INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AG~~I;ES (I.s.R.A.)
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LABORATOIRE NATIONAL DE L'ELEXAGE
.ET DE RECHERCHES VEY!XRINAIEU?S
FICHE TECHNIQUE 1
TECHNIQUE DE PREPARATION D'UN B JTIGENE
SACCHAROSE-ACETONE (I.P. D'I IAN)
Par A. NIASSE
REF. No lll/VIRO.
OCTOBRE 1982.

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Réactifs
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l*) Cerveaux de sou&cecr& inocul%/v
I.', ,.
2') Solution de saccharose à 8,5 p.100
I
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- saccharose 835 g
- H,c3 distillée 106 II&"'"
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1
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3O) Solution Nacl à 0,85 p.100
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- Naci 8,5 g
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- H,O distillée 1 000 d
ho) Acétone refroidi à t-25”)
M&&iel
- Broyeur électrique
- Flacons
-Pots à centrifuger.
Pour la détermination d'un arbovirus vir ', on utilise l'une des deux
techniques suivantes : réaction de fixation du compl&ent ou
"
d'h&nagglutination
Toutes ces techniques nécessitent que l'arftigène à déterminer soit préparé
comme suit :
/
i
Technique : Une quantité suffisante de cervead (matière virale) est broyée dans
une solution de saccharose (V réa& ) à raiso:A de 4 ml de diluant pour 1 g de
cerveau.
- A 20 volumes d'acdtone refroidi (au congelatlur ) on ajoute 1 volume de suspen-
sion virale.
- Procéder 8 une agitation vigoureuse pen~&nt px minutes dans un bain de Glace
puis laisser sédimenter.
- Remplacer le surnageant par un volume égal d'acétone refroidi.
- Agitation vigoureuse.
- Laisser sédimenter pendant une heure à + ho,
..* / . . .

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- 2
- Jeter le surnageant.
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- Faire évaporer les traces d’acétone (pompe à $i.de) pendzmt une heure dms
un bain de glace.
- Reprendre le culot dans du Nacl 83 p.lûOO ( 4 /5 du volum;,&broyat)
j
- Centrifuger à 9 OOG t/mn pendant 1 heure pour ,cl&if’ication.
lk surnageant représente l'antigène qu'il çaut répartir en quantit8 de
1
4 Y$. &ns des anpoules puis conserver 5 + 7O'C.
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