.II, .I KH’Ut3l.IQUE DU SENEGAL ri********* ...
.II,
.I
KH’Ut3l.IQUE DU SENEGAL
ri*********
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RUKAL
ET DE L’HYDRAULIQUE’
**********
‘? INSTITUT SENEGALAIS DE fXECt1ERCtiES
AGRICOLES (1.S.R 4.1
**********
’ IIEPARTEMENT DE RECHERCtiES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
ii’
**********
LABORATOIRE NATIONAL DL L’ELEVAGE
f3- DE RECHERCHES VETERINAIRES
BP 2057
DAKAR - HANN
-
~.
TEST tLfSk E T StKONEUTRALI ATION
CINETIQUE DANS L’tkVALUATf
N DE
L’IMMUNITE NATIJRELLE ET O U
ACQUISE CONTRE LA PES E
BOVINE AU SENEGAL
l
Par
J. SARR, M. DIOP
REF. NQ49/P.INF.
JUILLET 1990.
MOTS-CLES
_-
Peste bovine - Immunité -- Séroneutralisation - Elisa ( E n z y m e Linked-immuno-
assay) - Sénégal.
RESUME
519 sérum-; priilcvés
,-ju hiisard d a n s n o t r e s( ‘othèque, toutes régions confor. -IL~,,:,
entre 1985 et ‘1988 on: ét6 testes en séroneu
,alisation cinétique sur cellules .;t,
lignée Véar.o et en Etih<l pour I<I recherche d’; Iticorps anti-pes te bovine.
1-d fiabiliîla du test Elisa et ses avantages p;
rapport à la sC~roneutralisati0~
~.inétique (?n mIcropla(lue d a n s l e s conditiorls
ocales sont discii tés.
5 19 serurii
samples taken randomly in our se
Jm bank between 1985 to 1988
were tested both in seroneutralization test a j in Elisa for anti-rinderpcst
antibodic5.
The reliability of Elisa and its avantages con lare to the neutralisation test
_-
.
microplate in our local conditions are discus?
d.
I N T R O D U C T I O N
-
-
Au Sénégal, le dernier foyer de peste bovine a été observé en 19SO dans U-J
troupeau transhumant de la République Islamique de Mauritanie (1 1.
Les efforts réalisés par les services vété,rinaires par l’organisation de campzgnec
annuelles de vaccination ont permis le controle de la maladie.
Pour évaluer I’immunite naturelle etlou acquise du cheptel bovin avant le
démarrage de la deuxième campagne panafric,line contre la peste bovine, dc-JX
tests sont utilisés comparativement :
- la séroneutralisation cinéticlue en microplaque sur cultures celluaires de
lignée Vt>ro (21 ;
-- le test Elisa (3).
PI.~ r tel a , des sérums de bovin prélevés d;tl\\s les différentes ré?;lons du
Senéyal entre 1985 et 1988 ont eté testes à I~I fois par séroneutral:sation
cinétique et par Elisa.
Les avantacles et les limites de chaque test :> nt discutés.
.
MATERIEL ET METHODE
1 e Les sérums
519 sérums décomplémcntés 2 56”‘C pendant 3
m n , c o n s e r v é s ti -?i13C, preibzves
au hasard tous âges et toutes régions confori ues,dans notre sérorhèquc, cr\\t
été testés.
2. Test de séroneutralisation
-.~
Le test de séroneutralisation cinétique (2) virus constant - sérum variable,
a été utilisé.
Une CT, OO (dilution limite de virus donnant
-I e f f e t cytopathoyène 3 100 p. 100
au 66 jour) a été mise en présence de s&rum
I tester.
Les cell~lles de lignée Véro ajustées à la conc
ntration finale de 50 000 celIult:si
ml sont cultivées en présence d’un mélange c
rum-virus.
;.Irl sCr111r1 est considéré comme négatif s’il nc neutralise pas une CTIOo C~V
.’ , I‘ 1.1 ‘-2 ( ‘.ou( Ile Kabcte 0) à la dilution de 1 Il
! a u b o u t d e 6 jo\\lrs (Je ct~lt~~r-ta
$. Tes; EIISJ
__._ -_ -. ..-
i-es sérilrns sont dilués au 1 /Ye dans un tam >n PBS contenant 5 0 q/l de lait
écrérne.
6’
L’antigene et le conjugué péroxidase sonit fo -nis sous forme de Kit p;lr
I’Agenctt Internationale à IlEnergie Atomique
AIEA) Vienne, Autriche.
Les tests sont condu its sur microplaque ( N IC I n termed).
R E S U L T A T S
--.-
67 p. 100 des sérums analysés en séroneutra sation possèdent ‘les dnticor-(1s
contre 60 p. 100 en Elisa (tableaux 1 et 2),
oit une différence de 7 p.li!i..
r
Cependant, !9 p.100 des sérums sont négat.
s à la fois en Elis:+ et en s~~I-oI-,c’u-
tralisation cinétique et 56 p.100 positifs pot
. les deux tests ; soit un t;llJi. dt:
concordance de 85 t l,6 p.100 (tableau 3) f ur une coefficient de sécurltti
de 95 p.100.
I.;t cfIfférenc.tb r.le sensibilité des deux tests i été c:akul&e pour un ddl, Y 5, 1-e
- 3
Tableau 1 : Séroneutralisation
Total sérums
71
-A--519
p.100
L.---.
I
I
HI__.. .-
Tableau 2 : Elisa
-
-
-
-
-
-
-
‘- -1
a --
I
Total sérum5
-+...-
.--- -..j
!09
519
p.100
T a b l e a u 3 : Taux de concordance
S N -
SN +
Total sérums,
Elisa -
Elisa -
-_--__.
..--
5’g
Pourcen taqc> ~-~~
1-- -..--- .- ._.-- -_. .__
-I_. ..-- - -- _--
Taux de concordance = 85 2 1 ,6 p. 1110
DISCUSSION
L A différence de pourcentage 7 p.100, observ
zntre l a serorieutralisatior~
cinétique et le test Elisa est significative à 2
30 pour 1 ddl 1
Elle traduit sans nul doute une plus grande s
ibilité de la séroneutralisa;:on
cinétique en microplaque.
Cependant, ii s’agit d’une technique longue e’
ûteuse et le résultat n’es:
disponible qu’au bout de 6 jours.
Pour cela, les sérums sont prtiievés et mainte
stériles pendant toute !a
durée du test.
Les cultures de cellules, pour conserver tout{
ur sensibilité, doivent demc~urec
stériles sur le plan bactériologique, mycoplasr
ie et fongique et ne conter!I f-
aucun virus adventice.
Aussi, le nombre de sérums susceptibles d’ëtr
nalysés à la fois reste relc?:tve-
ment limité afin d’éviter les cor:taminations.
Le test Elisa peste bovine posscdc donc de nc
reux avantages sur- la ‘er1:
neutralisation.
- La rapidité d’exécution : 1 ;~ltirnéc;
- La stérilité des sérums n’est ;MS indispensa
.
I
- De nombreux sérums peuve:;t être analyse:
la fois sans risquo d’erreL,,.s
(200 à 400 sérumsljour) selon nos condition
- Le système peut aisément être automatisé.
II peut donc être utilisé comme ,test de “scree ‘ni g” de masse lors d’enquête;
comme la campagne Panafricain(: de
a peste bovine (PARC).
‘- 1)
BIBLiOGRAP i I E
-
-
1 .- In : Santé animale mondiale 1987. OIE,
988. Thème Ill, 56 X/20 : p.104.
2 - PLOWRIGHT (W.) and FERRIS (R.D.) . Studies with rinderpest virus in
tissue culture. III - The stability of cc tured virus and its use in :jirus
neutralization tests.
Arch. Ges. Virusforsh, 1961, 2 : 516-I ,3.
3 - Rinderpest Elisa kit for animal disease
iagnosis
Joint FAO/IAEA Division
Agriculture Laboratory Seibersdorf. AL tria.
.I
KH’Ut3l.IQUE DU SENEGAL
ri*********
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RUKAL
ET DE L’HYDRAULIQUE’
**********
‘? INSTITUT SENEGALAIS DE fXECt1ERCtiES
AGRICOLES (1.S.R 4.1
**********
’ IIEPARTEMENT DE RECHERCtiES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
ii’
**********
LABORATOIRE NATIONAL DL L’ELEVAGE
f3- DE RECHERCHES VETERINAIRES
BP 2057
DAKAR - HANN
-
~.
TEST tLfSk E T StKONEUTRALI ATION
CINETIQUE DANS L’tkVALUATf
N DE
L’IMMUNITE NATIJRELLE ET O U
ACQUISE CONTRE LA PES E
BOVINE AU SENEGAL
l
Par
J. SARR, M. DIOP
REF. NQ49/P.INF.
JUILLET 1990.
MOTS-CLES
_-
Peste bovine - Immunité -- Séroneutralisation - Elisa ( E n z y m e Linked-immuno-
assay) - Sénégal.
RESUME
519 sérum-; priilcvés
,-ju hiisard d a n s n o t r e s( ‘othèque, toutes régions confor. -IL~,,:,
entre 1985 et ‘1988 on: ét6 testes en séroneu
,alisation cinétique sur cellules .;t,
lignée Véar.o et en Etih<l pour I<I recherche d’; Iticorps anti-pes te bovine.
1-d fiabiliîla du test Elisa et ses avantages p;
rapport à la sC~roneutralisati0~
~.inétique (?n mIcropla(lue d a n s l e s conditiorls
ocales sont discii tés.
5 19 serurii
samples taken randomly in our se
Jm bank between 1985 to 1988
were tested both in seroneutralization test a j in Elisa for anti-rinderpcst
antibodic5.
The reliability of Elisa and its avantages con lare to the neutralisation test
_-
.
microplate in our local conditions are discus?
d.
I N T R O D U C T I O N
-
-
Au Sénégal, le dernier foyer de peste bovine a été observé en 19SO dans U-J
troupeau transhumant de la République Islamique de Mauritanie (1 1.
Les efforts réalisés par les services vété,rinaires par l’organisation de campzgnec
annuelles de vaccination ont permis le controle de la maladie.
Pour évaluer I’immunite naturelle etlou acquise du cheptel bovin avant le
démarrage de la deuxième campagne panafric,line contre la peste bovine, dc-JX
tests sont utilisés comparativement :
- la séroneutralisation cinéticlue en microplaque sur cultures celluaires de
lignée Vt>ro (21 ;
-- le test Elisa (3).
PI.~ r tel a , des sérums de bovin prélevés d;tl\\s les différentes ré?;lons du
Senéyal entre 1985 et 1988 ont eté testes à I~I fois par séroneutral:sation
cinétique et par Elisa.
Les avantacles et les limites de chaque test :> nt discutés.
.
MATERIEL ET METHODE
1 e Les sérums
519 sérums décomplémcntés 2 56”‘C pendant 3
m n , c o n s e r v é s ti -?i13C, preibzves
au hasard tous âges et toutes régions confori ues,dans notre sérorhèquc, cr\\t
été testés.
2. Test de séroneutralisation
-.~
Le test de séroneutralisation cinétique (2) virus constant - sérum variable,
a été utilisé.
Une CT, OO (dilution limite de virus donnant
-I e f f e t cytopathoyène 3 100 p. 100
au 66 jour) a été mise en présence de s&rum
I tester.
Les cell~lles de lignée Véro ajustées à la conc
ntration finale de 50 000 celIult:si
ml sont cultivées en présence d’un mélange c
rum-virus.
;.Irl sCr111r1 est considéré comme négatif s’il nc neutralise pas une CTIOo C~V
.’ , I‘ 1.1 ‘-2 ( ‘.ou( Ile Kabcte 0) à la dilution de 1 Il
! a u b o u t d e 6 jo\\lrs (Je ct~lt~~r-ta
$. Tes; EIISJ
__._ -_ -. ..-
i-es sérilrns sont dilués au 1 /Ye dans un tam >n PBS contenant 5 0 q/l de lait
écrérne.
6’
L’antigene et le conjugué péroxidase sonit fo -nis sous forme de Kit p;lr
I’Agenctt Internationale à IlEnergie Atomique
AIEA) Vienne, Autriche.
Les tests sont condu its sur microplaque ( N IC I n termed).
R E S U L T A T S
--.-
67 p. 100 des sérums analysés en séroneutra sation possèdent ‘les dnticor-(1s
contre 60 p. 100 en Elisa (tableaux 1 et 2),
oit une différence de 7 p.li!i..
r
Cependant, !9 p.100 des sérums sont négat.
s à la fois en Elis:+ et en s~~I-oI-,c’u-
tralisation cinétique et 56 p.100 positifs pot
. les deux tests ; soit un t;llJi. dt:
concordance de 85 t l,6 p.100 (tableau 3) f ur une coefficient de sécurltti
de 95 p.100.
I.;t cfIfférenc.tb r.le sensibilité des deux tests i été c:akul&e pour un ddl, Y 5, 1-e
- 3
Tableau 1 : Séroneutralisation
Total sérums
71
-A--519
p.100
L.---.
I
I
HI__.. .-
Tableau 2 : Elisa
-
-
-
-
-
-
-
‘- -1
a --
I
Total sérum5
-+...-
.--- -..j
!09
519
p.100
T a b l e a u 3 : Taux de concordance
S N -
SN +
Total sérums,
Elisa -
Elisa -
-_--__.
..--
5’g
Pourcen taqc> ~-~~
1-- -..--- .- ._.-- -_. .__
-I_. ..-- - -- _--
Taux de concordance = 85 2 1 ,6 p. 1110
DISCUSSION
L A différence de pourcentage 7 p.100, observ
zntre l a serorieutralisatior~
cinétique et le test Elisa est significative à 2
30 pour 1 ddl 1
Elle traduit sans nul doute une plus grande s
ibilité de la séroneutralisa;:on
cinétique en microplaque.
Cependant, ii s’agit d’une technique longue e’
ûteuse et le résultat n’es:
disponible qu’au bout de 6 jours.
Pour cela, les sérums sont prtiievés et mainte
stériles pendant toute !a
durée du test.
Les cultures de cellules, pour conserver tout{
ur sensibilité, doivent demc~urec
stériles sur le plan bactériologique, mycoplasr
ie et fongique et ne conter!I f-
aucun virus adventice.
Aussi, le nombre de sérums susceptibles d’ëtr
nalysés à la fois reste relc?:tve-
ment limité afin d’éviter les cor:taminations.
Le test Elisa peste bovine posscdc donc de nc
reux avantages sur- la ‘er1:
neutralisation.
- La rapidité d’exécution : 1 ;~ltirnéc;
- La stérilité des sérums n’est ;MS indispensa
.
I
- De nombreux sérums peuve:;t être analyse:
la fois sans risquo d’erreL,,.s
(200 à 400 sérumsljour) selon nos condition
- Le système peut aisément être automatisé.
II peut donc être utilisé comme ,test de “scree ‘ni g” de masse lors d’enquête;
comme la campagne Panafricain(: de
a peste bovine (PARC).
‘- 1)
BIBLiOGRAP i I E
-
-
1 .- In : Santé animale mondiale 1987. OIE,
988. Thème Ill, 56 X/20 : p.104.
2 - PLOWRIGHT (W.) and FERRIS (R.D.) . Studies with rinderpest virus in
tissue culture. III - The stability of cc tured virus and its use in :jirus
neutralization tests.
Arch. Ges. Virusforsh, 1961, 2 : 516-I ,3.
3 - Rinderpest Elisa kit for animal disease
iagnosis
Joint FAO/IAEA Division
Agriculture Laboratory Seibersdorf. AL tria.