[NSTITUT D’ÉLEVAGE ET DE MÉDECINE VÉTÉRINAIRE...
[NSTITUT D’ÉLEVAGE ET DE MÉDECINE
VÉTÉRINAIRE DES PAYS TROPICAUX
REVUE D’ÉLEVAGE
E T D E
MÉDECINE VÉTÉRINAIRE
DES PAYS TROPICAUX
Étude histochimique
du contenu caecal des schistosomes
par P. PICART et S. GRETILLAT
Tome XVII Inouveile sene,
Nez 4 - 1964
I
-- VIGOT FRÈRES, ÉDITEURS
23, rue de l’École-de-Médecine, PARIS-VI’

Rev. Elev. M&i. vét. Pays trop., 1964, 17, 4 (607-14)
Étude histochimique
du contenu caecal des schistosomes
par P. PICARJ ef S. GREJILLAJ
RÉSUMÉ
A l’aide d’une série de tests histochimiques différentiels, faits sur coupes
hisfologiques transversales de schistosomes adultes mâles et femelles (Schisto-
SO~~I curossoni), il est possible d’établir l’analogie entre le pigment intracaecal
de ces helminthes et celui présent dans le système réticule-endothélial du foie,
des poumons, et des reins de ruminants infestés par ces parasites.
Ce pigment n’existe que dans les caecums de la femelle, ne contient pas
de fer aisément décelable et appartient au groupe des mélanines.
.
Sur schistosomes vivants, examinés immédia-
Ces auteurs émettent donc l’hypothèse de
tement après prélèvement, il est remarquable
l’identité du pigment bilharzien intrahépatique
de pouvoir suivre, principalement chez la femelle,
et du contenu des caecums de l’helminthe.
le trajet des tubes caecaux qui se détachent nette-
Nous avons récemment signalé (GRETILLAT &
ment sur le fond gris blanchâtre du corps de
PICART, 1964) chez les femelles gravides de Sch.
I’helminthe.
curossoni, la présence dans le tube intestinal d’un
Un examen plus détaillé montre que la lumière
pigment sinon identique du moins très voisin
des caecums est occupée par une masse de cou-
de celui rencontré dans les cellules de Kupffer
leur marron très foncé chez la femelle et marron
et les histiocytes périalvéolaires du poumon de
plus ou moins clair chez le mâle.
petits ruminants fortement infestés de schistoso-
La fixation à l’alcool à 60/700 atténue la cou-
miase intestinale.
leur et parfois décolore complètement le contenu
La présente note est le compte rendu d’un
intestinal du mâle, celui de la femelle gardant
travail fait sur coupes histologiques de schisto-
sa couleur initiale très foncée.
somes adultes mâles et femelles, soumises à
Etudiant la localisation et la nature du pigment
des tests histochimiques dans le but de détermi-
bilharzien présent dans le foie d’animaux de
ner la nature chimique du contenu intestinal des
laboratoire infestés expérimentalement par Schis-
schistosomes.
fosoma monsoni, Sch. joponjcum et Sch. hoemato-
Matériel d’expérience. - Une trentaine
bium, MELENEY et coll. écrivent en 1953 :
d’exemplaires adultes mâles et femelles prélevés
« Un pigment hématique, excrèté de I’intes-
dans les veines mésentériques d’un mouton
tin des vers adultes, s’accumule dans les cellules
sacrifié aux abattoirs de Dakar.
de Kupffer et les histiocytes des espaces porte et
Protocole expérimental. - Le matériel est
des lésions dues aux oeufs,... »
déshydraté, inclus dans la paraffine, puis monté
601
__ --- -.-

sur lames en coupes transversales de 5 p I intestinal de la femelle, il est absent de celui du
d’épaisseur.
mâle (photo no 1) (photo no 2).
Une fois déparaffinées, les coupes sont soumises
Au niveau du caecum unique (zone desglandes
aux tests différentiels suivants, complétés pour
vitellogènes), il est maintenu en place dans la
i,
certains d’entre eux par une coloration de fond
lumière du tube par un fin réticule tendu entre
à I’hématoxyline-éosine.
les parois caecales, recouvertes et imprégnées
10 Fluorescence en lumière de WOOD (lumière
par endroits d’îlots pigmentaires (photo no 1).
ultraviolette).
Le pigment est constitué par de petites granu-
20 Solubilité dons les acides minéraux : S04HZ
lations de 0,6 à 0,9 tu. de diamètre, marron foncé
à 10 p. 100.
et plus ou moins réfringentes. Examiné sous une
30 Solubilité dans les bases mlnéroles : KOH a
certaine épaisseur, l’ensemble de la masse cen-
10 p. 100.
raie, emplissant la lumière intestinale, a une
40 Décoloration par les agents oxydants, bain
zouleur pouvant aller jusqu’au marron très foncé.
oxydant de MAYER (in Lison, 1960).
b) Résulfafs d e s réacfions différentielles faites
50 Présence de fer oisémenf décelable, réaction
sur coupes hisfologiques.
de PERLS, variante Lison (in Lison, 1960).
Le contenu caecal des femelles :
60 Présence de fer après démasquage, démas-
l” ne présente aucune fluorescence en lumière
quage à l’alcool acide de Macallum (1895 et 1905).
Wood ;
70 Recherche du fer après incinérofion : a) mi-
20 est insoluble dans les acides minéraux. Il
croincinération de POLICART (1953) ; b) et tech-
est cependant décoloré par l’alcool sulfurique à
nique personnelle de microincinération (*).
2 p. 100 (alcool à 950). S’agit-il ici de la réaction
80 Coloration par coloranfs des graisses (chromo-
utilisée par SAWADA et coll. en 1956, sous le
lipoïdes).
nom de « alcool sulfate » ?
90 Réacfion argentaffine par le procédé de MAS-
30 est soluble dans les bases minérales. Se
SON (MASSON, 1914).
décolore en 15 mn environ dans une solution de
100 Solubilité dans /es polysuifures, sulfure d’am-
KOH à 5 p. 100. Seul le réticule maintenant le
monium (in Lison, 1960).
pigment au centre du caecum persiste si l’on
prend certaines précautions (photo no 3) ;
40 est décoloré très rapidement par les agents
interprétation des résultats obtenus
l
au cours de ces réactions différentielles
oxydants. Réaction de MAYER au chlore. Comme
dans la réaction avec les bases minérales, seul
a) Localisation du pigment infracaecal des schis-
un fin stroma est visible dans la lumière caecale
fosomes.
, (photo no 4) ;
50 ne contient pas de fer aisément décelable
Trouvé en abondance dans la totalité du tube
(réaction de PERLS, variante Lison) ;
_ -.----
60 ne contient pas de fer colorable après
technique de démasquage de Macallum à l’alcool
(*) Pratiquer la microincinération sur un brûleur élec-
acide.
trique de HOFFMAN sans aller jusqu’à une minérali-
sation totale qui détruirait le fin réticule de matières
7O après microincinération et imprégnation
organiques maintenant le pigment en place dans 113
des cendres par le ferrocyanure de potassium à
lumière du cæcum et qui, après incinération va fixer
2 p. 100 en milieu chlorhydrique, donne les réac-
les cendres.
tions du fer ferrique. Le contenu caecal du mâle
Placer sur la coupe ainsi semi-minéralisée une goutte
donne les mêmes réactions quoique ne renfer-
d’un mélange à parties égaies de :
mant pas de pigment ;
Les cendres ren-
fermant du fer
80 n’est pas coloré par les colorants des grais-
F e r r o c y a n u r e d e p o t a s s i u m à
ses ;
2 p. 100
bleu sombre sur
Acide chlorhydrique à 2 p. 100
90 réduit les sels d’argentamine (MASSON). II
l e f o n d b r u n d e
1, la coupe.
est cependant difficile d’apprécier l’intensité

de la réaction étant donné la coloration initiale
-le pigment résidu de la digestion de I’hémoglo-
brun-noir du substrat (photo no 5) ;
line, témoigne néanmoins de la consommation
100 n’est pas soluble dans le sulfure d’ammo-
iu sang ».
nium.
Malheureusement,
ces auteurs n’apportent
aucune preuve permettant de rattacher ces dé-
Ihets à de I’hémosidérine ou à tout autre produit
DISCUSSION
de dégradation de l’hémoglobine.
A la lecture des résultats rassemblés dans le
MELENEY et coll. en 1953, considèrent le
tableau ci-dessus, le pigment intracaecal des
pigment intrahépatique comme identique à celui
femelles de schistosomes peut être considéré
trouvé dans la lumière intestinale des schistoso-
comme :
mes. Ils l’appellent « hematin pigment » sans
démontrer cependant qu’il renferme du fer
10 différent des chromolipoïdes (absence de
aisément décelable.
fer décelable et non colorable par les colorants
COELHO en 1952, înet seulement l’accent
des graisses) ;
sur l’action délabranfe possible de ces dépôts
20 différent de I’hémato’idine qui n’est pas
intrahépatiques sans parler de leur origine et
décolorée par les agents oxydants ;
de leur nature chimique.
30 différent de I’hémosidérine, qui est soluble
A notre connaissance, seuls SADAWA et coll.
dans les acides minéraux mais non dans les bases,
en 1956, par une série de tests analogues à
n’est pas décolorée par les agents oxydants et
ceux que nous avons utilisés (*), démontrent
ne donne pas de réaction argentaffine ;
l’absence de fer et la nature mélanique du pig-
40 différent du pigment type palustre soluble
ment bilharzien trouvé dans les cellules de
dans le sulfure d’ammonium et qui a une réac-
KUPFFER.
tion argentaffine négative ;
N’ayant travaillé que sur coupes d’organes
50 analogue aux mélanines par ses carac-
(foie), ces auteurs ne pouvaient remarquer la
tères de solubilité.
similitude chimique existant entre le contenu
II est soluble dans l’alcool sulfurique, mais
intracaecal de la femelle du schistosome et les
nous n’avons trouvé dans la bibliographie aucune
dépôts pigmentaires intrahépatiques.
référence quant au comportement des mélanines
dans un tel milieu.
Résumé ei conclusion
Les caecums des femelles et des mâles de schis-
tosomes renferment du fer que l’on ne peut mettre
A l’aide d’une série de tests histochimiques
différentiels, faits sur coupes histologiques trans-
en évidence que par des techniques brutales de
versales de schistosomes adultes mâles et femelles
démasquage (microincinération de POLICART).
(Schistosoma curassoni), il est possible d’établir
Ce fer provient vraisemblablement de I’hémo-
l’analogie entre le pigment intracaecal de ces
globine du sang dont se nourrit le schistosome.
helminfhes et celui présent dans le système réticu-
Au contraire, le pigment qui n’existe que dans
les caecums de la femelle ne contient aucun fer
lo-endothélial du foie, des poumons, et des reins
aisément décelable et a des caractères chimiques
de ruminants infestés par ces parasites.
semblables aux dépôts mélaniques rencontrés
Ce pigment n’existe que dans les cæca de la
dans les cellules du système réticule-endothélial
femelle, ne contient pas de fer aisément déce-
du foie, des poumons et des reins des animaux
lable et appartient au groupe des mélanines.
fortement infestés de bilharziose (GRETILLAT et
Institut d’Elevoge et de Médecine vétérinaire des
PICART, 1964) (photo no 6).
Pays fropicaux.
LEROUX en 1929, signale l’importance des
Laboratoire nationai de I’Elevoge et de
dépôts pigmentaires dans le foie et les poumons
Recherches vétérinaires.
d’ovins parasités par S’ch. maffhei, mais ne donne
Services de Biochimie et d’Helmintho/ogie
aucune précision sur leur nature et leur origine.
Dakar-Hahn (Sénégal)
LAGRANGE et SCHEEMANS en 1951 pré-
tendent qu’ils sont une des résultantes de la diges-
(*) Pour le détail de ces techniques, voir l’article
tion du sang par les schistosomes. << L’abondance
GRÉTILLAT & PICART, 1964, 17, 3, p. 433-40.
909
-
- _..... -.-~~---
.-

TARLCAU
1
Chromolipoïde
Hématoïdine
Hémosidérine
Hémoglobine
Pigment type
Mélanine
Pigment du foie
Caecum
palustre
poumon, rein
Fluorescence
++
Solubilité/
*
acide minéral
SolubilitB/
+
*
+
+
+
base minérale
Décoloration/
+
u
4-b
++
oxydant
2
2
Fer facilement
+
u
0
décelable
Fer ap&s
3-b
t-b
4-k
démasquage
Fer après
+?-
+!-
l-i-
i+
microincinération
++(Xl
Col. des grsisses
f
Réaction
+
++
f
argentaffine
+w
Solubilité de
+ +
Sulfure Nl$
(4 - Le fer mis en évidence dans le caecum du mâle et de la femelle n'est décelable qu'après une technique brutale de démasquage (microincinération)
Il provient vraisemblablement de l'hemoglobine du sang contenu dans les coeca, et non du pigment lui-même qui, s'il était ferrique aurait son
fer aisément décelable par les réactions de Perls ou de Macallum.
(xx) - Une croix unique s'explique par le fait qu'il est parfois difficile d'évaluer l'intensité de la réaction, la coloration initiale brune foncée
du substrat gênant la lecture

,
.
Photo no 1. - Coupe transversale de schistosomes mâle et femelle
Phofo n” 2. - Coupe transversale de schistosomes mâle et
colorée à I’hématoxyline éosine. Le caecum unique de la femelle
f e m e l l e c o l o r é e 0 I ’ h é m a t o x y l i n e é o s i n e . L a c o u p e p a s s e p a r
au niveau de la région des glandes vitellogènes contient du pig-
la partie antérieure de la femelle et l’on aperçoit particulièrement
ment qui recouvre les parois du tube intestinal et qui par endroits
dans l’une des branches caecales des amas importants de pig-
est inclus dans les cellules mêmes du caecum. Les diverticules
ment.
caecaux du mâle ne renferment aucun pigment.

Phofo no 3. - Coupe transversale de schistosomes mâle et
Photo no 4. -Coupe transversale de schistosomes mâle et femelle.
femelle. Traitement par la potasse à 10 p. 100 puis coloration
T r a i t e m e n t p a r l e s cgents o x y d a n t s , p u i s c o l o r a t i o n d u f o n d
du fond à I’hématoxyline éosine. Le pigment intracaecal de
à I’hématoxyline éosine. Le pigment intracaecal de la femelle a
la femelle a été dissous et il ne reste plus que le réticule lui
été complètement décoloré et seul n’est visible que le fin réticule
servant de support.
qui maintenait en place le pigment. Les glandes vitellogènes
sont bien mises en é,/idence par la coloration finale.
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SUMMARY
Histochemical study of the cecal contents of the schistosomes
By means of a series of differential histochemical tests carried out on trans-
verse histological sections of adult male and female schistosomas (Schisfosomo
curossoni), it is possible to establish the analogy between the intracecal pig-
ment of these helminthsand thatfound present in the reticulo-endothelial system
of the liver, Iungs and kidneys of ruminants infested by these parasites.
This pigment is only in the female caecum, does not contain easily detec-
table iron and belongs to the melanin group.
RESUME N
Estudio histoquimico del contenido cecal de 10s esquistosomas
Con una serie de pruebas hrstoquimicas diferenciales, hechas sobre cortes
histologicas transversales de esquistosomas adultos machos y hembras
(Schisfo-
somo curassoni), es posible establecer la analogia entre el pigmento intracecal
de estos helmintos y el presente en el sistema reticulo-endotelial del higado,
de 10s pulmones, y de 10s rinones de rumiaotes infectados con estos parasitas.
Este pigmento
existe solo en el ceco de la hembra, no contiene hierro reve-
iable facilmente y pertenece al grupo de las melaninas.
BIBLIOGRAPHIE
COELHO, B. (1952). - Publicaçoes Avulsas do
Villars Ed., 3e Ed., 2 vol., 842 pages,
Instituto Aggeu Magalahes, I, p. 61.
MACALLUM, A. B. (1895). - j. microsc. Soc.,
GONNERT, R. (1955). - Z. Tropenmed. Paras#.,
p. 175.
6, p. 257.
MACALLUM, A. B. (1905). - j. Physiol., p. 95.
MASSON, M. P. (1914). - Ca R. Acad. Sci., 158,
GRETILLAT, S. & PICART, P. (1964). - Rev. El.
p. 59.
Med. vef. Pays trop. Ier Congrès Inter. Parasit.
MELENEY, H. E., SANDGROUND, J. H., MOORE
Rome, sept. 1964, 17, 3, p, 433.
D. B., MOST, H. et CARNEY, 8. H. (1953).
LAGRANGE, E. & SCHEEMANS, G. (1951). -
- Amer. J. trop. med. hyg., 2, p. 883.
Ann. Parasit. hum. camp., 26 (4) p. 334.
POLICARD, A. P. (1953). - Bull. hist. A@I., 51,
LE ROUX, P. L. (1929). - 15th Ann. Rept. Dir.
p. 160.
Vef. Serv., Un. S. Afr., p. 347.
SAWADA, T., HARA, K., TAGAKI, K., NAGA-
LISON, L. (1960). - Histochimie et Cytochimie
ZAWA, Y. et OKA, S. (1956). - Amer. j.
animales. Principes ef méthodes. Gauthier-
k-op. med. hyg., 5 p. 847.
~-~ ---
3ntimé en France. - Imn. JOUVE. 15, rue Racine. Paris (6’)