INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES AGRICOLES ...
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A.)
a---------____
LABORATOIRE NATIONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
PARAPLEGIE DU MOUTON DJALLONKE :
\\
REF. 26/VIRO
FEVRIER 1985
.
PARAPLEGIE DU MOUTON DJALLONKR :
l&w-mM- ty-Qhwi~*~ti~~-
A. NIASSE*, Y. LEFORBAN*,
M. THIOUNE*,
M. SOUANE**
INTRODUCTION
La paraplegie du mouton Djallonké, syndrome ataxique
atteignant les ovins
des deux sexes et de tout âge se caractérise par une paralysie progressive des
membres sans autres symptômes associés et évolue vers la mort en 3 à 15 jours.
Parmi les
hypothèses émises(ipour en préciser l'étiologie, celle de la
mycotoxicologie a retenu particulièrement notre attention.
La presente note a pour objet de rapporter les résultats des travaux
d'isolement de culture et
. d'expérimentation de certaines souches
sur des souris blanches adultes. Toute cette flore fonpique provenant de reste
de fane d'arachide mang6e par des moutons Djallonke morts de pa:plégie.
MATERIEL ET METHODE
Matériel
- Reste de fane d'arachide mangiZe par des moutons morts de paraplégie
- Milieux d'isolement et de culture pour moisissure ','
- Milieu spécial de culture pour Ochraceus
- Milieu de dispersion : eau gelosée à l%,
- Souris blanches adultes
Méthode
Préparation de l'échantillon de paille d'arachide
- Un échant?llon d'un kg de paille d'arachide est broyé finement dans
des pots flambés à l'alcool du broyeur Waring Blendor.
- 10 g de cette poudre sont mis en suspension dans 90 ml d'eau gélosée
stérile dans une f?ole Erlen Meyer de 500 ml contenant des billes de verre pour
obtenir une suspension mère à 10 %.
Burelli.
X chercheurs au LNERV
/
. . . . . .
R chercheur à 1'ITA
- 2 -
- Une série de dilutions allant de 10 -2 ‘3 10 -5 dans de l’eau gélosée
s t é r i l e .@A-\\3 ~,Q+J
ht’ $
ans des tubes 3 essai stériles.
Isolement et denombrement des microorganismes
Dans des boîtes de Pétri stériles, on place 1 ml de chaque dilution puis
on y coule un des milieux de cultures yM, yMS ou PCA maintenus en surfusion à
40°C au plus. Le mélange inoculium-milieu est obtenu par agitation des boîtes en
décrivant des 8 avant solidification du milieu. Les boîtes sont ensuite incubées
à la température du Laboratoire jusqu’à développement des colonies.
Culture en masse de champignons sur riz
L’Aspergillus Flavipes, le Fusarium, l’Uromyces, la moisissure non déter-
minée et le complexe (poudre de fane d’arachide mère) sont mis en culture sur
riz comme suit :
Le riz Uncle Benz est stéril isé dans de l’eau distillée à raison de 200 g
pour 400 ml 3 l’autoclave.
Après refroidissement et contrôle de la stérilité, l’ensemenc< lent est
effectué par attouchement. L’incubation est faite à la température ordinaire du
Laboratoire (25°C) pendant un mois.
La récolte est faite par séchage du riz contaminé qui est moulu par la
suite.
Culture en bouillon de l’dspergillus Ochraceus
De toutes les moisissures isol6es, seul 1’Aspergillus Ochraceus a été mis
ia
en culture en bouillon. Une parcelle
dqculture pure sur yMS est mise
en suspension dans le bouillon en Erlewnayer avec barreau magnétique.
Une agitation parmanente oxigénant la culture est obtenue sur agitateur en 1
température ordinaire de Laboratoire.
La culture est jugée bonne quand le milieu, préalablement incolore vire 3.
l ’ o c r e .
. . /. .**
t
-3-
Inoculation aux souris
a) - Poudre de riz
___-----_----
La poudre de riz contamina, mélangé aux alimentas est donnée à manger
aux souris à raison de 10 g/j par 10 souris pendant 10 jours.
b) - Bouillon d'A.sEerPillus Ochraceus
___- --------- --'Q.-----,-----,--,
Les souris adultes d'Épreuve au nombre de 15 et réparties en 3 groupes
recoivent per os dans l'eau de boisson le bouillon de culture de 1'Aspergillus
Ochraceus à raison de 1,5 ml par souris et par jour nendant 10 jours.
Les témoins recoivent la même eau de boisson sans le bouillon.
R E S U L T A T S
=z=z=======x=====
Microflore isolé
Dikombrement
: 11 a été dénombré 24 colonies de levure et 220 colonies de flore
-3
fongique dont 200 de moisissure sur le milieu yMS à la dilution ï-0
. Sur les--
autres milieux, un envahissement par des espèces à croissance très rapide du fait
de l'absence de pression osmotique a pêne le comptage.
Espèces isolées
En plus d'une moisissure non déterminGe,
les espèces suivantes ont été
mises en évidence :
1 - Aspergillus Niger
2 - Aspergillus Flavus' (groupe)
3- Fusarium oxysporum
4 - Aspergillus Ochraceus
5 - Uromyces spp
;; ;wg-ypPys+
8 - Syncephalostrum sp.
. . /. .,,
- 4 -
9 - Paec yl.omyces s p
10 - Penysil lium sp (biverticillf symetrique)
1 1 - hspergillus Amstallodami
TEST IN VIVO
11 n’a pas été not& de symptômes pouvant intéresser le syndrome paraplégi-
que dans les cas des champignons Asperzillus Flavipes, Fusarium oxysporum,
Uromyces et de la moisissure non déterminée. Seuls deux cas sur cinq de paraplé-
gie postérieure sont enregistrés chez les souris nourries du riz contaminé avec
le complexe.
Par contre, le bouillon de culture de l’bsperzillus Ochraceus a permis
d’enregistrer 14 morts sur 15 souris abreuvées par suite de syndrome paraplégique
caractérisé par le tableau clinique suivant :
. p o i l s herissés
. paresse
. position du chien assis
. perte partielle de sensibilité, incoordination motrice,
. déplacment en traînée, perte totale de sensibilité des membres postérieur
ou antérieurs selon le cas
. paralysie complète, _ mort au bout de 18 à 35 heures après l’apparition
des symptômes.
Un seul cas de paralysie antérieure sur 14 a été noté.
11 est à signaler que la seule sour i s %ravide a fait un avortement au stade
de paraplégie totale.
D 1 S C U S S 1 0 N
===================
Comme il ressort des résultats, les fanes d’arachide mangées par les
moutons morts de paraplégie ont été fortement contaminées par des champignons
parmi lesquels
E n e f f e t , il a été mis en évidence que l’intoxication des agneaux par cet
Aspergillus provoque une paralysie chez Les animaux (1,.
Ce même champignon,par l’une des toxines qu’il secrète, provoque le même
s y n d r o m e Paraly[tique c h e z l e s s o u r i s a d u l t e s . 3
Il faut dire qu;^le syndrome paraly tique tel qu’il est observé peut être
:
d ’ é t i o l o g i e d i f f é r e n t e : , , L’lhypothèse q u ’ i l s e r a i t t r è s i m p o r t a n t d e v é r i f i e r e s t
:
l e d é f i c i t e n v i t a m i n e Bl c a r l ’ e s s a i t h é r a p e u t i q u e p a r i n j e c t i o n d e c e t t e
ne à des malades a permis d’obtenir des cas de guérison en Casamance comme au
Laboratoire.
,
C e t t e avitam&se
~ peut être l%~d ou parfaction de substances ou
!
de bactéries thiaminolytiques ingérées par l’animal ou par inhibition par d’autres1
substances .
de la microflore responsable de la synthèse de la vitamine
1
Bl dans le rumen.
La paraplégie murine reproduite IA ~JU kc~ I- WVWrappelle celle observée par
STARON, ALLAR et collaborateur après injection par
deuxième substance toxique qu’ils ont purifiéeà partir
d e c u l t u r e d ’ u n A s p e r g i l l u s O c h r a c e u s . [- 3 )
AGRICOLES (I.S.R.A.)
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LABORATOIRE NATIONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
PARAPLEGIE DU MOUTON DJALLONKE :
\\
REF. 26/VIRO
FEVRIER 1985
.
PARAPLEGIE DU MOUTON DJALLONKR :
l&w-mM- ty-Qhwi~*~ti~~-
A. NIASSE*, Y. LEFORBAN*,
M. THIOUNE*,
M. SOUANE**
INTRODUCTION
La paraplegie du mouton Djallonké, syndrome ataxique
atteignant les ovins
des deux sexes et de tout âge se caractérise par une paralysie progressive des
membres sans autres symptômes associés et évolue vers la mort en 3 à 15 jours.
Parmi les
hypothèses émises(ipour en préciser l'étiologie, celle de la
mycotoxicologie a retenu particulièrement notre attention.
La presente note a pour objet de rapporter les résultats des travaux
d'isolement de culture et
. d'expérimentation de certaines souches
sur des souris blanches adultes. Toute cette flore fonpique provenant de reste
de fane d'arachide mang6e par des moutons Djallonke morts de pa:plégie.
MATERIEL ET METHODE
Matériel
- Reste de fane d'arachide mangiZe par des moutons morts de paraplégie
- Milieux d'isolement et de culture pour moisissure ','
- Milieu spécial de culture pour Ochraceus
- Milieu de dispersion : eau gelosée à l%,
- Souris blanches adultes
Méthode
Préparation de l'échantillon de paille d'arachide
- Un échant?llon d'un kg de paille d'arachide est broyé finement dans
des pots flambés à l'alcool du broyeur Waring Blendor.
- 10 g de cette poudre sont mis en suspension dans 90 ml d'eau gélosée
stérile dans une f?ole Erlen Meyer de 500 ml contenant des billes de verre pour
obtenir une suspension mère à 10 %.
Burelli.
X chercheurs au LNERV
/
. . . . . .
R chercheur à 1'ITA
- 2 -
- Une série de dilutions allant de 10 -2 ‘3 10 -5 dans de l’eau gélosée
s t é r i l e .@A-\\3 ~,Q+J
ht’ $
ans des tubes 3 essai stériles.
Isolement et denombrement des microorganismes
Dans des boîtes de Pétri stériles, on place 1 ml de chaque dilution puis
on y coule un des milieux de cultures yM, yMS ou PCA maintenus en surfusion à
40°C au plus. Le mélange inoculium-milieu est obtenu par agitation des boîtes en
décrivant des 8 avant solidification du milieu. Les boîtes sont ensuite incubées
à la température du Laboratoire jusqu’à développement des colonies.
Culture en masse de champignons sur riz
L’Aspergillus Flavipes, le Fusarium, l’Uromyces, la moisissure non déter-
minée et le complexe (poudre de fane d’arachide mère) sont mis en culture sur
riz comme suit :
Le riz Uncle Benz est stéril isé dans de l’eau distillée à raison de 200 g
pour 400 ml 3 l’autoclave.
Après refroidissement et contrôle de la stérilité, l’ensemenc< lent est
effectué par attouchement. L’incubation est faite à la température ordinaire du
Laboratoire (25°C) pendant un mois.
La récolte est faite par séchage du riz contaminé qui est moulu par la
suite.
Culture en bouillon de l’dspergillus Ochraceus
De toutes les moisissures isol6es, seul 1’Aspergillus Ochraceus a été mis
ia
en culture en bouillon. Une parcelle
dqculture pure sur yMS est mise
en suspension dans le bouillon en Erlewnayer avec barreau magnétique.
Une agitation parmanente oxigénant la culture est obtenue sur agitateur en 1
température ordinaire de Laboratoire.
La culture est jugée bonne quand le milieu, préalablement incolore vire 3.
l ’ o c r e .
. . /. .**
t
-3-
Inoculation aux souris
a) - Poudre de riz
___-----_----
La poudre de riz contamina, mélangé aux alimentas est donnée à manger
aux souris à raison de 10 g/j par 10 souris pendant 10 jours.
b) - Bouillon d'A.sEerPillus Ochraceus
___- --------- --'Q.-----,-----,--,
Les souris adultes d'Épreuve au nombre de 15 et réparties en 3 groupes
recoivent per os dans l'eau de boisson le bouillon de culture de 1'Aspergillus
Ochraceus à raison de 1,5 ml par souris et par jour nendant 10 jours.
Les témoins recoivent la même eau de boisson sans le bouillon.
R E S U L T A T S
=z=z=======x=====
Microflore isolé
Dikombrement
: 11 a été dénombré 24 colonies de levure et 220 colonies de flore
-3
fongique dont 200 de moisissure sur le milieu yMS à la dilution ï-0
. Sur les--
autres milieux, un envahissement par des espèces à croissance très rapide du fait
de l'absence de pression osmotique a pêne le comptage.
Espèces isolées
En plus d'une moisissure non déterminGe,
les espèces suivantes ont été
mises en évidence :
1 - Aspergillus Niger
2 - Aspergillus Flavus' (groupe)
3- Fusarium oxysporum
4 - Aspergillus Ochraceus
5 - Uromyces spp
;; ;wg-ypPys+
8 - Syncephalostrum sp.
. . /. .,,
- 4 -
9 - Paec yl.omyces s p
10 - Penysil lium sp (biverticillf symetrique)
1 1 - hspergillus Amstallodami
TEST IN VIVO
11 n’a pas été not& de symptômes pouvant intéresser le syndrome paraplégi-
que dans les cas des champignons Asperzillus Flavipes, Fusarium oxysporum,
Uromyces et de la moisissure non déterminée. Seuls deux cas sur cinq de paraplé-
gie postérieure sont enregistrés chez les souris nourries du riz contaminé avec
le complexe.
Par contre, le bouillon de culture de l’bsperzillus Ochraceus a permis
d’enregistrer 14 morts sur 15 souris abreuvées par suite de syndrome paraplégique
caractérisé par le tableau clinique suivant :
. p o i l s herissés
. paresse
. position du chien assis
. perte partielle de sensibilité, incoordination motrice,
. déplacment en traînée, perte totale de sensibilité des membres postérieur
ou antérieurs selon le cas
. paralysie complète, _ mort au bout de 18 à 35 heures après l’apparition
des symptômes.
Un seul cas de paralysie antérieure sur 14 a été noté.
11 est à signaler que la seule sour i s %ravide a fait un avortement au stade
de paraplégie totale.
D 1 S C U S S 1 0 N
===================
Comme il ressort des résultats, les fanes d’arachide mangées par les
moutons morts de paraplégie ont été fortement contaminées par des champignons
parmi lesquels
E n e f f e t , il a été mis en évidence que l’intoxication des agneaux par cet
Aspergillus provoque une paralysie chez Les animaux (1,.
Ce même champignon,par l’une des toxines qu’il secrète, provoque le même
s y n d r o m e Paraly[tique c h e z l e s s o u r i s a d u l t e s . 3
Il faut dire qu;^le syndrome paraly tique tel qu’il est observé peut être
:
d ’ é t i o l o g i e d i f f é r e n t e : , , L’lhypothèse q u ’ i l s e r a i t t r è s i m p o r t a n t d e v é r i f i e r e s t
:
l e d é f i c i t e n v i t a m i n e Bl c a r l ’ e s s a i t h é r a p e u t i q u e p a r i n j e c t i o n d e c e t t e
ne à des malades a permis d’obtenir des cas de guérison en Casamance comme au
Laboratoire.
,
C e t t e avitam&se
~ peut être l%~d ou parfaction de substances ou
!
de bactéries thiaminolytiques ingérées par l’animal ou par inhibition par d’autres1
substances .
de la microflore responsable de la synthèse de la vitamine
1
Bl dans le rumen.
La paraplégie murine reproduite IA ~JU kc~ I- WVWrappelle celle observée par
STARON, ALLAR et collaborateur après injection par
deuxième substance toxique qu’ils ont purifiéeà partir
d e c u l t u r e d ’ u n A s p e r g i l l u s O c h r a c e u s . [- 3 )