Identification d’une nouvelle salmonelle...
Identification d’une nouvelle
salmonelle multirésistante
dans une viande de poulet de chair
au Sénégal
E. Cardinale l J.D. Perrier 2 A. Aidara 2 ‘FfFqU 3
C. Coudert 2 I.L. Gueye 3
Mots-clés
Résumé
P o u l e t d e c h a i r - Salmonella -
L’analyse microbiologique d’une carcasse de poulet de chair au Sénégal a
Sérotype - Analyse microbiologique -
permis de mettre en évidence un nouveau sérotype de salmonelle. Celui-ci
Résistance aux produits chimiques -
présente la particularité de posséder deux gènes de résistance aux antibio-
Antibiotique - Sénégal.
tiques ; il n’est sensible qu’aux quinolones de dernière génération. L’existence
de ce nouveau sérotype est inquiétante parce qu’il a été retrouvé dans des
prélèvements humains, associé à de I’hyperthermie et de la diarrhée profuse.
L’apparition d’une telle salmonelle peut éventuellement s’expliquer par I’utili-
sation anarchique des antibiotiques dans l’élevage des volailles.
H I N T R O D U C T I O N
folle et de la dioxine, devient exigeant et souhaite, à l’instar de son
homologue des pays occidentaux, avoir accès à des aliments dont
Au Sénégal, pour répondre à une démographie citadine sans cesse
l’innocuité est vérifiée.
croissante et à une demande en protéines animales en constante
augmentation, une aviculture semi-industrielle de proximité dans
Dans cet esprit, le laboratoire de pathologie aviaire de l’Isra-lnerv
l’espace urbain et périurbain s’est développée depuis une dizaine
a entrepris d’examiner la qualité microbiologique de la viande de
d’années. La région de Dakar regroupe l’essentiel de cette activité
poulet de chair afin d’estimer notamment le risque qu’il peut
dans un rayon de 100 km autour de la capitale et représente 6 mil-
représenter pour la santé publique.
lions de poulets de chair sur une année. De 1992 à 1998, cette
Cette communication n’a pas eu pour but de présenter les résultats
production a augmenté de 16 p. 100 passant de 6 000 à plus de
de cette étude qui se poursuit mais d’informer le monde scienti-
7 000 tonnes par an. L’amélioration de la productivité a permis de
fique de l’existence d’un nouveau sérotype de salmonelle, multiré-
réduire les coûts de production et, aujourd’hui, le poulet produit
sistant aux antibiotiques, identifié au cours d’une analyse de labo-
par ces élevages modernes fournit la viande la moins chère aux
ratoire.
consommateurs sénégalais (1 350 F CFA le kilogramme).
Cependant, s’il veut résister à la concurrence des morceaux de
H MATERIEL ET METHODES
découpe congelés importés (cuisses, ailes), il est essentiel de
contrôler sa qualité, notamment du point de vue sanitaire. En effet,
L’étude, qui a débuté en novembre 1999, a porté sur l’analyse de
le consommateur sénégalais, très sensibilisé aux crises de la vache
carcasses (peau et muscle) de poulets de chair préparées dans les
différentes tueries de la place, que celles-ci soient situées dans les
élevages ou dans les marchés de la ville. L’analyse bactériologique
1 . Cirad-emvthra-lnerv, BP 2057, Dakar-Hann, Sénégal
a porté sur la Famt (flore aérobie mésophile totale), les coliformes
2. Institut Pasteur, BP 220, Dakar, Sénégal
thermotolérants, les staphylocoques présumés pathogènes, les
3. Isra-lnerv, BP 2057, Dakar-Hann, Sénégal
Cumpylobacter et les salmonelles.

jiqL,c : un morceau & peau (sur Ic bréchet) et un cube de viande
(nlusc~c du bréchet) ont été prClevés dans de parfaites conditions
d’asepsie (bec bunsen), puis mélang& avec un miku dc pri-enri-
chissement (eau pepton&) et introduits dans un sachet Stomacher.
Le mélange a ensuite été fractionni dans un Stomacher (broyeur
Prolab) ct la solution a été mise cn incubation à 37 “C pendant
24 heures, Un millilitre du milieu de pré-enrichissement a étc
ajout6 dans un tube contenant environ 10 ml dc bouillon séknite
dc sodium pour enrichissement. LC mélange a été incubé h 37 “C
pc”dant 24 heures. Enfin, I’isolemcnt a été fait sur @ose Hcctocn
solidifiée dans une boîte de pétri. La boîte a été incubée à l’étuve à
37 “C pendant 24 heures.
L’idçntification des salmonelles s’est poursuivie par ICS tests bio-
chimiques (galerie AP1 20 E, biohléricux). LC laboratoire du
Ccntrc national sénégalais des entérobactéries (Institut Pasteur dc
Figure 1 : électrophorèse en gel des produits de pcr des béta-
Dakar) a effectué le sérotypage suivant la technique de Kauffman
lactarmses de type TEh4.
pour les antigènes de paroi (0) et flagellaires (H) et un antibio-
gramme (diffusion en milieu gélosé) avec recherche de béta-lacta-
mase à spectre (enzyme hydrolysant les céphalosporines de
3c génération) (10).
L’identification du mécanisme dc résistance a été rCalisée à I’lnsti-
tut Pasteur de Paris par pcr spécifique des gènes TEM. Une élcc-
mage des animaux, j la contamination par les fientes des animaux
trophorèse en gel d’agarose a enfin permis de préciser In structure
qui sont libérées lors du relâchement sphinctérien consécutif à la
génique.
mort et à la contamination des pattes des animaux. Cette étape est
lc siège d’importantes contaminations croisées, d’autant plus
quand la température est basse. Ccpcndant, une tempkraturc trop
élevée est aussi déconseillée cn raison de l’abrasion cutanée
n RESULTATS
qu’elle provoque et qui facilite ensuite la pénétration de salmo-
nelles cutanées :
La souche dc salmowllc a été identifiée à partir d’un prélèvcmcnt
dè muscle. Sa formule antigénique était 35 : c : 1, 2. L’antibio-
- :I la plumaison. Lors de la plumaison mécaliique, trois phéno-
gramme a montrf une résistance à la plupart des antibiotiques cou-
m?ncs pcuvcnt intervenir : In pression exercée par Ics doigts
ramment utilisés en médecine humaine (ampicillinc, tobramycinc,
plumcurs entraîne un transfert de la contamination des plumes
gcntamicinc, triméthoprim-sulfaméthoxazolc,
tétracyclinc, chlo-
gorgées d’eau d’khaudagc vers les follicules plumeux et la sur-
ramphénicol), excepté les quinolones. La souche a égalcmcnt prL:-
face dc la peau ; les doigts plumcurs lorsqu’ils sont sales peuvent
scnté une béta-lactamase à spectre. Les analyses moléculaires ont
constituer une source de contamination supplémentaire de micro-
permis de montrer que la souche hébergeait deux gènes dc risis-
organismes ; enfin, au cours de cette étape, on observe un refroi-
tance dont une TEM-1 (figure 1) ; le second était une SHVl2
dissement progressif de la surface de la peau du fait de l’arrosage
(point isoélcctrique et séquençagc).
de la carcasse par l’eau dc rinçage des plumeuses qui entraîne une
fcrmclurc des follicules plumeux, enfermant alors des gcrmcs. La
plumaison manuelle h sec est moins contaminante à condition que
8 DIScUSSlOh ET CONCLUSION
la pcrsonnc assurant la plumaison se nettoie Agulièrcmcnt Ics
mains entre deux poulets ; sinon, elle intervient aussi comme
~,‘association cntrc les salmonellcs ct la viande de poulet n’est pas
vcctcur de contamination crois& ;
nwdk puisque celle-ci apparaît comme la dcnrçc alimcntairc
à l’&iscération, si l’intestin se rompt dans lu carcasse et libtrc Ics
d’origine animale la plus souvent incriminCc dans les taxi-infcc-
matiitrcs fécales sur le muscle. Dans tous les cas, le manipulateur
tiOnS alimentaires collectives (4). Les modes de contamination ct
dont ICS mains sont souillées intervient aussi dans la contam-
de C~iSShliKitiO~i sont très variés et tous les maillons dc la filisre
nation ;
pcuvcnt ?trc incriminés (13, 18) : le phénomène de transmission
wrticalc a notamment 616 d&nontri: pour quelques serovars (lani;
- XI rin$agc dc la carcasse cn fin d’évisc&ation. Cc rinqagc n’est
phSiCLlI? L%!~~I~~S rcproductcurs ; les couvoirs pcuvcnt dcvcnir des
pas 11-k indiquk car il facilite l’adhésion des bacterics cn créant un
SWfCCS dc contamination horizontalc si les conditions d’hygiène
biofilrn à la surface dc la carcasse.
sont dc’fcctucuscs
dans les Cclosoirs ct dans les incubateurs ; les
Cc sC;rotypc de salmonellc n’a jamais c’t6 dkrit prCcCdcmmcm
c'l~~agcs sont des sites privil@és ci’intcrcontamin~~tio~~
lorsque
( I 1). alors pc lc spcctrc élargi aux bL:ta-lactamascs l’a CtC pour cc
plusieurs param?trcs pcuiwnt appmuîtrc potcnticllcmcnt fav(~rahlcs
qui conccrnê les souches nosocomialcs appartenant aux cntérobac-
(salmoncllcs rksidcntcs, vecteurs nnimc’s, aliment...).
léries du genre Klehsiella, E,sckerichia, EmrrwDrrc~e/. et PVO[~J~~.~.
Les OpkltionS ukéricurcs d’abattage et dc transformation cons&
Ccpcndant, il a rarement c’tC associé au genre Srrl~~~rel/a (1, 15).
lucnt aussi des étapes à risque pour l’introduction ou ta diffusion
En mc’dccinc humaine, les premières souches ont été détcct&s cl1
des sahiioncks. Le risque de contamination par Ics salmoncllcs sc
France en 19x4 et 1987 (s. ~~~~/zinllrriloll),
en Tunisie cn 1988
situc à différents points de la chaîne (14) :
(S. lt,iOi), CI1 Algérie cn 1990 (S. &r/l&kn) et en Argcntinc cn
1991 (S. r~phimwim) (1, 3, 7, 12). Il s’agit de mécanismes dc
rèsistancc qui S'OppoSCnt aux mutations intrinsèques du micro.
or~anistnc ; cc rnc’canismc <k rc’sistancc
dc t> pc TEhl fait en c[‘fct
6

Nouvelle salmonelle multirésistante du poulet au Sénégal
appel à des transmissions de matériel génétique par des plasmides
L’apparition d’une telle résistance peut éventuellement s’expliquer
(5,6). Mais, les types de mécanismes de resistance à spectre élargi
par l’usage anarchique des antibiotiques en aviculture. En effet, les
face aux beta-lactamines identifiées chez les salmonelles étaient
contraintes sanitaires représentent une pression constante sur les
jusqu’à présent SHV-2, CTX-2, CTX-M2, TEM-27, CTX-MS et
élevages de poulet de chair et les aviculteurs n’hésitent pas à
PER-1 (1,7,8,9, 12, 17).
recourir aux antibiotiques, à l’aveugle, pour essayer de juguler les
problèmes de mortalité et les prises de poids médiocres associées
La souche identifiée dans la viande de poulet n’était pas résistante
et ainsi tenter de diminuer leur coût de production. Pourtant, les
aux quinolones. Certaines souches, aux Etats-Unis OU au
vétérinaires en place tentent d’inculquer aux éleveurs des règles de
Royaume-Uni, ont présenté une multirésistance y compris aux
prophylaxie sanitaire et médicale pour essayer de maîtriser sérieu-
quinolones (8, 16).
sement ces contraintes pathologiques et ils essaient, en vain, de
limiter l’automédication. La contamination de la viande par le
Consécutivement à la découverte de cette souche de salmonelle
manipulateur n’est pas non plus à exclure ! Une analyse plus POUS-
chez le poulet de chair, le même sérotype présentant les mêmes
sec est en cours de réalisation pour identifier avec précision cette
résistances aux antibiotiques a été identifié à cinq reprises à
nouvelle souche de salmonelle.
l’Hôpita1 principal de Dakar sur des échantillons humains.
B I B L I O G R A P H I E
9. MOROSINI M.I., CANTON R., MARTINEZ-BELTRAN J., NEGRI M.C.,
PEREZ- DIAZ J.C., BAQUERO F., BLAZQUEZ J., 1995. New extended-

spectrum TEM-type-Jactamase from Sa/mone//a enterica subsp. enterica
1. BAUERNFEIND A., CASELLAS J.M., GOLDBERG M., HOLLEY M.,
isolated in a nosocomial outbreak. Antimicrob. Agents Chemother., 39:
JUNGWIRTH R., MANGOLD P., ROHNISCH T., SCHWEICHART S.,
458-461.
WILHELM R., 1992. A new plasmidic cefotaximase from patients
infected with
10. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing, Vol.
Salmonella typhimurium. Infection, 20: 158-l 63.
19, 9th informational supplement, 1999. Wayne, PA, USA, National
2. BRADFORD P.A., YANG Y., SAHM D., GROP I., CARDOVSKA D.,
Committee for Clinical Laboratory Standards.
STORCH G., 1998. CTX-M5, a novel cefotaxime hydrolysing Jactamase
11. POPOFF M.Y., LE MINOR L., 1977. Antigenic formulas of the
from an outbreak of Salmonella typhimurium in Latvia. Antimicrob.
Salmonella serovars, 7th revision, WHO/Collaborating
Center for
Agents Chemother., 42: 1988-l 984.
Reference
and Research on Salmonella. Paris, France, Institut Pasteur.
3. CASIN I., BRISABOIS A., BERGER N., BREUI j., COLLATZ E., 1996.
12. POUPART M.C., CHANAL C., SIROT D., LABIA R., SIROT J., 1991.
Phénotypes et génotypes de résistance de 182 souches de Salmonella
Identification of CTX-2, a novel cefotaximase from a Salmonella
sérotype typhimurium résistantes à I’ampicilline d’origine humaine et
mbandaka isolate. Antimicrob. Agents Cbemother., 35: 1498-l 500.
animale. Méd. Ma/. infect., 26 : 426-430.
13. ROZIER J., CARLIER V., BOLNOT F., 1985. Bases microbiologiques
4. COLIN P., 1992. Salmonella et qualité des produits avicoles, 1992.
de l’hygiène des aliments. Paris, France, Sepaic, p. 230.
In : Brugère-Picoux J., Silim A. Eds, Manuel de pathologie aviaire.
14. SALVAT G., 1997. Prévention des problèmes de santé publique liés
Maisons-Alfort, France, Ecole nationale vétérinaire, p. 371-374.
aux produits issus de la filière avicole. Bu//. Acad. vét. France, 70 : 43-68.
5. COURVALIN P., 1997. Stratégie évolutive des résistances aux
15. SOUSSY C.J., 1997. Etat actuel de la résistance aux antibiotiques.
antibiotiques. Méd. thér. Antibiot., 3 (hors série) : 19-23.
Méd. thér. Antibiot., 3 (hors série) : 24-35.
6. GAZOULI M., SIDORENKO S.V., TZELEPI E., KOZLOVA NS.,
16. THRELFALL E.J., HAMPTON M.D., SCHOFIELD S.L., WARD L.R.,
GLADIN D.P., TZOUVELEKIS L.S., 1998. A plasmid-mediated-
FROST J.A., ROWE B., 1996. Epidemiological application of
differentiating multiresistant Salmonella typhimurium DT 104 by
lactamase conferring resistance to cefotaxime
i n Salmonella
plasmid profile. Commun. Dis. Rep., 6: 155-l 58.
v
fyphimurium
clone found in St. Petersburg, Russia. /, Antimicrob.
Cbemother., 41: 119-I 2 1.
17. VAHABOGLU H., DODANLI S., EROGLU C., OZTURK R.,
SOYLETIR G., YILDIRIM I., AVKAN V., 1996. Characterization of
7. HAMMAM1 A., ARLET G., BENREDJEB S., GRIMONT F., BEN
multiple-antibiotic-resistant Salmonella typhimurium strains: molecular
HASSEN A., PHILIPPON A., 1991. Nosocomial outbreak of acute
epidemiology of PER-l-producing isolates and evidence for nosocomial
gastroenteritis in neonatal intensive tare unit in Tunisia caused by
plasmid exchange by a clone. /. clin. Microbiol., 34: 2942-2946.
multiple drug resistant Sa/mone//a wien producing SHV-2 beta-
18. WRAY C., DAVIES R.H., EVANS S.J., 1997. Safmoneffa infection in
lactamase. Eur. J. clin. Microbiol. infect. Dis., 10: 641-646.
poultry: the production environment. In: Richardson R.I., Mead C.C.
Eds., Wallingford, UK, POU/~. Meat SC;., 5: 257-276.
8. HOSEK G., LESCHINSKY D., IRONS S., SAFRANEK T.J., 1997.
Multidrug-resistant Salmonella serotype typhimurium in the United-
States. Morbid. Morta/. Wkly Rep., 46: 308-310.
Reçu le 18.07.00, accepté le 18.10.00

New ntultiresistant Salmonella in chicken in Senegal
$ummary
Resumen
Cardinale E., Perrier J.D., Aidara A., Tall F., Coudert C.,
Cardinale E., Perrier J.D., Aidara A., Tall F., Coudert C.,
Cueye IL., Konte M. Identification of a new multiresistant
Gueye I.L., Konte M. Identification
de una nueva salmonela
.%/mone//a strain in broiler chickens in Senegal
con resistencia multiple en una carne de pollo de engorde en
Senegal
Microbiological analysis of a broiler chicken carcass revealed
the presence of a new Salmonella serotype. It is characterized
El analisis microbiologico
de una carcasa de pollo de engorde
by two genes that express resistance to antibiotics, except to
en Senegal permit% demostrar un nuevo serotipo de salmo-
the very last quinolones. This serotype poses a threat as it has
nela. Este presenta la particularidad de poseer dos genes de
been found in human samples in association with high
resistencia a 10s antibioticos, siendo sensible tinicamente a las
temperature and diarrhea. The onset of this Salmonella may
quinolonas de ultima generacion. La existencia de este nuevo
result from the anarchic use of antibiotics in poultry
serotipo es inquietante, ya que este fue encontrado en mues-
production.
tras humanas, asociadas a hipertermia y diarrea profusa. La
aparicion de una tal salmonela puede eventualmente expli-
Key wds: Broiler chicken - Salmonella - Serotype -
carse por la utilizacion anarquica de antibioticos en 10s cria-
Microbiological analysis - Resistance to chemicals -
deros de aves.
Antibiotics - Senegal.
Palabras C/ave: Pol10 de engorde - Salmonella - Serotipo -
Analisis microbiologico - Resistencia a productos quimicos -
Antibiotico - Senegal.
)’
)
)
)
i
,
I
L
\\