INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES mxcoms ~s.R.A.)...
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
mxcoms ~s.R.A.)
LABORATOIRE NATlONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P. 2057
DAKAR-HANN
FICHE TECHNIQUP5
ISOLEMENT D'UN ARBOVIRUS PAR 3
AUX SOURICEAUX
Par Dr A. NIASSE
REF.4 No 112/VIR@.
OCTOBRE 1982,
- 2
Transférer dans le broyeur refroidi et br
r pendant me mhute. 3k-msvaser
dans un pot % centrifuger en caoutchouc stéril
entrifuger 2 500 th pendant
10 minutes.
Répartir le surnageant dans des tubes d'e
i stériles à r&on de 2 mUtubi-. *
Réserver un tube aux inoculations immédi
et conserver les ~utd33s à
- TO*C (portoir des souches arbovirus).
Contrôle "stérilit6"
Ensemencer 2 gouttes dans du bouillon
er à 3P. ;
B- Inoculation aux souriceaux
Eviter les bulles d'air dans la serin
- Injecter 0,025 ml à 1 mm de profondeur
de la ligne médiane vers l'occi-
put. Il ne doit pas ressortir de goutte
- Injecter autant en intra-péritoné
s'agit.d'isolement
.
(pas nécessaire au cours des passages).
- Replacer les inoculés dans le lot
.
,..
..,.
:. .,.
.
c- O&&ation des'sotioeaux (v. fiche
.
:.:y.
.
.- ..-. .__ __
lp- Récolte des souriceaux
- Ne jamais récolter les morts
--..~s.souricea.~ paralys@ sont
..,.
d'uneheure a - 25% comme suit :
La peau de la tête enlevée,
te du crâne découpée et le
cerveau.ai9s.i mis.. en .?.^r-..denc
enttiuverte des ciseaux *
.., *
et.l'on prockde comme en A.
.* ._._._ _.
"
,:'
/
,‘I
l . . ..*
:.
..-.
.
.
‘,
.<
.REAC~iFS.(Voir'anne~é.miliéiur)
.,
. .
TP
.""'
:‘.’
&t&s
~43SS
’
;
,-,
i
,,
::
.'
B,o*l$on ordinaire
,'..
<,..<
:'. . . ~,
A&bi&iqu& pknichitie
" '
,,
streptomycine
MATEZIELSTERIL
.:.
Ciseaux
Pinces
Seringue et aiguille
Broyeur refroidi
._:
Pot à centrifuger
.: :y'
.;: .,.
.,
,..-
xll!rportant
"
'Y
A- Pr&mration de l'inoculum
Broyage des pr~lèvkknts
($.'&.&&é
~ol~~e.dil.umt néc,essaire pour broyage dan
, c- 7 i‘; _
du Hari& BSS CU !ES
.-: ___..,, _
Moustiques
20 - 30 unités
2ml
-"W
30 - 60
4ml
.-y
-“W
.
. :
._:. , .,.
l 60 - 100
l
6ml
Y..‘.
,.
.:
‘.-::,.‘.
,
,’
;
:
.,
..r
I
1’
1
I
Tiques
1 -5
?@
I -"V
.:
"._!
6-10
hd.
i "
m <'
-"e
'..
::
: +F;:i!
.Y?;.-
,'6inl
'_
,.. 2.
..:
.
. . ,,
.;. . .
Organe
IP
1ov
.,.
.,,::
Sml?
1m.l
9mL
,,.; ..,
- -
10 ml
sans diluant
/
. . . .*.
-3
E- Passages
e
Procéder à des passages jusqu'à l'obtention I'un temps fixe d'incubation et
700 p.100 de mortalité et inoculer plusieurs por ses pour rholte inportante de
matière virale pour 6preuves de caractérisation, préparation de l'antigène et
constitution de banque,
F - Réisolement
Procéder 8 un réisolement 2 partir du pré1 3w2nt original.
Service de Virologie
PATHOLOGIE VIRALE DES AK@WJX
ARBOVIRUS
FICHE D'OBSERVATION DES SWRICJ AUX INOCULES
tigendc
No du lot du p&lhement
........................
..........
/ bien portant
Nature du pr6lèvement
...........................
..........
M malade
Origine du prélèvement ..........................
..........
P paralys
Date de réception, du prélèvement ................
..........
A agonisant
Date d'inoculation
* mort
..............................
...........
Isolement en no de passage ......................
..........
0 disparu ou manquant
Nombre de souriceaux inoculés ...................
..........
D dévoré par la mère
Age des souriceaux . l'inoculation .............. /..........
OBSERVATIONS QWTIDIE tNES (Voir 16gende)
Souris no
J. 1-2-L 4-5
6-7
8-g
10-11 12-13 1
15 16-17 la-19 20-21 22-23 24-25
1
I
I I
I
2
L'observateur
mxcoms ~s.R.A.)
LABORATOIRE NATlONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P. 2057
DAKAR-HANN
FICHE TECHNIQUP5
ISOLEMENT D'UN ARBOVIRUS PAR 3
AUX SOURICEAUX
Par Dr A. NIASSE
REF.4 No 112/VIR@.
OCTOBRE 1982,
- 2
Transférer dans le broyeur refroidi et br
r pendant me mhute. 3k-msvaser
dans un pot % centrifuger en caoutchouc stéril
entrifuger 2 500 th pendant
10 minutes.
Répartir le surnageant dans des tubes d'e
i stériles à r&on de 2 mUtubi-. *
Réserver un tube aux inoculations immédi
et conserver les ~utd33s à
- TO*C (portoir des souches arbovirus).
Contrôle "stérilit6"
Ensemencer 2 gouttes dans du bouillon
er à 3P. ;
B- Inoculation aux souriceaux
Eviter les bulles d'air dans la serin
- Injecter 0,025 ml à 1 mm de profondeur
de la ligne médiane vers l'occi-
put. Il ne doit pas ressortir de goutte
- Injecter autant en intra-péritoné
s'agit.d'isolement
.
(pas nécessaire au cours des passages).
- Replacer les inoculés dans le lot
.
,..
..,.
:. .,.
.
c- O&&ation des'sotioeaux (v. fiche
.
:.:y.
.
.- ..-. .__ __
lp- Récolte des souriceaux
- Ne jamais récolter les morts
--..~s.souricea.~ paralys@ sont
..,.
d'uneheure a - 25% comme suit :
La peau de la tête enlevée,
te du crâne découpée et le
cerveau.ai9s.i mis.. en .?.^r-..denc
enttiuverte des ciseaux *
.., *
et.l'on prockde comme en A.
.* ._._._ _.
"
,:'
/
,‘I
l . . ..*
:.
..-.
.
.
‘,
.<
.REAC~iFS.(Voir'anne~é.miliéiur)
.,
. .
TP
.""'
:‘.’
&t&s
~43SS
’
;
,-,
i
,,
::
.'
B,o*l$on ordinaire
,'..
<,..<
:'. . . ~,
A&bi&iqu& pknichitie
" '
,,
streptomycine
MATEZIELSTERIL
.:.
Ciseaux
Pinces
Seringue et aiguille
Broyeur refroidi
._:
Pot à centrifuger
.: :y'
.;: .,.
.,
,..-
xll!rportant
"
'Y
A- Pr&mration de l'inoculum
Broyage des pr~lèvkknts
($.'&.&&é
~ol~~e.dil.umt néc,essaire pour broyage dan
, c- 7 i‘; _
du Hari& BSS CU !ES
.-: ___..,, _
Moustiques
20 - 30 unités
2ml
-"W
30 - 60
4ml
.-y
-“W
.
. :
._:. , .,.
l 60 - 100
l
6ml
Y..‘.
,.
.:
‘.-::,.‘.
,
,’
;
:
.,
..r
I
1’
1
I
Tiques
1 -5
?@
I -"V
.:
"._!
6-10
hd.
i "
m <'
-"e
'..
::
: +F;:i!
.Y?;.-
,'6inl
'_
,.. 2.
..:
.
. . ,,
.;. . .
Organe
IP
1ov
.,.
.,,::
Sml?
1m.l
9mL
,,.; ..,
- -
10 ml
sans diluant
/
. . . .*.
-3
E- Passages
e
Procéder à des passages jusqu'à l'obtention I'un temps fixe d'incubation et
700 p.100 de mortalité et inoculer plusieurs por ses pour rholte inportante de
matière virale pour 6preuves de caractérisation, préparation de l'antigène et
constitution de banque,
F - Réisolement
Procéder 8 un réisolement 2 partir du pré1 3w2nt original.
Service de Virologie
PATHOLOGIE VIRALE DES AK@WJX
ARBOVIRUS
FICHE D'OBSERVATION DES SWRICJ AUX INOCULES
tigendc
No du lot du p&lhement
........................
..........
/ bien portant
Nature du pr6lèvement
...........................
..........
M malade
Origine du prélèvement ..........................
..........
P paralys
Date de réception, du prélèvement ................
..........
A agonisant
Date d'inoculation
* mort
..............................
...........
Isolement en no de passage ......................
..........
0 disparu ou manquant
Nombre de souriceaux inoculés ...................
..........
D dévoré par la mère
Age des souriceaux . l'inoculation .............. /..........
OBSERVATIONS QWTIDIE tNES (Voir 16gende)
Souris no
J. 1-2-L 4-5
6-7
8-g
10-11 12-13 1
15 16-17 la-19 20-21 22-23 24-25
1
I
I I
I
2
L'observateur