I m - - - - m - - - - I,S,R,Am/D,R,P,S,A, ...
I
m - - - - m - - - -
I,S,R,Am/D,R,P,S,A,
I,S,R,Am/D.R,P,S,A,
m - - - - m - - -
LABORATOIRE NATIONAL,D5 L’ÉLEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
---------a
.Bn Pa 2057 - DAKAR/HANN
-
DU PORTAGE DE MYCOBACTERIUM PARATUBERCULOSIS
(AGENT DE LA PARATUBERCULOSE OU MALADIE DE JOHNE)
-
CHEZ LES BOVINS AU SENEGAL
P A R
KONTÉ, Mm ’ ; BÂ, S.M. ’ ; N D I A Y E , A,Md ET TALL, A. ’
RÉF, No O@/PATHO, INF./LNERV,
-.--------.---
.-.- --_---_--
1---11-
-
---.-----
-.---..
---_A -..-_-
._.--.
--_-
------
-...-
-__-
1 : Laboratolrt:
n a t i o n a l d e 1 ‘Elftvdge ct Ut, Rc*ch( r-c.!t~s vCtc?r in:iirc . .
2 : E.I.S.H.V. de Dakar : T h è s e d e D o c t o r a t v é t é r i n a i r e : contribut.ion
j
l ’ é t u d e d e l a P a r a t u b e r c u l o s e d e s b o v i n s a u S é n é g a l ,
1990,
Il
34.
P
M

R E S U M E
Les auteurs ont entrepris un dCpist:aqr bact:C;ioloq1qur~
systbmatique de Hycobacterium paratuberculosis c11ex 1~:s ijo-
vins importés et autochtones pour une étude de f,lévalcnce du
portage latent.
Seuls les animaux importés de race MontbGI.iar~:~ - ,..-
ploités dans la zone des Niayes pour la ~~roductlori ic:l' ~C:I':,
sont reconnus positifs avec une prévalence de 10,62 p.100
pour l'ensemble des troupeaux laitiers.
MOTS-CLÉS : Sénégal - bovins - portage - Mycobacterium para-
tuberculosis - paratuberculose - culture bacté-
riologique.

DU PORTAGE DE MYCOBACTEHIUM PAKATUBERCULOSIS
(AGENT D E L A PARATUBERCULOSE
o u M A L A D I E D E JOHNE)
C H E Z L E S B O V I N S A U S É N É G A L
~pr-6s le p r e m i e r c a s d e paratuberculose dragnost iqui r’:
/Il.%
un bovin d’importation élevé dans la zone des Niayes (4), un dkpy t,: .I~;L'
bacteriologiquc systématique de Hycobacterium paratuberculosis < bb t.r~cre-
pris en direction de l’ensemble du bétail importe, d’unci ~;II t , (’
-! ( 1171
échantillon de chacune des deux races bovines autochtones d,:ni tf.111 bio-
t o p e r e s p e c t i f , cn vue d’une étude de prévalencc.
P o u r d e s é c h a n t i l l o n s l i m i t e s cn nombrc~, lc dCpist’~g:(~ ~)II*Y(! 1;;
v a l e u r d ’ u n d i a g n o s t i c i n d i v i d u e l c t , d a n s lc c a s d’c~sp~cc, la bact&rio-
c u l t u r e s e j u s t i f i e , car seule à même d’établir un diagnostrc dc ccrti-
tude à l ’ e x c l u s i o n d e s a u t r e s é p r e u v e s , intradcrmo-r-éact IOH (.I s1.r ologic,,
qui donnent lieu à des erreurs, par éxcés notamment, que L les <{\\IV holcnt
L e u r s q u a l i t é s p a r a i l l e u r s (depist.agr de port-c\\lrs p:-fcocc~ 1” f.!iblc
coût de revient, pour l’intradermo-réaction) (1, 8).
MATERIEL ET METHODES,
1 -
M A T É R I E L ,
1.1. - EFFECTIFS EXPERIMENTAUX.
Ils sc prépartissent comme suit :
- 110 b o v i n s d e r a c e M o n t b é l i a r d e t 3 d e r a c e Pakistanaise3 r-e-’
prhsentant t o u t e s l e s u n i t é s d ’ e x p l o i t a t i o n d u bétail lsitzer
importé dans la zone des Niayes, proche de Dakar, &levé:, <‘ n r 3 c e
pu i- i: ;
- 1 0 0 ~&~LIS Cobra d u Contre de Kcchcrchcs zool.cctlrli.clrl(,s dc, 1);1t\\t.;l,
I%II zone N o r d :

z
- 3 -
- 100 taurins Ndama dans la zone de Koldn, a11 Sud ~II Pays.
I,es animaux de plus d’un an d’âge sont concernés.
1.2. -
LES PRELEVEMENTS.
L . 2 . 1 . -
Nature des prélèvements.
Il s’agit du produit de râclage de la muqueuse rectale ; 10 gram-
mes environ sont prélevés (1, 3, 5, 6).
L-2.2. -
Matériel de prélkvexnent.
11 se compose des éléments suivants :
- gants en vinyle à usage unique,
- tubes stériles de 40 ml en polyéthlène, fermant hermétiquement,
- g l a c i è r e .
I-2.3. -
Matériel de traitement des prélèvements.
- Tubes cn verre de 50 ml, stériles,
- Pipettes stériles de 20 ml et de 5 ml,
- Solution aqueuse à 0,75 p.100 de chlor-ut-c d’ilcx~ldCcylp~ridinii,rn
(SICMA),
- Eau d i s t i l l é e .
1.3. -
MATERIEL DE CULTURE.
- Milieu de culture.
C’est le milieu de Herrold (milieu agar ‘3 l’œuf), rendu sdlcctif
par addition de mycobactine J et d'amphotéricine B (1, 3, 5, 6, 7, 10, 11).
Ce milieu est réparti dans des tubes de diamètre 18 mm à vis et coule en
pente (3 pentes avec mycobactine et 1 pente sous mycobactine).
- Etuve bactériologique.
I,a culture a lieu dans une étude à 37’C.

- 4 -
1.4. -
MATERIEL DE BACTERIOSCOPIE.
- Kit-réactif classique pour la coloration de Ziehl-Neelsen
- Lames et microscope.
I I - M É T H O D E S ,
1 1 . 1 . - METHODES DE TERRAIN.
Les animaux sont visités tôt le matin avant leur départ D~UT. 1~
p”: Il ragf . I,(
rnclage d e l a m u q u e u s e s rectale s’ttffe~tutb s u r 1 ‘nnlmni Im-
mot,:lisC dans un couloir de contention ou sur l’aire d’attache du trou-
pc,ic,. La main de l’opérateur est introduite dans le rectum pour le vider
cl L’ ,vn contenu puis la muqueuse est grattée délicatement avec Ics doigts
g a n t é s ;
le produit de râclage, d’au moins 10 grammes, est recueilli dans
1<! - tubes de r é c o l t e s t é r i l e s q u i s o n t ensuil.c,s fc:rmc’ls IitrnG t iqucmcbnt C>L
pl,~cés dans la glacière (contenant des accumulateurs de fri.gurics ou cl<*
I n };lnce) a p r è s ident.ificntion.
Les pr&lfvcmcnts,
q u i n e sont c:n aucun cas congc LCs, ;IL t.ericl(:riL
ainsi 48 à 72 heures, le t e m p s dc l’achemincmcnt,
a v a n t d’ftre tr;iiti.s
nu Laboratoi rc,
X.2. -
METHODES DE LABORATOIRE.
L’homogénéination d e s p r é l è v e m e n t s e n e a u distillée .1~1vf. 1 iin(
bactérioscopie après coloration de Ziehl, 13 dCcr,nt Aml.nrir 1 OT- a :l
tIi;rur-rn
d'hexadécylpyridiniu, les techniques d’ ensemencement CL rit. ~\\.t..:,-~t ;b, o-
c è d e n t d ’ u n e m é t h o d o l o g i e d&sormais c l a s s i q u e ( 3 , 5, 6 , 9 , 1 1 ) .
R E S U L T A T S ,

- I,a c u l t u r e a d o n n é les r é s u l t a t s f igur;lnt- (‘1~ Li:t..11 1 1
!
c:,
Tableauxn’2, a e t b).
- A u c u n r é s u l t a t p o s i t i f ,
ni en bactérioscopie sur prélèvement,
ni après culture, n’ été enregistré chez les Pakistanais, les
zébus Gobra et les taurins Ndama.
TABLEAU No 1 :
BACTERIOSCOPIE A PARTIR DES PRELEVEMENTS.
-. . -. ..-_... .
ZONE D'ORIGINE
NOMBRE D'ANIMAUX
BACTERIOSCOPLE
p. 100
RACES
EXPLORES
POSITIVE
.-" - - ..-- .__, . . -_
-
* . .
-
NIA%S
Nontbéliarde-
113
1%
10,62
Pakistanaise )
-_ _..-.-. - -- .._....-._-..~ -.
__ -.- -. .._ __ -.---.-
~-~-_I_-
r- _... - -
DAHRA
100
0
0
(hb I‘<l
/
_ ^ _ .- _ _ .-._. . - _ .-
_ ._
- ._ - .__
_ _
$
KOLDA
Nd ama
100
(3
0
,
_------ .-__ --. .I ..-_ - -
.--._
-fI
T O T A L
313
12
/
3,83
/

-
h -
TABLElU No 2 . A :
RESULTATS DE BACTERIOSCOPIESETDE CULTURE (Zone des Niaycs).
C U L T U R E
UNITE
NUMEROS
BACTERIOSCOPIE
D'EXPLOITATION
D’IDENTIFICATION
SUR
PRELEVEMENTS
-._- _ _---_- -.-.-- -
il;
-
/
2 /
1

i+i+
450
+
7 3
i 3
+
is
4 î
-!-
_._.._ -. -
-- -IL--
.---!‘.
..
‘l- .-
,
-
,-
I

-
j
-
59
+++
+
!
i+
1
. ..____ -_-.-- .--- --..
t
32
++
73
-- . --
243
+
73
u 21
_-.--~_-.--
~~--
52
+i-++
7 3
_- .._- _ - _
t
9
++
73
867
+-t+
]._. -
--..-- .-I-... -.IL
1
2
73
t-
---.
---
+
+
++
++
72
+++
!---
1- /3,I4__---j-1273
--
3
+
+
4
l
-
---L-Y -_.
-
l
-.

- 7 -
TABI,EAU No 2 - B :
RJZXLTATS
DE BACTERIOSCOPIES ETDE CULTURE (Zone des Niaycs).
-
^
_
.-_.
C U L T U R E
/
-..-
________ -.-.---.- --_- --- ---.. .____.____
UNITE
NUMEROS
1
/
I
BACTERIOSCOPIE
j
Délai de
1

D’EXPLOITATION
D’IDENTIFICATION
SUT
Colonies;
culture
T u b e s
Ziehl I Contamination
PRELEVEHEKTS
tisibles
/
(en jours)
I
1..
-
_-.--
____ ._.- .__. -..---
j--
t-
1
2
+
+
+++
7 6
3
+
++
4
+
u 54
t
14
+
76
t---.---t-~--i-
._ _ ._- .______ i
l
- -. --- --
-.___, --- ___. -... - 1
---t- -----------------.-
_-
/
+
;+;
I
I
+
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/
u 52
5 1
+-t-+
1
82
1
;

-
:
I
/
-
-
.-!
u 39
104
+-i-
7 7
+
+
-
- / _ _
/
_...
_
_

z
- 8 -
.*
- Des BAAR ont été mis en évidence sur des frottis de râclage de
la surface des milieux de culture contenant tous de la mycobac-
tine et ne présentant aucune colonie visible. Ces particularités
II'OIIL et& o b s e r v é e s q u e p o u r les fchantillons d e s Niaycs ?I l’cx-
clusion de ceux de Dahra et Kolda.
- La contamination des tubes de culture par les moisissures est
par contre g é n é r a l e : 4 9 t u b e s porlr 1~s Ninycs s[Ir 4TU s o n t c o n -
taminés,
73 sur 400 pour Dahra et 67 sur 400 pour Kolda.
- LeétdajbagInostic de paratuberculose à Hycobacterium paratuberculosis
étant/sur la base des caractères princcps suivants : acido-alcoolo-
résistance,
mycobactine-dkpendance à I’isolcmcnt, croissante lcn-
te en 8 semaines au moins (3, 6, 111, il s’ensuit qu’un diagnos-
tic de certitude est établi pour 8 animaux de la zone des Niayes.
Un diagnostic de forte prksomption est retenu pour 5 autres chez
lesquels la bactérioscopie sur prélèvement est positive.
- Les taux d’infection au sein des 4 exploitations dans la zone
des Niayes s’établissent comme suit :
. 7,l p.100 p o u r l ’ u n i t é d ’ e x p l o i t a t i o n no 39.
. 10,O p-100 pour l’unité d’cxploitat-ion n” 5?
. 20,O p-100 p o u r l ’ u n i t é d ’ e x p l o i t a t i o n n’ ‘î4
. 58,6 p.100 p o u r l ’ u n i t é d ’ e x p l o i t a t i o n ni i l .
Le taux global d’infection pour l’ensemble des animaux i.mporths df-
p i s t é s d a n s c e t t e z o n e e s t d e 10,62 p.100.
DISCUSSIONS,
- Les r é s u l t a t s d u d é p i s t a g e bactériologiqurx confirme l.‘implanta-
tion de la paratuberculose dans la zone des Niayes, chez les bo-
vins Montbéliards exclusivement, avec cependant, la réscJr-vc
evcntucllc dc n o n rcpréscntnt ivitc des j.cllant i lI011s du bi:(;li 1
ari1 ochtolrc d u p o i n t d e VUCI s t a t i s t iquc’.

L
.
9 -
-
Néanmoins,
au stade actuel de nos investigations, il est permis
d’avancer que les animaux Montbéliards sont importés à l’é-tat
de porteur latent, f a i s a n t l a m a l a d i e à l ’ o c c a s i o n s o i t d ’ a g r e s -
s i o n c l i m a t i q u e p a r t i c u l i è r e , s o i t d e p a r t u r i t i o n , s o i t d e p r o -
duction laitière de haut niveau, les autres causes favorisantes
( i n f e s t a t i o n s p a r a s i t a i r e s , malnutrition ou pâturages carences
en sels minéraux) étant prévenues dans le cadre d’un suivi sani-
t a i r e d e qualitk.
Les erreurs possibles, de toutes natures, dans les manipulations
bactériologiques, font que les animaux autochtones ne peuvent
être définitivement blanchis pour autant. Les recherches doivent
être poursuivies, associant méthodes immunologiques et bactério-
logie, en direction d’un plus grand nombre de sujets incluant,
e n p a r t i c u l i e r , ceux vivant au contact du bétail importé.
- F o u r c e r t a i n s é c h a n t i l l o n s , l a b a c t é r i o s c o p i e s ’ e s t r é v é l é e p o s i -
tive sur le prélèvement homogénéisé mais négative après culture ;
ce phénomène est rapporte par de nombreux auteurs (2, 3, 5, 111,
q u i l ’ e x p l i q u e n t s o i t p a r l a f a i b l e s s e d e s n i v e a u x d ’ e x c r é t i o n
bacillaire ou de portage (inférieur à 100 micro-organismes via-
bles par gramme de matériel ensemencé, soit par la faible
ré-
sistance des germes à surmonter l’étape de décontamination, soit
par la prédominance ou l’existence exclusive des formes cyano-
philes du germe dans l’étalement réalisé après râclage de la sur-
f a c e d e l a g é l o s e .
*- La contamination des cultures par les germes banaux et les moisis-
sures traduirait, quant à elle, la résistance de ces organismes
vis a vis de l’action combinée du décontaminant et de l’antifon-
gique ajoutés au milieu.

.
4
-
10
-
CONCLUSIONS,
1,~ portage latent de Hycobacterium paratuberculosis est mis en
évidence chez des bovins au Sénégal, mais uniquement au niveau des trou-
pCl;l~~x laitiers Montbéliards importés et exploités dans la zone des Niayes
,~ii 11 rrstc, c i r c o n s c r i t .
1,~:s bovins autochtones dépistés dans le cadre d e c e t t e invtstiga-
t 1 I\\II paraissent indemnes, une conclusion définiLivc ne pouvant- intervenir
qu ’ après une enquête élargie.

BIBLIOGRAPHIE
1 -
ARGENTE, G. ; HILLION, E. ; LAGADIC, H. ; LE MENEC, ?I. - Dépistage
des porteurs latents de paratuberculose : une solution, la culture
f é c a l e . Point vét., 1983.
% -
DESMECHT, H. -
Rendement comparé de diverses méthodes de disgnos-
tic dc la paratuberculose. Annls Méd. vét., 1977,
121 : 421-423.
3 - DESHETTRE, Ph. - Diagnostic expérimental de la paratuberculose des
r-um i ni111 L s
: d i f f i c u l t é s e t limites, H u l l . C.T.V., 1982, 2 : 4r)-r~1.
4 -
KONTE, H. -
La paratuberculose. Diagnostic d’un premier cas chez UI:
bovin d’importation au Sénégal. Rev. Elev. Méd. vét. Pays trop.,
1988, 41 : 147-148.
5 -
LAGADIC, H. ; MENEC, H.LE ; ARGENTE, G. - Techniques de culture de
Mycobacterium paratuberlosis : leur utilisation en routine dans un
laboratoire de diagnostic. Recl. Méd. vét., 1983, 159 (10):801-807.
6 -
MERKAL, B.S. -
Laboratory diagnosis of bovine paratuberculosis,
J. Am. vet. Med. AS~., 1973,
163 : 1.100-1.102.
7 -
MERKAL, B.S. ; KOPECKI, K.E. ; LARSEN, A.B. ; THURSTON, J.R. - Im-
provements in the Technics for Primary Cultivation of Hycobacterium
paratuberculosis. Am. J. vet. Res., 1964, 25 : 1.290-1.294.
8 -
KERKAL, B.S. ; LABSEN, A-B. ; KOPECKY, K-E. ; NESS, R.D. - Compa-
rison of examination and tests methods for early detection of para-
t u b e r c u l o u s c a t t l e . Am. J . v e t . R e s . , 1 9 6 8 , 2 9 : 1 . 5 3 3 - 1 . 5 3 8 .
9 -
KERKAL, R.S. ; LYLE, P.A.S. ; WHIPPLE, D.L. - Decontamination media
and
culture methods for Hycobacterium paratuberculosis.
Proc.
U.S. anim. Hlth A~S., 1982, 86 : 519-523.

- 12 -
10 -
MERKAL, B.S. ; Hac CULLOUGH, W.G. ; TAKAYAHA, K. - Mycobactins,
the state of art.
Bull. Inst. Pasteur, Paris, 1981, 79 : 251-259.
11 -
TROREL, H.P. -
La paratuberculose,
B u l l . Lab. vdt., 1981,
3 : l-13.