INSTITUT D'ELFVAGE ET DE ME3DECINE VETERINAIRE DES PAYS...
INSTITUT D'ELFVAGE ET DE ME3DECINE VETERINAIRE DES PAYS TROPICAUX
LABORATOIRE NATIONAL DE L'ELEVAGE ET DE RECHERCHES VETERINAIRES - DAKAR
--w-
COMPTE RENDU SUCCINCT DES RECHERCHIXS SUR
l
L'AFLATOXINE EFFECTUEES PAR LE LABORATOIRE
i
NATIONAL DE L'ELEVAGE ET DE RECHERCHES VEIZRINAIRES
2’
Juin 1967

I- INTRODUCTION
Dès 1960, la découverte par les chercheurs anglais de l'aflatoxine,
facteur toxique provenant de la contamination des arachides par 1'Aspergillus
flav-us suscite l'intérêt des spécialistes de la nutrition animale et humaine.
Le Sénégal, gros producteur d'arachide se trouve directement inté-
ressé par ces études, c'est ce que souligne, dans un rapport remis au Gou-
vernement le 17 décembre 1963, un groupe de travail réunissant divers orga-
nismes de recherches de Dakar. Ces derniers, dans le cadre de leurs voca-
tions respectives proposent alors des programmes de recherches qui abordent
les 3 principaux aspects du problème posé par l'aflatoxine, à savoir :
l"- Un aspect agronomique concernant la contamination des graines d'arachide
et les moyens à mettre en oeuvre pour la prévenir.
2O- Un aspect intéressant la santé publique en raison de la consommation de
l'arachide par des groupes humains de plus en plus importants.
3”- Enfin un aspect économique justifiant une étude particulière de la
toxicité de l'aflatoxine dans le but d'écarter le discrédit qui, du
fait d'une insuffisante connaissance du problème, risquerait d'atteindre
la production de l'arachide dans un de ses sous-produits, le tourteau
devenu un des éléments primordiaux d'une alimentation rationnelle du
bétail.
A l'étude de ces questions faisant l'objet des programmes de
recherches proposés, se surajoute une opération connue sous le nom d'FXAGRAF,
conduite sous l'égide de l'UNICEF, visant à produire et à divulguer un ali-
ment de l'enfance à base de farine d'arachide
sûrement exempte d'aflato-
xine. Pour obtenir ce résultat, il est fait appel au concours des organismes
déjà concertés par les recherches précédentes.
II - PROGRAMME DE RECHERCHES A LONG TEFtME DU LABORATOIRE NATIONAL DE
L'EIXVAGE ET DE RECJ3ERCHES VETERINAIRES DE DAKAR
Ce pwgramme complété par une fiche de prévisions de dépenses a
obtenu l'accord du Ministère de 1'Economie rurale.
.-
Ses objectifs tendent à :
- fixer les limites exactes de la toxicité de l'aflatoxine au sein des
diverses productions animales,
. . / .*

.
- mettre en &ri.dence les mécanismes d'apparition des troubles observés chez
les animaux domestiques.
Il faut d'abord souligner que le problème de l'aflatoxine se pose
différemment en alimentation animale et en alimentation humaine. Dans le
premier cas, en effet, il se ramène à la connaissance précise de la dose
léthale compromettant la vie même des animaux et de la dose tolérable compa-
tible avec une productivité économique de l'élevage. Le problème humain est
cependant concerté par l'éventuelle contamination des productions animales
(lait - viande) par l'aflatoxine.
D'une durée minimale de 3 ans, ce programme comporte les points
suivants :
1*- Etude de l'action de l'aflatoxine sur la croissance et l'état d'entre-
tien des bovins de race locale
Ces recherches doivent être menées essentiellement en fonction
de la composition de la ration en faisant varier son taux prot&que et sa
richesse en acides gras polyinsaturés.
2"- Etudes des effets de rations contaminées sur :
. l'état de gestation et son évolution
. la production quantitative du lait
. la croissance du jeune
. l'éventuelle contamination et toxicité du lait.
Pendant toute la durée de l'expérimentation, les animaux sont
observés dans leur comportement et subissent des tests biochimiques en vue
de détecter l'apparition précoce de désordres organiques.
II - RECHERCHES DEJA EFFECTUEES DANS LE CADRE DE CE PROGRAMME
Les travaux déjà exécutés intéressent :
lb- Une première série de recherches sur les effets de l'aflatoxine sur
la vache laitière et sur le jeune nourri à la mamelle avec une dose
forte d'aflatoxine : 1,5 mg par animal et par jour.
.
2O- La reconduction du même protocole sur un lot de 15 vaches avec les
taux de contamination plus faible : 0,5 mg et O,25 mg.

.
3
.
3= Les effets de l'aflntoxine sur la fécondité des femelles.
4"- Les recherches concernant la présence d'aflatoxine dans les fanes d'a-
rachides servant de fourrage aux animaux.
5"- La contribution du Laboratoire national de 1'Elevage et de Recherches
vétérinaires à l'opération EXAGRAF.
l- Effets de l'aflatoxine sur la vache laitière et sur le jeune
nourri à la mamelle
Pour des raisons d'opportunité, cette recherche qui constitue
le deuxième point du programme à long terme a été d'abord exécutée.
Pour mieux faire apparattre les effets du toxique chez l'animal,
l'expérimentation a été poursuivie avec des doses d'aflatoxine volontai-
rement fortes. En effet 1,5 gr d'aflatoxine par animal et par jour équivaut
à l'administration de 5 kg de tourteau d'arachide à 0,3 p.p.m., taux de
contamination déjà élevé si on se rapporte aux résultats analytiques por-
tant sur des tourteaux contaminés en provenance du Sénégal. Or, une ration
de 5 kg de tourteau s'écarte des conditions habituelles de l'élevage.
Les recherches ont porté sur 12 génisses gestantes de race Ndama
âgées de 4 à 5 ans, réparties au hasard en 2 lots.
Un lot témoin et un lot d'animaux traités recevant journellement
1,5 mg d'aflatoxine contenu dans une quantité variable de tourteau toxique
produit au Laboratoire et administré par voie orale dès le lendemain de la
mise bas, pendant 4 mois.
Les adultes sont pesés une fois par semaine, les veaux avant et
après chacune des tétées journalières, ce qui permet de déterminer la
quantité de lait produite.
Chaque semaine également, les animaux sont soumis à une prise de
sang en vue des analyses et des tests de contrôle permettant de détecter
et suivre les désordres organiques susceptibles d'appara?tre, Les tests
retenus sont :
- numération globulaire et hématocrite,
- dosage des protéïnes totales du sérum, des lipides totaux, des transami-
nases sériques, test de Mac Lagan,
- dosage sur les urines de l'albumine, des sels et pigments biliaires, de
l'urée,
- recherches de l'aflatoxine dans le lait, dans la viande et les viscères
des animaux.

,
4
Résultats
Les résultats ont fait l'objet d'un rapport adressé au Ministère
de 1'Economi.e rurale et d'une publication parue dans la revue de 1'I.E.M.V.T.
Les conclusions générales résultant de cette recherche avec des
doses d'aflatoxine volontairement élevées peuvent se résumer ainsi :
- d'une façon générale, les adultes ont assez bien résisté à l'intoxication
par l'aflatoxine. Les seules réactions toxiques ont été mises à jour par
certains tests biochimiques, en particulier, les dosages portar': sur les
transaminases sériques et sur le taux des lipides totaux. Ces tests si-
gnent une atteinte hépatique précoce suivie d'une période d'adaptation.
- il faut souligner l'importance des réactions individuelles vis-h-vis du
toxique. Certains animaux paraissent dotés d'une certaine capacité à
détoxiquer l'aflatoxine.
. chez les jeunes, au contraire, les répercussions sont plus sensibles. Il
apparait un retard de croissance significatif chez les veaux dont les
mères absorbent la dose forte de 1,5 mg de toxique.
Cette déficience et les mortalités observées paraissent does
essentiellement à la présence d'aflatoxine dans le lait qui constituait
l'unique nourriture des jeunes,
2 - Nouvelle expérimentation suivant le même protocole mais avec
des doses plus faibles d'aflatoxine
Après avoir recherché les effets d'une dose expérimentale élevée,
il convenait d'étudier ceux qu'étaient susceptibles de produire des doses
plus faibles de l'ordre de celles que dans les conditions normales de l'éle-
vage peuvent apporter des tourteaux contaminés,
Cette deuxième phase de recherches a été poursuivie pendant un
an et demi. Elle a intéressé trois lots de 5 femelles gestantes. Un lot
recevant 0,5 mg par jour et par animal, un autre 0,25 mg, enfin 5 animaux
témoins.
A l'heure actuelle, l'expérimentation sur l'animal touche à sa
fin, il reste a effectuer un gros travail d'interprétation statistique qui
permettra d'établir un rapport comme pour l'étude antérieure.
c
3 - Effets de l'aflatoxine sur la frigidité, la stérilité et l'évolu-
tion de la gestation sur les bovins tropicaux
J
Cette expérience a pour but de rechercher si l'aflatoxine sus-
ceptible d'être apportée dans l'alimentation par des tourteaux toxiques,
peut altérer la fécondité normale des femelles dans les diverses étapes de
la gestation.
., / *.

Elle s'est déroulée à Sangalkam dans l'enceinte de la ferme
annexe du Laboratoire national de 1'Elevage et de Recherches vétérinaires
de Dakar et porte sur 10 femelles métis zébu ndams, '&gées de 4 à 6 ans
et réparties en 2 lots.
Le lot traité reçoit à partir du ler février 1966, par adminis-
tration orale forcée, une quantité variable de tourteau toxique de produc-
tion correspondant à 1,5 mg d'aflatoxine par jour.
L'oestrus est provoqué chez tous les animaux par injection
d'hormone anti-hypophysaire de stimulation folliculinique. Les animaux sont
saillis et les poids sont relevés jusqu'à la mise bas. Le test final étant
le poids du jeune à la naissance.
Résultats
La comparaison entre le lot témoin et.le lot traité permet de
conclure que dans les conditions de l'expérience, l'administration journa-
lière de 1,5 mg d'aflatoxine n'a produit aucun effet sur la fécondité des
femelles ou l'évolution de la gestation.
La fécondité des femelles de race locale ne parait donc pas
altérée par la présence de doses fortes d'aflatoxine dans la ration.
4 - Recherches sur la présence d'aflatoxine dans les fanes d'arachide,
utilisées comme fourrage au Sénégal
Cette étude a fait l'obfiet d'une publication parue dans la
revue de 1'I.E.M.V.T. (Tome XIX - no 4 1966).
Cette recherche a été initiée à la suite de troubles sporadiques,
d'origine mal définie, survenus sur les animaux d'expérience entretenus
au Laboratoire ou à la ferme annexe de Sangalkam. Le seul facteur commun
entre les diverses espèces affectées étant la fane d'arachide servant
d'aliment de base à tous ces animaux.
Les études intéressent les points suivants :
- Extraction et dosage de l'aflatoxine sur :
. un échantillon moyen de paille
. des échantillons de fouilles
. des échantillons de tiges
c
. des échantillons de coques.
- Contr6le de la toxicité des extraits par les méthodes biologiques utili-
sant les effets sur le caneton de 1 jour, les effets sur l'oeuf embryon.&,
Ces recherches ont permis l'établissement des conclusions suivantes o
l /
* . .

‘.
4
Le.
,
d
a- L'aflatoxine est susceptible de contaminer les fanes d'arachide qui,
au Sénégal, servent souvent à l'affourragement des animaux.
b- Dans les lots examinés, stockés dans des conditions exceptionnellement
mauvaises, le taux de toxique s'avère très élevé (3 p,p.m. d'aflatoxlneB
et 6 p.p,m. de G dans un échantillon moyen).
Un bovin absorbant de 4 à 5 kg de paille peut donc ingérer de
12 à 15 mg d'aflatoxine R 9 dose toxique très élevée capable d'expliquer
les accidents mortels survenus, Le caractère sporadique de ces accidents
tient aux susceptibilités individuelles déjà soulignées au cours des
précédentes expériences.
c - Le taux et la nature de l'aflatoxine diffèrent avec les parties de la
pla,te, les feuilles paraissant les plus contaminées et d'une excep-
tionnelle richesse en aflatoxine G . Ce fait pourrait être en rapport
avec l'hypothèse d'une invasion de l'arachide par le champignon durant
son cycle végétatif et non plus seulement lors du séchage de la récolte.
d- Les greniers ayant contenu des fourrages à forte teneur en aflatoxine
demeurent contaminés et 1'Aspergillus flavus, dans des conditions par-
ticulières de chaleur et d'humidité, peut envahir une nouvelle récolte.
5 - Contribution à l'opération FXAGRAF
' EXAGRAF" = Expérimentation AGRicole contre 1'AFlatoxine.
-
-
Opération menée dans le double but :
- d'obtenir une farine sains pour aliment de sevrage riche en protéines,
de provenance locale,
- de déterminer si les conditions d'arrachage et de conservation de la
récolte d'arachide ont une incidence sur le développement des moisissu-
res et la production d'aflatoxine.
Cette opération a commencé pendant la campagne agricole
1964-65 (EXAGRAF 1) et s'est poursuivie en 1965-66 (EXAGRAF II) et en
1966-67 (EXAGRAF III).
Lesxachides récoltées sont séchées selon plusieurs procédés :
- artificiellement dès la récolte grâce à un séchage mécanique :
. sur perroquet
. sur meules conditionnées (aérées)
. sur meules ordinaires.
I,/. .

7
Des échantillons de graines sont adressées aux différents labo-
ratoires pour dosage de l'aflatoxine par rapport au seuil de 0,05 p.p.m.
Les arachides dont le taux est inférieur à 0,05 p.p.m. sont seules considé-
rées val&les pour la fC&rication de la farine de sevrage.
Le Laboratoire national de 1'Elevage et de Recherches vétérinaires
a narticiné aux trois opirations EXAGRAF en effectuant les dosages d'efla-
toxine sur les échantillons qui lui furent adressés.
EXAGRAFI
1
EXAGRAF II
EXAGRAF III
I
Lb3 éch. lNbre éch
Nbre éch. Nbre éch
Nbre éch. Nbre éch-
positifs
l
positifs
.
positifs
.
analysés
analysés
analysés
0,05 wm
W5 wm
0,05 PPm
Séchage artificiel
3
19
4
19
0
1 2
perroquet
0
7
7
26
0
17
vleules conditionnées
1
4
0
2
Veules ordinaires
41
228
18
102
28
89
1
258
147
120
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Soit au total durant les 3 campagnes : 5 2 5
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O- Travaux à exécuter
Une dernière phase d'études constituant la premiére partie du
programme de recherches à long terme devait %tre réalisée au cours de
l'Cann& 1967.
Il intéresse les effets de l'aflatoxine sur la croissance et
l'état d'entretien de jeunes taurillons de race locale, en fonction de la
naturc qualitative de la ration.
La réalisation de cette recherche n'a pu être entreprise en
raison :
- de difficultés dans la production du tourteau toxique lié à un vieillis-
sement des souches d*Aspergillus flavus,
- d'un approvisionnement insuffisant en paille de riz qui doit servir de
base aux diverses rations à tester.