L?Q~. HS REPUBLIQUE DU SENEGAL MINISTERE DU...
L?Q~.
HS
REPUBLIQUE DU SENEGAL
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT
RURAL ET DE L'HYDRAULIQUE
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A.)
DEPARTEMENT DE RECHERCHES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
LABORATOIRE NATIONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P. 2057
DAKAR-HANN
DIAGNOSTIC IMMlJNOLOGIQUE DE
A E'ASCIOLA GIGANTICA CHEZ
ETUDE EXPERIMENTALE DE LA
Service de Parasito
L.N.E.R.V.
REF. N"017/PATH0.ANIM.
MAI 1992.
RESUME
L'objet de cette étude a été d'expéri enter le test ELISA utilisant un
antigène métabolique excrétion-sécrétion d 7s le diagnostic de la Fasciolose
à Fasciola gigantica chez le mouton. Pour
2 faire, deux agneaux âgés chacun
de 3 mois et 15 jours ont été utilisés.
Ces agneaux ont reçu séparément par 1
voie orale,2 300 métacercaires
issues de Lymnées infestées en laboratoire
Le suivi de ces animaux, du début de
'expérience jusqu'à leur mort
naturelle,
a été effectué par une série de prélèvements coprologique et
sérologique .
Les analyses coprologiques se sont ré élées négatives tandis que la séro-
logie a permis de déceler les premiers ant corps anti-Fasciola gigantica dès
la 4ème semaine après infestation.
A l'autopsie, des douves adultes et ' matures ont été récoltées successi-
vement sur le premier et le second agneau.t
Les résultats ainsi ressortis de ce
remier test montrent donc que le
diagnostic par la méthode ELISA est plus
ensible que la coprologie et permet
le dépistage précoce de la fasciolose à 1 .sciola gigantica chez le mouton.
MOTS-CLES
Fasciola gigantica - Distomatose - 1 lfestation - Diagnostic - Coprologie -
ELISA - Ovin - Sénégal.
1. INTRODUCTION
Le diagnostic anté-mortem de la fasc: Ilose chez les animaux en vue de
dégager des mesures de lutte efficace et : 3 rtout de contrôle continu approprié
1
pose encore des difficultés quant à l'iden
fication précise de cette maladie.
La seule méthode utilisée jusqu'ici e
basée sur la coprologie recèle
encore des insuffisances en ce sens que le
premiers oeufs ne peuvent être
clairement détectés qu'à partir du 3è mois
infestation période à laquelle
les vers ont atteint déjà leur stade de dé
loppement adulte. Une technique
plus sensible et permettant de déceler à t
re précoce les tous premiers
signes de la maladie s'avère donc nécessai
: tests sérologiques (4) (5).
A cet effet, il existe déjà un test sérolo
que par la méthode ELISA qui per-
met de mettre en évidence l'apparition des
remiers anticorps anti-fascioliens
chez des animauxmalades dès la 3è semaine
'infestation.
Ce test a été utilisé chez des moutons d 'expérience suivis en laboratoire
du début de leur infestation à leur mort na
relle, et nous a ainsi permis de
suivre la cinétique des anticorps.
L'objectif de ce travail était donc de
ester la validité de la méthode
et de voir la possibilité de son utilisation comme moyen de diagnostic à titre
individuel, ou de dépister la présence de la maladie au sein d'un troupeau
donné.
II. MATERIEL ET METHODES
1. Animaux d'expérience et infestation
Deux agneaux mâles âgés chacun de 3 moi !et en provenance d'une zone
indemne de trématodoses ont été utilisés. Par ailleurs, l'analyse coprologique
effectuée au préalable sur ces deux agneaux a
nt leur infestation à également
donné un résultat négatif.
Ces agneaux ont été infestés par la voie
rale à partir de métacercaires
de Fasciola gigantica.
/
. . . . . .
Les métacercaires sont issues de Lymn'
d'élevage infestees expérimentale-
ment en laboratoire et suivies jusqu'à Xa
tie des cercaires qui se sont
ensuite enkystées pour donner des métacer
res.
Le premier agneau désigné sous le no
reçu en une seule prise
300
métacercaires âgées de 3 mois et 15 jours,
qui ont été conservées à 4" jus-
qu'au moment de leur utilisation.
Le second animal désigné sous le no2
reçu à peu près le même nombre
de métacercaires âgées également de 3 moi
.t 15 jours mais à la différence
que ces métacercaires avaient subi un cho
.hermique de courte durée (congé-
lation involontaire survenue au cours du
lps de conservation).
2. Prélèvements de fécès et de sang pour
llyses (voir tableau de prélèvements)
a) Prélèvements de fécès et analyses cqpr
bgiques
Pendant le suivi des animaux, des pr
vements de fécès suivis d'analyses
coprologiques ont été effectués avant inf
:ation d'abord, ensuite au rythme
d'un prélèvement par semaine à partir de
3è ayant suivi l'infestation.
b) Prélèvements de sang et épreuves sérol
.ques
i
ue de la récolte de sérums
destinés aux tests sérologiques ont été
alement
faits avant infestation
d'abord (étape J O-l) ensuite le jour mê
de l'infestation (étape JO) et
enfin une fois par semaine jusqu'à la m
naturelle des animaux (étapes
JO+ 1, J 0 f 2, J 0 + 3, etc. ..). Les ana
ses sérologiques ont été réalisées
à partir de la technique ELISA de dosage
es anticorps utilisant un antigène
métabolique excrétion - secrétion.
une boîte de pétri et laissées
pendant 3 heures avec un peu d'eau dist
lée. Le produit des excrétions-
ntrifugé. Le surnageant a été
recueilli puis mis en aliquots après en
voir déterminé le taux de protéines
/
. . . . . .
- 3
TABLEW No1 : PRELEVEMENTS DE SANG ET DE FECES
AGNEAU No 1
AGNEAU No2
Date
Nature
No pré-
Etape
prélèvement
lèvement
pe
Date
Nature
No pré-
prélèvement levement
Jo - 1
22
Jo -
20.2.90
Fécès - sang
23
avant infest.
20.2.90
Fécès - sang
avant nfest.
Jo
b
21.2.90
Fécès - sang
24
21.2.90
Fécès - sang
25
jour infest.
jour
ifest.
Jo +
j
28.2.90
Sang
27
lère
im.
Jo + 14 j
Jo +
7.3.90
Sang
28
;,j 77.3.90 1
Sang
(
29
2ème sem.
2ème
Lj
Jo + 21 j
14.3.90
Sang + fécès
30
Jo +
14.3.90
Sang + fécès
31
3ème sem.
3ème
zm.
I
I
Jo + 28 j
sj
Sang +
Jo + zm.
I 21.3.90 Sang + fécès
33
4ème sem.
21.3.90
fécèS
I
I
I
32
I
4ème
I
I
Jo +
5j
28.3.90
Sang + fécès
35
5ème
em.
Jo f
6ème 2j
em.
-/- 3.4.90 l Sang + fécès 37
i
Jo + 49 j
10.4.90
Sang + fécès
39
7ème sem.
/ x0.4.90 j Sang + fécès /
38
/
J o
7èmt
49 j
sem.
I
I
Jo + 56 j
J o
Sème sem.
1 17.4.90
1 Sang + fécès 1
40
1
/ 17.4.90 / Sang + fécès /
8èml
41
Jo + 62 j
62 j
9ème sem.
1 24.'+.90
j Sang
J o
+ fécès
1
42
1
Sang + fécès
9èm,
sem.
43
Jo + 70 j~ / 2.5.90 /Sang + fécès / 44 /
Jo
70 j
2.5.90
Sang + fécès
45
10ème sem.
10è : sem.
l
l
l
Jo + 77 j
IIème sem.
1 9.5.90 / Sang + fécès / 46 /
Jo + 84 j
12ème sem.
Sang + fécès
Jo + 91 j
13ème sem
1 23.5.90
j Sang + fécès 1
48
1
Jo + 98 j
14ème sem.
/ 30.5.90 j Sang + fécès ( 49 /
- 4
Deux dilutions de sérums ont été test& s pour les épreuves sérologiques :
une dilution au 1/100 et une dilution au 1/ 00 avec une concentration unique
du conjugué à la péroxydase dilué au 1/5000 et de l'antigène titrant 6 mg/ml
utilisé à raison de 10 pg/ml.
Les sérums de référence ayant servi
ur la réalisation de ces tests sont
ceux récoltés sur l'agneau no1 avant infe
ation pour le négatif et à la veille
de la mort pour le positif.
III. RESULTATS
1. Agneau no1
a) Coprologie
La présence d'oeufs de douve n'ab pas
té constatée pour l'ensemble des
analyses coprologiques et la mort de l'a
a1 est intervenue 132 jours après
infestation soit à la 14ème semaine.
A l'autopsie, 39 douves adultes ent
s ont été récoltées au niveau du
foie et on a pu également déceler la pré
e d'oeufs dans le parenchyme
hépatique.
b) Sérologie (cf. graphique)
. Dilution au l/lOO
L'apparition des anticorps est int
enue dès la 3ème semaine ayant
suivi l'infestation. Cependant, la courb
des densités optiques a connu une
ascension dès la lère semaine,
uite par de légères baisses consta-
tées à la 2è et à la 10è semaine.
ier pic a été atteint à la llè
semaine mais la valeur de la de
e la plus élevée a été enregistrée
à la veille de la mort de l'ani
semaines après l'infestation.
. . . / . . .
TBBLEAU No2 : DENSITES OPTIQUES
Mouton no1
Mouton no2
No prélève-
No prélève-
Période
ment
ment
d.oau l/lOO d.o. au 11200
d.o.aul/lOO
d.o.au 11200
Jo + 1
22
0,073
0,052
23
0,091
0,074
Jo
Jo + 7
24
0,102
0,056
25
0,077
0,056
lère semaine
Jo + 14
2ème semaine
26
0,072
0,055
27
0,079
0,071
Jo + 21
28
0,104
0,090
29
0,093
0,070
3ème semaine
Jo f 28
30
0,210
0,150
31
0,185
0,075
4ème semaine
Jo + 35
5ème semaine
32
0,249
n 313
77
“,L-L.-’
l-l.379
-,--
0.175
Jo + 42
P
34
0,301
0,24,7
35
0,263
0,191
6ème semaine
I Jo + 49
n 7no
tl 17
“,-‘UZ
1
0.764
1 0.224
1
-,--
-2
7ème semaine
I 36
0,351
I
Il
-’
1
I
Jo + 56
38
0,369
0,31.7
39
0,279
0,243
8ème semaine
Jo + 62
40
n 2OQ
“,J,”
n 7?c,
Il
bl
I
n.769
I
0.743
I
9ème semaine
t
I
““‘L’” II
‘-
I -,---
l
-,- .-
l
I
II
I
I
I
Jo + 83
/ 12ème semaine
““‘L’v II
Jo + 90
I
13ème semaine
46
0,460
0,403
I
I
II
Jo + 97
47
0,523
n IL11 7
II
14ème semaine
- 6
. Dilution au 1/200
La même ascension de la courbe des di isités optiques est apparue, mais
les valeurs enregistrées sont plus faible, pour les mêmes sérums dilués au
l/lOO. Le premier pic est observé à la 9è ;emaine et la valeur de la densité
optique la plus élevée se situe également i la veille de la mort de l'animal.
2. Agneau no2
L'agneau no2 n'a, quant à lui, survé I que pendant 74 jours seulement.
A l'autopsie, 56 douves immatures ont pu
tre prélevées au niveau du foie
mais aucun oeuf n'a été observé à l'exame
microcopique du parenchyme hépa-
tique.
a) Coprologie
Aucun oeuf n'a été rencontré au cour
des examens coprologiques effec-
tuées pendant l'expérience.
b) Sérologie (cf. graphique)
. Dilution au l/lOO
Les premiers anticorps apparaissent
la 4è semaine et le premier pic
est atteint à la 6è semaine soit deux sem ines après. Comme précédemment, le
maximum de la valeur des densités optique
s'observe à la veille de la mort
de l'animal correspondant à la 10è semain
après infestation et cette valeur
se rapproche de celle du sérum de l'agnea
no1 à la même période mais à une
dilution au 1/200.
m
Dilution au 1/200
Les valeurs des densités optiques o
évolué de la même manière que
pour les épreuves précédentes et le pic
situe à la gè semaine. On note
cependant une baisse de la réponse
aire de l'agneau no2 dont les
valeurs des densités optiques de la dilu
on au l/lOO sont plus faibles que
celles de l'agneau no1 à la même dilutiod et se rapprochent plutôt des valeurs
des densités optiques de la dilution au
/2OO de ce même agneau.
/
. . . . . .
- 8
IV. DISCUSSION
Ce test permet de déceler la présence
es anticorps anti-Fasciola. Son
intérêt majeur est la détection très précoc
de ces anticorps dès la 3è semaine
d'infestation.
Ces résultats sont semblables à ceux o tenus par Chantal BOULARD (1) (2).
Par ailleurs, on constate qu'il y a de
différences au niveau des deux
agneaux en ce qui concerne les réactions au
infestations (réceptivité et
réaction sérologique).
Chez l'agneau n'l, les anticorps sont
lus précoces (3è semaine) que
chez l'agneau no2 (4è semaine). Ce dernier
st mort plus rapidement (74è jours)
avec 56 douves immatures et le premier (132
jours) avec 39 douves adultes.
Ces différences sont dues soit à un si ple phénomène de comportement
individuel comme le soulignent SANTIAGO et
ILLYER (3), soit à une virulence
atténuée de la souche infestante du no2 qui a subi un léger choc thermique.
Une étude répétée de cette infestation, ave
un plus grand nombre d'animaux,
permettra d'élucider ce problème.
V:CONCLUSION
Les résultats ressortis de ce premier
est montrent en effet que la
technique ELISA utilisant un antigène métab lique excrétion - secrétion peut
valablement être utilisé dans le dépistage
récoce des anticorps anti-Fasciola
gigantica chez le mouton.
Cependant, un test de spécificité de 1
réaction antigène-anticorps de
Pasciola gigantica devra être envisagé en ue d'une meilleure connaissance
sur l'existence ou non de réactions croisée
avec les autres trématodoses.
. . ./ . . .
- 9
Une étude beaucoup plus poussée et élar ie à une plus grande échelle
permettrait également de déterminer toutes 1 s limites d'utilisation pratique
de ce test.
La réalisation de tels objectifs pourra t donc servir dans l'organisation
et la mise en place de moyens de contrôle et de lutte appropriés contre cette
parasitose.
- 10
B I B L I O G R A P H I E
l- BOULARD (C.), BOUVRY (M.) et ARGENTE (G.)
Comparaison de la détection des foyers de Fa ziolose par test ELISA sur lacto-
sérum et sérum par coproscopie.
Ann. Rech. Vét., 1985, 16 (4) ; 363-368.
2- BOULARD (C.) et REGNAULT (A.)
L'immunodiagnostic de la Fasciolose bovine p K la technique ELISA.
G.T.V.,
1989, 1-B - 337, 58-68.
3- SANTIAGO (N.), HILLYER (G.V.)
Antibody profiles by EITB and Elisa of cattl
and sheep infected with Fasciola
hépatica.
J. Parasit., 1988, 74 (5) ; 810-818.
4- SINCLAIR (I.J.) et WASSAL (D.A.)
Sero-diagnosis of Fasciola hepatica infectic s in cattle.
Vet. Parasit., 1988, 27, 283-290.
5 - ~SCOTT (R.B.), FARREL (c.J.), SHEN (DLL)
Diagnosis of naturally occuring Fasciola hep tica infections in cattle
with an enzyme. linked immunosorbent assay.
Am.
J. Vet. Res., 1983, 45 (l), 178,179.
HS
REPUBLIQUE DU SENEGAL
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT
RURAL ET DE L'HYDRAULIQUE
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A.)
DEPARTEMENT DE RECHERCHES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
LABORATOIRE NATIONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P. 2057
DAKAR-HANN
DIAGNOSTIC IMMlJNOLOGIQUE DE
A E'ASCIOLA GIGANTICA CHEZ
ETUDE EXPERIMENTALE DE LA
Service de Parasito
L.N.E.R.V.
REF. N"017/PATH0.ANIM.
MAI 1992.
RESUME
L'objet de cette étude a été d'expéri enter le test ELISA utilisant un
antigène métabolique excrétion-sécrétion d 7s le diagnostic de la Fasciolose
à Fasciola gigantica chez le mouton. Pour
2 faire, deux agneaux âgés chacun
de 3 mois et 15 jours ont été utilisés.
Ces agneaux ont reçu séparément par 1
voie orale,2 300 métacercaires
issues de Lymnées infestées en laboratoire
Le suivi de ces animaux, du début de
'expérience jusqu'à leur mort
naturelle,
a été effectué par une série de prélèvements coprologique et
sérologique .
Les analyses coprologiques se sont ré élées négatives tandis que la séro-
logie a permis de déceler les premiers ant corps anti-Fasciola gigantica dès
la 4ème semaine après infestation.
A l'autopsie, des douves adultes et ' matures ont été récoltées successi-
vement sur le premier et le second agneau.t
Les résultats ainsi ressortis de ce
remier test montrent donc que le
diagnostic par la méthode ELISA est plus
ensible que la coprologie et permet
le dépistage précoce de la fasciolose à 1 .sciola gigantica chez le mouton.
MOTS-CLES
Fasciola gigantica - Distomatose - 1 lfestation - Diagnostic - Coprologie -
ELISA - Ovin - Sénégal.
1. INTRODUCTION
Le diagnostic anté-mortem de la fasc: Ilose chez les animaux en vue de
dégager des mesures de lutte efficace et : 3 rtout de contrôle continu approprié
1
pose encore des difficultés quant à l'iden
fication précise de cette maladie.
La seule méthode utilisée jusqu'ici e
basée sur la coprologie recèle
encore des insuffisances en ce sens que le
premiers oeufs ne peuvent être
clairement détectés qu'à partir du 3è mois
infestation période à laquelle
les vers ont atteint déjà leur stade de dé
loppement adulte. Une technique
plus sensible et permettant de déceler à t
re précoce les tous premiers
signes de la maladie s'avère donc nécessai
: tests sérologiques (4) (5).
A cet effet, il existe déjà un test sérolo
que par la méthode ELISA qui per-
met de mettre en évidence l'apparition des
remiers anticorps anti-fascioliens
chez des animauxmalades dès la 3è semaine
'infestation.
Ce test a été utilisé chez des moutons d 'expérience suivis en laboratoire
du début de leur infestation à leur mort na
relle, et nous a ainsi permis de
suivre la cinétique des anticorps.
L'objectif de ce travail était donc de
ester la validité de la méthode
et de voir la possibilité de son utilisation comme moyen de diagnostic à titre
individuel, ou de dépister la présence de la maladie au sein d'un troupeau
donné.
II. MATERIEL ET METHODES
1. Animaux d'expérience et infestation
Deux agneaux mâles âgés chacun de 3 moi !et en provenance d'une zone
indemne de trématodoses ont été utilisés. Par ailleurs, l'analyse coprologique
effectuée au préalable sur ces deux agneaux a
nt leur infestation à également
donné un résultat négatif.
Ces agneaux ont été infestés par la voie
rale à partir de métacercaires
de Fasciola gigantica.
/
. . . . . .
Les métacercaires sont issues de Lymn'
d'élevage infestees expérimentale-
ment en laboratoire et suivies jusqu'à Xa
tie des cercaires qui se sont
ensuite enkystées pour donner des métacer
res.
Le premier agneau désigné sous le no
reçu en une seule prise
300
métacercaires âgées de 3 mois et 15 jours,
qui ont été conservées à 4" jus-
qu'au moment de leur utilisation.
Le second animal désigné sous le no2
reçu à peu près le même nombre
de métacercaires âgées également de 3 moi
.t 15 jours mais à la différence
que ces métacercaires avaient subi un cho
.hermique de courte durée (congé-
lation involontaire survenue au cours du
lps de conservation).
2. Prélèvements de fécès et de sang pour
llyses (voir tableau de prélèvements)
a) Prélèvements de fécès et analyses cqpr
bgiques
Pendant le suivi des animaux, des pr
vements de fécès suivis d'analyses
coprologiques ont été effectués avant inf
:ation d'abord, ensuite au rythme
d'un prélèvement par semaine à partir de
3è ayant suivi l'infestation.
b) Prélèvements de sang et épreuves sérol
.ques
i
ue de la récolte de sérums
destinés aux tests sérologiques ont été
alement
faits avant infestation
d'abord (étape J O-l) ensuite le jour mê
de l'infestation (étape JO) et
enfin une fois par semaine jusqu'à la m
naturelle des animaux (étapes
JO+ 1, J 0 f 2, J 0 + 3, etc. ..). Les ana
ses sérologiques ont été réalisées
à partir de la technique ELISA de dosage
es anticorps utilisant un antigène
métabolique excrétion - secrétion.
une boîte de pétri et laissées
pendant 3 heures avec un peu d'eau dist
lée. Le produit des excrétions-
ntrifugé. Le surnageant a été
recueilli puis mis en aliquots après en
voir déterminé le taux de protéines
/
. . . . . .
- 3
TABLEW No1 : PRELEVEMENTS DE SANG ET DE FECES
AGNEAU No 1
AGNEAU No2
Date
Nature
No pré-
Etape
prélèvement
lèvement
pe
Date
Nature
No pré-
prélèvement levement
Jo - 1
22
Jo -
20.2.90
Fécès - sang
23
avant infest.
20.2.90
Fécès - sang
avant nfest.
Jo
b
21.2.90
Fécès - sang
24
21.2.90
Fécès - sang
25
jour infest.
jour
ifest.
Jo +
j
28.2.90
Sang
27
lère
im.
Jo + 14 j
Jo +
7.3.90
Sang
28
;,j 77.3.90 1
Sang
(
29
2ème sem.
2ème
Lj
Jo + 21 j
14.3.90
Sang + fécès
30
Jo +
14.3.90
Sang + fécès
31
3ème sem.
3ème
zm.
I
I
Jo + 28 j
sj
Sang +
Jo + zm.
I 21.3.90 Sang + fécès
33
4ème sem.
21.3.90
fécèS
I
I
I
32
I
4ème
I
I
Jo +
5j
28.3.90
Sang + fécès
35
5ème
em.
Jo f
6ème 2j
em.
-/- 3.4.90 l Sang + fécès 37
i
Jo + 49 j
10.4.90
Sang + fécès
39
7ème sem.
/ x0.4.90 j Sang + fécès /
38
/
J o
7èmt
49 j
sem.
I
I
Jo + 56 j
J o
Sème sem.
1 17.4.90
1 Sang + fécès 1
40
1
/ 17.4.90 / Sang + fécès /
8èml
41
Jo + 62 j
62 j
9ème sem.
1 24.'+.90
j Sang
J o
+ fécès
1
42
1
Sang + fécès
9èm,
sem.
43
Jo + 70 j~ / 2.5.90 /Sang + fécès / 44 /
Jo
70 j
2.5.90
Sang + fécès
45
10ème sem.
10è : sem.
l
l
l
Jo + 77 j
IIème sem.
1 9.5.90 / Sang + fécès / 46 /
Jo + 84 j
12ème sem.
Sang + fécès
Jo + 91 j
13ème sem
1 23.5.90
j Sang + fécès 1
48
1
Jo + 98 j
14ème sem.
/ 30.5.90 j Sang + fécès ( 49 /
- 4
Deux dilutions de sérums ont été test& s pour les épreuves sérologiques :
une dilution au 1/100 et une dilution au 1/ 00 avec une concentration unique
du conjugué à la péroxydase dilué au 1/5000 et de l'antigène titrant 6 mg/ml
utilisé à raison de 10 pg/ml.
Les sérums de référence ayant servi
ur la réalisation de ces tests sont
ceux récoltés sur l'agneau no1 avant infe
ation pour le négatif et à la veille
de la mort pour le positif.
III. RESULTATS
1. Agneau no1
a) Coprologie
La présence d'oeufs de douve n'ab pas
té constatée pour l'ensemble des
analyses coprologiques et la mort de l'a
a1 est intervenue 132 jours après
infestation soit à la 14ème semaine.
A l'autopsie, 39 douves adultes ent
s ont été récoltées au niveau du
foie et on a pu également déceler la pré
e d'oeufs dans le parenchyme
hépatique.
b) Sérologie (cf. graphique)
. Dilution au l/lOO
L'apparition des anticorps est int
enue dès la 3ème semaine ayant
suivi l'infestation. Cependant, la courb
des densités optiques a connu une
ascension dès la lère semaine,
uite par de légères baisses consta-
tées à la 2è et à la 10è semaine.
ier pic a été atteint à la llè
semaine mais la valeur de la de
e la plus élevée a été enregistrée
à la veille de la mort de l'ani
semaines après l'infestation.
. . . / . . .
TBBLEAU No2 : DENSITES OPTIQUES
Mouton no1
Mouton no2
No prélève-
No prélève-
Période
ment
ment
d.oau l/lOO d.o. au 11200
d.o.aul/lOO
d.o.au 11200
Jo + 1
22
0,073
0,052
23
0,091
0,074
Jo
Jo + 7
24
0,102
0,056
25
0,077
0,056
lère semaine
Jo + 14
2ème semaine
26
0,072
0,055
27
0,079
0,071
Jo + 21
28
0,104
0,090
29
0,093
0,070
3ème semaine
Jo f 28
30
0,210
0,150
31
0,185
0,075
4ème semaine
Jo + 35
5ème semaine
32
0,249
n 313
77
“,L-L.-’
l-l.379
-,--
0.175
Jo + 42
P
34
0,301
0,24,7
35
0,263
0,191
6ème semaine
I Jo + 49
n 7no
tl 17
“,-‘UZ
1
0.764
1 0.224
1
-,--
-2
7ème semaine
I 36
0,351
I
Il
-’
1
I
Jo + 56
38
0,369
0,31.7
39
0,279
0,243
8ème semaine
Jo + 62
40
n 2OQ
“,J,”
n 7?c,
Il
bl
I
n.769
I
0.743
I
9ème semaine
t
I
““‘L’” II
‘-
I -,---
l
-,- .-
l
I
II
I
I
I
Jo + 83
/ 12ème semaine
““‘L’v II
Jo + 90
I
13ème semaine
46
0,460
0,403
I
I
II
Jo + 97
47
0,523
n IL11 7
II
14ème semaine
- 6
. Dilution au 1/200
La même ascension de la courbe des di isités optiques est apparue, mais
les valeurs enregistrées sont plus faible, pour les mêmes sérums dilués au
l/lOO. Le premier pic est observé à la 9è ;emaine et la valeur de la densité
optique la plus élevée se situe également i la veille de la mort de l'animal.
2. Agneau no2
L'agneau no2 n'a, quant à lui, survé I que pendant 74 jours seulement.
A l'autopsie, 56 douves immatures ont pu
tre prélevées au niveau du foie
mais aucun oeuf n'a été observé à l'exame
microcopique du parenchyme hépa-
tique.
a) Coprologie
Aucun oeuf n'a été rencontré au cour
des examens coprologiques effec-
tuées pendant l'expérience.
b) Sérologie (cf. graphique)
. Dilution au l/lOO
Les premiers anticorps apparaissent
la 4è semaine et le premier pic
est atteint à la 6è semaine soit deux sem ines après. Comme précédemment, le
maximum de la valeur des densités optique
s'observe à la veille de la mort
de l'animal correspondant à la 10è semain
après infestation et cette valeur
se rapproche de celle du sérum de l'agnea
no1 à la même période mais à une
dilution au 1/200.
m
Dilution au 1/200
Les valeurs des densités optiques o
évolué de la même manière que
pour les épreuves précédentes et le pic
situe à la gè semaine. On note
cependant une baisse de la réponse
aire de l'agneau no2 dont les
valeurs des densités optiques de la dilu
on au l/lOO sont plus faibles que
celles de l'agneau no1 à la même dilutiod et se rapprochent plutôt des valeurs
des densités optiques de la dilution au
/2OO de ce même agneau.
/
. . . . . .
- 8
IV. DISCUSSION
Ce test permet de déceler la présence
es anticorps anti-Fasciola. Son
intérêt majeur est la détection très précoc
de ces anticorps dès la 3è semaine
d'infestation.
Ces résultats sont semblables à ceux o tenus par Chantal BOULARD (1) (2).
Par ailleurs, on constate qu'il y a de
différences au niveau des deux
agneaux en ce qui concerne les réactions au
infestations (réceptivité et
réaction sérologique).
Chez l'agneau n'l, les anticorps sont
lus précoces (3è semaine) que
chez l'agneau no2 (4è semaine). Ce dernier
st mort plus rapidement (74è jours)
avec 56 douves immatures et le premier (132
jours) avec 39 douves adultes.
Ces différences sont dues soit à un si ple phénomène de comportement
individuel comme le soulignent SANTIAGO et
ILLYER (3), soit à une virulence
atténuée de la souche infestante du no2 qui a subi un léger choc thermique.
Une étude répétée de cette infestation, ave
un plus grand nombre d'animaux,
permettra d'élucider ce problème.
V:CONCLUSION
Les résultats ressortis de ce premier
est montrent en effet que la
technique ELISA utilisant un antigène métab lique excrétion - secrétion peut
valablement être utilisé dans le dépistage
récoce des anticorps anti-Fasciola
gigantica chez le mouton.
Cependant, un test de spécificité de 1
réaction antigène-anticorps de
Pasciola gigantica devra être envisagé en ue d'une meilleure connaissance
sur l'existence ou non de réactions croisée
avec les autres trématodoses.
. . ./ . . .
- 9
Une étude beaucoup plus poussée et élar ie à une plus grande échelle
permettrait également de déterminer toutes 1 s limites d'utilisation pratique
de ce test.
La réalisation de tels objectifs pourra t donc servir dans l'organisation
et la mise en place de moyens de contrôle et de lutte appropriés contre cette
parasitose.
- 10
B I B L I O G R A P H I E
l- BOULARD (C.), BOUVRY (M.) et ARGENTE (G.)
Comparaison de la détection des foyers de Fa ziolose par test ELISA sur lacto-
sérum et sérum par coproscopie.
Ann. Rech. Vét., 1985, 16 (4) ; 363-368.
2- BOULARD (C.) et REGNAULT (A.)
L'immunodiagnostic de la Fasciolose bovine p K la technique ELISA.
G.T.V.,
1989, 1-B - 337, 58-68.
3- SANTIAGO (N.), HILLYER (G.V.)
Antibody profiles by EITB and Elisa of cattl
and sheep infected with Fasciola
hépatica.
J. Parasit., 1988, 74 (5) ; 810-818.
4- SINCLAIR (I.J.) et WASSAL (D.A.)
Sero-diagnosis of Fasciola hepatica infectic s in cattle.
Vet. Parasit., 1988, 27, 283-290.
5 - ~SCOTT (R.B.), FARREL (c.J.), SHEN (DLL)
Diagnosis of naturally occuring Fasciola hep tica infections in cattle
with an enzyme. linked immunosorbent assay.
Am.
J. Vet. Res., 1983, 45 (l), 178,179.