 les renseipements obtenus tendent à montrer une activité
protectrice relativement faible à la dose de 5 mg/kg et avec des réinfections par
des stocks homologues de Trypanosoma vivax. En des intervalles compris entre 17 et
61 jours les &infections ont régulièrement provoqué la parasitémie des chèws.
Plus intéressants sont les &sultats obtenus chez les deux bovins infectés de
T,congolense : ils ont reçu chacun à la première épreuve 7 x 107 trypanosows,
puis 7 x 108 tryp,anosomes à la seconde épreuve, pratiquée 33 jours apr& le trai-
tement de l'infection initiale. Suivis pendant un moisj ces deux bovins n'ont pé-
senté aucune parasit&ie consécutive à lgépreuve infectante.
CONCLUSIWS ET DISCUSSIOX
L'aceturate de diminazène, sous la présentation actuellement utilisée en
th&apeutique vétérinaire: lorsqu'il est en solution, pr&ipite par adjonction d'we
solution de potassium-aluminium sulfate. Le p&cipité obtenu a une grande activité
trypanocide ti la dose de 5 mg par kg puisqu'il guerit sans rechute les animaux infec
tés par T.brucei brucei, ou bien par T.vivax, ou enfin T.congolense, dans les
limites de l'e,xp&imentation relatée, Ce m$me pr&iG.t& pourrait sans doute avoir
.'
des Iropriétés chimiopréventives plus marquées que le produit de base. R la dose
d7utilisation il n'a ét& constaté aucune &action &nérale aprGs son administration
par voie intraperitonéale au Rat ou intramusculaire aux Ruminants. Chez deux des
chèvres 3 autopsiees pour la circonstance, le produit a été retrouvé in situ au
. .
I-
point d'injection dans le muscle popliteus, sans constatation de &action inflanma-
taire .
L'effet trypanocide du composé setile de même nature que ce qui a 6té
observé avec l'acéturate de diminazène seul, notamment 1' accentuation des structures
m&tachromatiques et des g-raaulations basophiles avant la mort des trypanosomes
(TOUFL, 1967) ('2). La mort des trypanosomes survient à partir de la 7' heure qui
suit le traitement. On observe alors la lyse cytoplasmique ou l'involution en des
formes arrondies mais Stans vacuolisation excessive. Les mononucléaires monocytes du
sang ont une activite de phagocytose et leurscytoplasmes renferment de nombreuses
inclusions basophiles ; plusieurs sont accolés à des trypanosomes. Les parasites
disparaissent du sang en 24 heures (les observations qui indiquent 48 heures se rap-
portent à des analyses pratiquées le lundi au lieu du dimanche),
/
. . . ..O
- 5
Concernant le pouvoir protec-teur les résult&s sont cependant discordants
du fait qu'une du&e relativement courte a ité obtenue chez les petits ruminants,
alors qu'elle dépasse 30 jours chez les r&s et les deux bovins. C'est que,dms le
cas des chèvres et des n~utons,l'objectif était d'induire une tisistance des <mi--
mux par infection suivie de traitement puis par &infections massives (plusieurs
fois 10' trypanosomes par animal) suivies dfautres traitements. Trois à quatre
cures consécutives n'ont pas produit l'effet escompté. QuFen serait-il dans des
conditions mins &V&~S 3 Cela est 3 élucider par d'autres épreuves.
~J~US avons souvent d&&gé jusqu fZ maintenant le prkipité utilisé ;>ar
des appellations assez vagues, et c'est à dessein. S'agit-il d'un complexe à lgins-
tar des produits obtenus par association de suramine, trypanocide à saction acide
avec d'autres trypanocides à &action alcaline corme la quinapyramine ou les deri-
vés de la phénanthridine ? Liétude chimique est 2 faire. Un complexe est défini
comme étant un composé chimique ayant la structure d'un sel mais n'est pas un elec-
trolyte. Le composé obtenu avec le potassium-aluminium sulfate est faiblement solw
ble dans l'eau. La couleur de la suspension aqueuse est dPun jaune safran lé&+
ment plus pâle que la solution d'acéturate de dkinazène. Il serait hasardeux,de
notre part,de se prononcer sur la nature chimique exacte du prkipité testé dans
ces expériences, d'autant que selon F~AIXZLOUGH, 1962 (11, l'antipyrine (phenyldime
thylFyrazolone1 aurait été ajo& depuis 1959 au produit de base pur le stabiliser
Ce qu'on peut direj c'est qtie notre melange a une bonne activité trypanooide,
Dîautres experiences sont en cours avec ce &me COT& et d'autres trypanocides
associés à l',alun. Vais le potassium-altiiwn sulfate à 0,Ol M ne précipite pas 1~
quincpyramine, ni le bromure de dimidium, ni 19isom&tamidium à 0,Ol P! j le pyrithi-
dium à O,Ol M n'est que faiblement prkipité. Puisque l'alun de potassium est un
adjuvant de l'innnunité,
on peut fonder quelque espoir sur des formulations l'osso
ciant aux divers trypanocides à des doses dénuées d'effet toxique.
. . ./ . . .
BIRLIOGRAPWIE
l- Ff~RCIDJGfl (R. >.- A sumary of the use of Berenil in Kenya. 1 S C T R,
9O &Union, Conakry 1962, OIJA/CSTRj publication n083, pp* 81 - 86.
2 -- TOURE (S.X. >.- Cinétique de la rmrt in vitro de Trypanosom vivax et
T.congolense au contact de &dicaments trypanocides.
Rev.Elev.r,~éd.vet.Pays trop., 1967, 20
- (1) : 109-114.
3- WILLIAXSOH (J.) et DESOVITZ (R,S.).- Prophylactic activity af 3xmmi11
complexes in animal Trypanosomiasis. ?.Jature, London, 1956, 177,
1074 - 1075.