. COLLOQUE SUR L'ELEVAGE ORGANISE PAR L'0.C.A.M. ...
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COLLOQUE SUR L'ELEVAGE ORGANISE PAR L'0.C.A.M.
FORT-LAMY - DECEMBRE 1969
LA VACCINATION CONTRE LA PESTE EQUINE
A L'AIDE D'UN VACCIN MONOVALENT INACTIVE
par P.BOURDIN, M.RIOCHE et A.LAURENT
RESUME SUCCINCT
La souche virale utilisÉc appartient PLI type IX et est originaire
d'Iran où elle a été modifiee par 102 passages sur cerveau de souris. Après
adaptation à une lignée cellulaire de rein de singe (la lignée MS), elle
atteint au 3ème passage un titre de 107 DI 50 CT ml. L'inactivation est
faite par le formol à 1 p.4000, le mélnnge étant agité 48 heures à la tem-
pérature de 37OC. Le vaccin est ensuite refroidi à OOC et on ajoute de la
béta-propiolactone à 0,2 p.1000; le mélange est agité 24 heures à cette tem-
pérature. L'inactivation est contrôlée par injection intracérébrale à la
souris. L'introduction d'un adjuvant huileux ou aluminé termine la préparation.
Le vaccin injecté à la dose de 5 ml à six chevaux sensibles, impor-
tés de France, et vivant sous moustiquaire, provoque l'apparition d'anticorps
neutrnlisonts qui disparaissent vers le 30ème jour. Une injection de rappel,
pratiquée un mois après, détermine une rapide remontée du taux d'anticorps.
Les animaux sont soumis, deux par deux, ci une épreuve sévère au mayen d'une
souche virulente d'origine marocaine, a 45 jours, 8 mois et 15 mois. Les
deux animaux éprouvés le 15ème mois o*yant Et& mis en libert6 è partir du
12ème mois, la possibilit6 d'une infection naturelle n'est cependant pas
exclue.
Laboratoire national de 1'Elevage et de
Recherches vGtérinaires du Sénégal - Dakar
(I.E.M.V.T.)
COLLOQUE SUR L'ELEVAGE ORGANISE PAR L'0.C.A.M.
FORT-LAMY
- DECEMBRE 1969
LA VACCINATION CONTRE L-A PESTE EQUINE A L'AIDE
D'UN VACCIN MONOVALENT INACTIVE
par
P. BOURDIN, M, AIOCHE et A. LAURENT
w---w
Cette maladie a Eté reconnue au Sér$al et au Soudan dès le
19ème siècle. Depuis, elle a étE décrite plusieurs fois sous les noms soit
de fièvre pernicieuse, soit de typhomalaria.
A Dakar, elle sEvit presque chaque année (Mornet) (1949) en
particulier à la saison chaude et humide. Son intensite suit le rythme des
importations de chevaux de France ou d'Afrique du Nord. Son existence est
signalée Egalement dans les pays d'Afrique Centrale : au Congo-Brazzaville
(C urasson, 1942), au Tchad (Doutre et Leclercq, 1961) et (Provost et
Maurice 1967).
Depuis 1955, le Labora,toire de Dakar préparait sur cerveau
de souris un vaccin polyvalent vivant, selon la technique mise au point par
Alexander, Neitz et Dutoit (I935). Ce vaccin était surtout utilisé pour
les chevaux importes par les formations de cavalerie, les cercles hippiques
et les haras, il a permis de rGduixe la maladie B de rares cas épisodiques,
L'importance de la peste équine en Afrique du Nord, son appari-
tion dans le Sud espagnol en 1966, en ontfaitlune menace pour 1lEurope
et en particulier pour la France. Aussi, le Laboratoire de Dakar a-t-il
prépare un stock de vaccin vivant modifii! monovalent de type 9 sur lignée
cellulaire de rein de singe. Son inactivation (int&ressant les pays indemnes)
et les résultats partiels de l'immunisation confgrée par ce vaccin ont été
d5crita par Bourdin et Monnier-Cambos (1967). Il sera ici fait mention des
résultats finaux de l'expérience.
1 - MATERIEL ET METHDDES
a - Virus
Le virus est In souche neurotrope S2 modifiée par 102 passages
sur cerveaux de souris, aimablement fournie par l'Institut Razi de TEhéran.
Mirchamsi et Taslimi (1964) d'une part, Ozawa et Nazrati d'autre part
(1967), l'ont adapté à la lignée cellulaire MS.
./.
b - S o u c h e s c e l l u l a i r e s
Cette 1ignEe de cellules de rein de singe adulte (MS) a EtE établis
par Kanda et Me3Azk(I959).
c - M i l i e u
L e m i l i e u u t i l i s e e s t u n m i l i e u d e Earle d6rivé d e c e l u i d e J o h n s o n
(1962) et enrichi d’acides amines et de vitamines.
d- I n o c u l a t i o n
La suspension cellulaire est Spertic en boîtes de Roux à raison
de 100 ml par boite et 200.000 cellules par millilitre. Le virus lyophilisé
est reconstitué et inoculG (2 ml par boîte).
Le tapis cellulaire est complet en 30 heures. L’effet cytopathique
débute au bout de 48 heures de culture et atteint 90 p. 100 du tapis en
3 jours. La suspension virulente est alors récnltée, centrifugée et conservée
à 74%. Elle titre de 10 7,l a 10 7,s DICT 50/ml.
f- Inactivation du vaccin
Le vaccin est inactivé par le formol et le beta-propiolectone
respectivement à raison de 1 p.4.000 et 0,2 p* 1.000. Il est maintenu à plus
4OC p o u r s a c o n s e r v a t i o n e t s o n p H e s t ajustb à 7 avec d u b i c a r b o n a t e d e
soude. Llinactivation est verifiée par injection intrac6rébrale à la souris
de 2 mois,
g- Préparation du vaccin inactive
Le vaccin a étE pr&parb sous deux formes :
.. Vaccin mélange à parties égales avec du gel d’alijmine à 1 p.100
de matiare sèche.
- vaccin m&langé a parties égales avec un adjuvant huileux CI base
d’huile de paraffine et d'Arcace1.
h- T e s t d e contr8le séroloqique
Le sérum des animaux Vaccin&s est titré par sÉro-neutralisation
a sérum constant virus variable, effectué sur cellules MS. La lecture se
fait du 4ème au 9ème jour. Les Asultzts exprimes en logarithmes représentent
l ’ i n d e x d e n e u t r a l i s a t i o n . C’est la diff6rence de titre entre le serum à
analyser et le sérum t6moin. (sans anticorps).
./.
.1 - Vaccination
Le contrale sExologique a d'abord été fait sur des Qnes achet6s
localemtint, ce qui a permis de constater la mon-tee des anticorps. Six
chevaux sensibles de France ont Qtt: vaccinés par voie sous-cutanée avec
5 ml de vaccin inactivé, 3 avec le vaccin alumit-6, 3 avec le vaccin huileux.
Aucune rboction clinique n'a étE remnrquee.
j- Epreuve
La souche d'Épreuve a étt:. fournie par l’Institut Pasteur de Casa-
blanca. Elle a subi trois passages sur cerveaux de souris et a été inoculee
par voie intraveineuse aux chevaux & raison de 2 ml par animal.
II - RESULTATS
Ces résultats, consignes dans le graphique ci-joint, sont
semblables quel que soit le vaccin utilisé
: on note une augmentation de
l’index de neutralisation au bout de 8 jours, un maximum B 15 jours, une
diminution jusqu’au 30ème jour. Le rappel de 5 ml, permet d'observer une
remontée de l'index qui se maintient en plateau pendant 12 mois, Les
anticorps décroissent progressivement du 13ème au ISème mois, seuls résul-
tats v6rifies.
Il y a eu trois Epreuves, l’une effectuÉe sur deux animaux 45
jours après la vaccination et au d6but du printemps a Uté très bien suppor-
tée, la seconde huit mois après la vaccination sur deux autres chevaux a
donne les mêmes résultats ; enfin la troisième, 15 mois après en début de
saison chaude n’a pas provoqui: non plus de réaction. Il est à prkiser que
les animaux ont pu &tre réinfectés, car ils vivaient depuis trois mois
sans moustiquaires.
./.
-=4-
DISCUSSION
D'après Mirchamsi et Taslimi (1968) un vaccin monovalent
prépar à partir du virus de la souche ncurotropa de type 9, cultivé sur
lignée cellulaire de rein de singe prot&ge les chevaux pendant au moins
6 mois à condition de faire un rappel au bout de quatre semaines, Les
r6eultats obtenus ci-dessus permettent de porter ce dÉlai à un an,
Il est Bgnlement raisonnable de penser que des animaux sensibles ayant
surv&cu d’une port à une épreuve sevère, d'autre part à la saison des
pluies p6riode dangereuse pour les chevaux neufs, sont aptes à résister
grflce à ce vaccin aux conditions habituelles de vie au Sbnégal,
Travail du Laboratoire National de lIElevage
et de Recherches Vktérinaires
du SénEgal 0 DAKiiR-HANN
I.E.M.V.T.
BIBLIOGRAPHIE
- ALEXANDER (R,A,), NEITZ (N.O.) et IIU TOIT (P.J.) - Horsesickness immunization
of horses and mules in the filed during the season 1934-1935
with a description of the technique of preparation of polyvalent
mouse neurotropic vaccine. Onderstepport, J,, 1936, I, 17-30.
- BOURDIN (P,) et MONNIER - CAMBON ((J.) (1967) - Note préliminaire sur l'em-
ploi d'un vaccin inactivé contre la peste équine - Bull.Acad,
vét., 40, 187-191.
- CURASSON (G.) 1942) - Traite de pathologie exotique vétérinaire et comparée,
2ème édition, I, 170-207.
- DOUTRE (M.P.) et LECLERC4 (A.) (1962) - Existence du type 9 du virus de la
peste équine au Tchad '- Rev. Elev. Med, vét. Pays Trop,, 2,
241-245.
- KANDA (Y.) et MELNICK (J.L.) (1959) - In vitro differentiation af virulent
and attenuated polioviruses by their growth characteristics on
MS cells.- H.exp.Med., Iog_, 9-24.
- MAURICE (Y.) et PROVOST (A.) ( 1967) - La peste équinc à type 9 en Afrique
centrale. Enquête sérologique.-
Rev. Elev. MEd. Vét. Pays Trop'
20,
S-20.
- MIRCHAMSY (H.) et TASLIMI (H.) (1964) - Immunization against African Horse-
sickness virus by the fluorescent antibody technique. Immunology
(Cambridge), 1, 213-218.
- MIRCHAMSY (H.) et TASLIMI (H.) (1964) - Attempts to vaccina-te foals with
living tissue culture-adapted horsosickness virus.- Bull,off,
Int. Epiz., 62, 911-921.
- MIRCHAMSY (H,) et TASLIMI (H.) (1968.1 Inactivated African horsesickness
ce11 culture vaccine- Immunology, g, 81-88.
- MORNET (P.) (1949) - Sur une Bvolution otypique de la peste équine particu-
lièrer.*ent à 1'A.O.F. - Rcv. Elev. Méd, Vet. Pays Trop. 2,
101-103.
-..-
COLLOQUE SUR L'ELEVAGE ORGANISE PAR L'0.C.A.M.
FORT-LAMY - DECEMBRE 1969
LA VACCINATION CONTRE LA PESTE EQUINE
A L'AIDE D'UN VACCIN MONOVALENT INACTIVE
par P.BOURDIN, M.RIOCHE et A.LAURENT
RESUME SUCCINCT
La souche virale utilisÉc appartient PLI type IX et est originaire
d'Iran où elle a été modifiee par 102 passages sur cerveau de souris. Après
adaptation à une lignée cellulaire de rein de singe (la lignée MS), elle
atteint au 3ème passage un titre de 107 DI 50 CT ml. L'inactivation est
faite par le formol à 1 p.4000, le mélnnge étant agité 48 heures à la tem-
pérature de 37OC. Le vaccin est ensuite refroidi à OOC et on ajoute de la
béta-propiolactone à 0,2 p.1000; le mélange est agité 24 heures à cette tem-
pérature. L'inactivation est contrôlée par injection intracérébrale à la
souris. L'introduction d'un adjuvant huileux ou aluminé termine la préparation.
Le vaccin injecté à la dose de 5 ml à six chevaux sensibles, impor-
tés de France, et vivant sous moustiquaire, provoque l'apparition d'anticorps
neutrnlisonts qui disparaissent vers le 30ème jour. Une injection de rappel,
pratiquée un mois après, détermine une rapide remontée du taux d'anticorps.
Les animaux sont soumis, deux par deux, ci une épreuve sévère au mayen d'une
souche virulente d'origine marocaine, a 45 jours, 8 mois et 15 mois. Les
deux animaux éprouvés le 15ème mois o*yant Et& mis en libert6 è partir du
12ème mois, la possibilit6 d'une infection naturelle n'est cependant pas
exclue.
Laboratoire national de 1'Elevage et de
Recherches vGtérinaires du Sénégal - Dakar
(I.E.M.V.T.)
COLLOQUE SUR L'ELEVAGE ORGANISE PAR L'0.C.A.M.
FORT-LAMY
- DECEMBRE 1969
LA VACCINATION CONTRE L-A PESTE EQUINE A L'AIDE
D'UN VACCIN MONOVALENT INACTIVE
par
P. BOURDIN, M, AIOCHE et A. LAURENT
w---w
Cette maladie a Eté reconnue au Sér$al et au Soudan dès le
19ème siècle. Depuis, elle a étE décrite plusieurs fois sous les noms soit
de fièvre pernicieuse, soit de typhomalaria.
A Dakar, elle sEvit presque chaque année (Mornet) (1949) en
particulier à la saison chaude et humide. Son intensite suit le rythme des
importations de chevaux de France ou d'Afrique du Nord. Son existence est
signalée Egalement dans les pays d'Afrique Centrale : au Congo-Brazzaville
(C urasson, 1942), au Tchad (Doutre et Leclercq, 1961) et (Provost et
Maurice 1967).
Depuis 1955, le Labora,toire de Dakar préparait sur cerveau
de souris un vaccin polyvalent vivant, selon la technique mise au point par
Alexander, Neitz et Dutoit (I935). Ce vaccin était surtout utilisé pour
les chevaux importes par les formations de cavalerie, les cercles hippiques
et les haras, il a permis de rGduixe la maladie B de rares cas épisodiques,
L'importance de la peste équine en Afrique du Nord, son appari-
tion dans le Sud espagnol en 1966, en ontfaitlune menace pour 1lEurope
et en particulier pour la France. Aussi, le Laboratoire de Dakar a-t-il
prépare un stock de vaccin vivant modifii! monovalent de type 9 sur lignée
cellulaire de rein de singe. Son inactivation (int&ressant les pays indemnes)
et les résultats partiels de l'immunisation confgrée par ce vaccin ont été
d5crita par Bourdin et Monnier-Cambos (1967). Il sera ici fait mention des
résultats finaux de l'expérience.
1 - MATERIEL ET METHDDES
a - Virus
Le virus est In souche neurotrope S2 modifiée par 102 passages
sur cerveaux de souris, aimablement fournie par l'Institut Razi de TEhéran.
Mirchamsi et Taslimi (1964) d'une part, Ozawa et Nazrati d'autre part
(1967), l'ont adapté à la lignée cellulaire MS.
./.
b - S o u c h e s c e l l u l a i r e s
Cette 1ignEe de cellules de rein de singe adulte (MS) a EtE établis
par Kanda et Me3Azk(I959).
c - M i l i e u
L e m i l i e u u t i l i s e e s t u n m i l i e u d e Earle d6rivé d e c e l u i d e J o h n s o n
(1962) et enrichi d’acides amines et de vitamines.
d- I n o c u l a t i o n
La suspension cellulaire est Spertic en boîtes de Roux à raison
de 100 ml par boite et 200.000 cellules par millilitre. Le virus lyophilisé
est reconstitué et inoculG (2 ml par boîte).
Le tapis cellulaire est complet en 30 heures. L’effet cytopathique
débute au bout de 48 heures de culture et atteint 90 p. 100 du tapis en
3 jours. La suspension virulente est alors récnltée, centrifugée et conservée
à 74%. Elle titre de 10 7,l a 10 7,s DICT 50/ml.
f- Inactivation du vaccin
Le vaccin est inactivé par le formol et le beta-propiolectone
respectivement à raison de 1 p.4.000 et 0,2 p* 1.000. Il est maintenu à plus
4OC p o u r s a c o n s e r v a t i o n e t s o n p H e s t ajustb à 7 avec d u b i c a r b o n a t e d e
soude. Llinactivation est verifiée par injection intrac6rébrale à la souris
de 2 mois,
g- Préparation du vaccin inactive
Le vaccin a étE pr&parb sous deux formes :
.. Vaccin mélange à parties égales avec du gel d’alijmine à 1 p.100
de matiare sèche.
- vaccin m&langé a parties égales avec un adjuvant huileux CI base
d’huile de paraffine et d'Arcace1.
h- T e s t d e contr8le séroloqique
Le sérum des animaux Vaccin&s est titré par sÉro-neutralisation
a sérum constant virus variable, effectué sur cellules MS. La lecture se
fait du 4ème au 9ème jour. Les Asultzts exprimes en logarithmes représentent
l ’ i n d e x d e n e u t r a l i s a t i o n . C’est la diff6rence de titre entre le serum à
analyser et le sérum t6moin. (sans anticorps).
./.
.1 - Vaccination
Le contrale sExologique a d'abord été fait sur des Qnes achet6s
localemtint, ce qui a permis de constater la mon-tee des anticorps. Six
chevaux sensibles de France ont Qtt: vaccinés par voie sous-cutanée avec
5 ml de vaccin inactivé, 3 avec le vaccin alumit-6, 3 avec le vaccin huileux.
Aucune rboction clinique n'a étE remnrquee.
j- Epreuve
La souche d'Épreuve a étt:. fournie par l’Institut Pasteur de Casa-
blanca. Elle a subi trois passages sur cerveaux de souris et a été inoculee
par voie intraveineuse aux chevaux & raison de 2 ml par animal.
II - RESULTATS
Ces résultats, consignes dans le graphique ci-joint, sont
semblables quel que soit le vaccin utilisé
: on note une augmentation de
l’index de neutralisation au bout de 8 jours, un maximum B 15 jours, une
diminution jusqu’au 30ème jour. Le rappel de 5 ml, permet d'observer une
remontée de l'index qui se maintient en plateau pendant 12 mois, Les
anticorps décroissent progressivement du 13ème au ISème mois, seuls résul-
tats v6rifies.
Il y a eu trois Epreuves, l’une effectuÉe sur deux animaux 45
jours après la vaccination et au d6but du printemps a Uté très bien suppor-
tée, la seconde huit mois après la vaccination sur deux autres chevaux a
donne les mêmes résultats ; enfin la troisième, 15 mois après en début de
saison chaude n’a pas provoqui: non plus de réaction. Il est à prkiser que
les animaux ont pu &tre réinfectés, car ils vivaient depuis trois mois
sans moustiquaires.
./.
-=4-
DISCUSSION
D'après Mirchamsi et Taslimi (1968) un vaccin monovalent
prépar à partir du virus de la souche ncurotropa de type 9, cultivé sur
lignée cellulaire de rein de singe prot&ge les chevaux pendant au moins
6 mois à condition de faire un rappel au bout de quatre semaines, Les
r6eultats obtenus ci-dessus permettent de porter ce dÉlai à un an,
Il est Bgnlement raisonnable de penser que des animaux sensibles ayant
surv&cu d’une port à une épreuve sevère, d'autre part à la saison des
pluies p6riode dangereuse pour les chevaux neufs, sont aptes à résister
grflce à ce vaccin aux conditions habituelles de vie au Sbnégal,
Travail du Laboratoire National de lIElevage
et de Recherches Vktérinaires
du SénEgal 0 DAKiiR-HANN
I.E.M.V.T.
BIBLIOGRAPHIE
- ALEXANDER (R,A,), NEITZ (N.O.) et IIU TOIT (P.J.) - Horsesickness immunization
of horses and mules in the filed during the season 1934-1935
with a description of the technique of preparation of polyvalent
mouse neurotropic vaccine. Onderstepport, J,, 1936, I, 17-30.
- BOURDIN (P,) et MONNIER - CAMBON ((J.) (1967) - Note préliminaire sur l'em-
ploi d'un vaccin inactivé contre la peste équine - Bull.Acad,
vét., 40, 187-191.
- CURASSON (G.) 1942) - Traite de pathologie exotique vétérinaire et comparée,
2ème édition, I, 170-207.
- DOUTRE (M.P.) et LECLERC4 (A.) (1962) - Existence du type 9 du virus de la
peste équine au Tchad '- Rev. Elev. Med, vét. Pays Trop,, 2,
241-245.
- KANDA (Y.) et MELNICK (J.L.) (1959) - In vitro differentiation af virulent
and attenuated polioviruses by their growth characteristics on
MS cells.- H.exp.Med., Iog_, 9-24.
- MAURICE (Y.) et PROVOST (A.) ( 1967) - La peste équinc à type 9 en Afrique
centrale. Enquête sérologique.-
Rev. Elev. MEd. Vét. Pays Trop'
20,
S-20.
- MIRCHAMSY (H.) et TASLIMI (H.) (1964) - Immunization against African Horse-
sickness virus by the fluorescent antibody technique. Immunology
(Cambridge), 1, 213-218.
- MIRCHAMSY (H.) et TASLIMI (H.) (1964) - Attempts to vaccina-te foals with
living tissue culture-adapted horsosickness virus.- Bull,off,
Int. Epiz., 62, 911-921.
- MIRCHAMSY (H,) et TASLIMI (H.) (1968.1 Inactivated African horsesickness
ce11 culture vaccine- Immunology, g, 81-88.
- MORNET (P.) (1949) - Sur une Bvolution otypique de la peste équine particu-
lièrer.*ent à 1'A.O.F. - Rcv. Elev. Méd, Vet. Pays Trop. 2,
101-103.
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