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REFURL 1 QUE Dl1 SENEGAL
----e--m-”
Mi Il i STERE DE LA RECHERCHE
SCIENTIFIQUE ET TECHNIQUE
- w - - - - - w - - -
INSTITUT SENEGALAIS !IIE RECHERCHES
AGRICOLES (1 ..S.R.A.l
- - - - - w - - B - - -
. LAPOR4TCI RE NATIONAL !JE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
R A P P O R T D E S T A G E
DE FORMAT t Oi’! COMP’LEMENTA I RE EFFECTUE AU C I PEA
( C E N T R E INTEHNPTIONAL
P O U R L!ELEVAGE EN AFE?IQUE)
D U 1 0 A O U T A U 2 6 N O V E M B R E 1 9 8 3
P a r S a f iétou T o u r é F A L L
REF.NO1O1/PHYSlO,
DECEMSRE 1 9 8 3 .
RAPPORT DE STAGE
DE FORMATION COMPLE~!ENTAIQE EFFECTUE AU ClpEA
(CENTRE INTERNATlOYAL POlIri L'ELEVAGE EN AFRIQUE)
DU ?O F\\OUT AU 26 YOVEMBRE 1983
Par Sa+iBfou Touré FALL
Ou I!i août au 26 novembre 1383, nos activités ont port6 a~ CIPEA sur :
1) t'analyse des constituants grossiers des fourrages pour les techniques de
Van Soast : Acid detergent fiber (ADF), Neutral detsrgent fibert CI%F),
Ilgnine, silice, cellulose et hémicelluloses.
2) L'étude comparative de quatre m6thodes de d6termination de la digestibi-
lité des fourrages in vitro :
- la m&hode de Tilley et Terry
- la mkthode des sachets nylon
- la méthode de la pepsine cellulase
- la m&thode de Tiiley et Tarry modlff& par Van Soest et 13 méthode
dvestimation de la digestibilité par I'Aquation sommstive de Van Soesf.
3) L'extraction pt I 'identification des tanins.
4) A la section informatique, nous avons pu traiter une partie des donnCses
du programme alimentation du bétail tropical.
5) Du 19 stiptembre au 8 octobre 1383, nous avons participé au cours sur la
nutrition anima la et l'évaluation de la valwr alimenta iro des fourrages,
organfs6 par le CIPEA.
. . . / . . .
- 2
l - ANALYSE DES CQMTITUA!JTS GROSSIERS DES FOURRACES PAP LES TECHNIQUES
D
E
Vnti SO!%T
fNGKX.IUCTION
tâ cellule v&$-fale est compo&e de la rrembrane ce~ialaire et feS élhments
intracel l u t a i r e s , c ’ e s t - à - d i r e : le noyau, le cytoplasme et lss autres inclu-
slons cytoplasmiqu9s.
Les elements intrscellulaîres sont en grande partie cons-hi illÉS de SUbS-
tances nutritives solubles : les Iipoprotéines et les hydrates de carbone.'
Ce contenu cellulaire est digestible à 98 pour cent environ'
~a paroi cellulaire constitue un mur ccmpose de cellutose, ~qhemIcellulose,
de lignine, de substances pectlques, de silices et de tanins 6 faible pour-
centage.
Les liaisons entre ces élements sont trk solides et cela constitue un
facteur Iimitant de la digestibilit6 des fourrages, La d&termina,tion de la
cellulose par une doubio hydrolyse acide et basique ne rend pas compte pre-
cisément de ta teneur des fourrages en cet Clément
; par Iv mke processus
L'h6micetlulose est hydrolyse en partie. Elle ne r-nd pas conpto aussi de la
quantitb total e de fibres compos.ant;is
de la paroi cellulaire,
C'est cet approche analytique des composantes de JR paroi csllulairn qui
justifie i'utilisation des détergents acides et neutres dans les techniques
de Van Socst pour la d&t-ermination globale o-t differencI& des constituants
pat-ihtaux de 13 cellule végétale.
Le traitement d'une prise d'essai au détergent neutre suivi d'une minera-
îisation donne le NDF "neutrol dstergent fiber" qui représente ] 'ensemble
des constituants pariétaux de la cel(ule v6gAtale. 11 a une correlation n,+a-
tlve avec la digestibilité.
La prise dvessai, trait6e au d&i'ergent acidie, donne l'ADF, c'est-à-dire
"l'acide detergen-t flber" qui représente t'ensemble des constituants membra-
naires diminue de t'hémicellulose. Cvest en faite la iiqno-ceiiutose et la
sllke. La @terminal-ion de I'ADF est une étape préparatoire pour te dosage
de 12) lignine dans les fourrages. En effet, les résidus de 1'4DF traités avec
l’acide sulfurique 72 p.100, puis m inéralisé donne la teneur en 1 ignine.
. . /
. l . .
- 3
La silice représente les cendres insolubles dans l'acide hydromique.
Le plan de r%termlnîtTon des 6l&ments grossiers dôs fourr3~es est
r&wnl par le sch&ma n'l.
Schéma 1
D&ix wtt acide
ion
Cellulose
~ OF
Ltgnine
1 Silice
H?miccllulose
\\
Lignine
Silice
4
- 4
TECHNlQiiES C)PERATO1RES
1 - NDl= : "NOtitraI detergent flhar"
Cs.& une rcéthode raptdc d 3 dkfwml nation de I'ensembls de la parol
cellulaire. Elle permet donc par cc>nsGqucnt de d&krmtner 15s. substances
solubles presque tctalement disponibles pour l'assimilailon.
L3 prise d?essai est trait& pendant 1 heure au d&-erq2nt neutrs 3 chaud.
Le rgsidu est filtré, lavé, séch6 puis minéralisé.
Le poids disparu après minéral isaticn est rapport6 S. 100 9.
Matériel
1 - Syçike ci'oxtractlon : CompOSé de six él6ments thermor&~leabl~ ineivlduel-
Isment et muni d'un condensateur
2- Système d;c! filtration 115 C: une pompe F vide
3- Creusets de Woch no1 ayant une capacit8 de 50 ml
4 - Eau chaude.
Réactif
1 - DQterr)cnt neutre
Lauryl sulfate de sodium .a.............*.*.....
30 (-7
EDTR sel dissodique
. . ..*.....**..............,.
15,61 9
F,orax
l . ..**..L..*......~...............*.*.*...
6,!31 g
Hydr~~6nophospha-te dissodique anhydre
. . . . . . . . . . 4,5h C-J
2-Ethoxyethanoi .*....*.., ........................
10 ml
Eau distillée .....................................
1 1.
Dans un bécher, mélanger le borax et I'EDTA, ajouter une ;>arti,: de l'eau
distlil6e et faire dissoudre en chauffant. Ajcuter le lauryl sulfate dc
sodium et le Z-ethoxyethanol.
Mettre le phosphate rlissodlnus dans 10 bécher,
ajouter de l'eau distill& et chauffer jusqu'à dIssolution. Mettrt! le reste
des inyrédicnts.
VBrificr et ajuster le pH qui doit être situé entre 6,9 et 7,l.
. ..L,.
- 5
2 - AcSione pur.
Mode op6ratolre
Peser 1 (3 du fourrage broyé ; mettre dans un bécher de 600 ml adaptable
au système de wflux. Ajouter 10 ml de d+tergent neutre. Porter à 6bullitton
:.< :
en 5 mn. Maintenir 2 ébuli i-l-ion constante pendant ? heure.
ProcBder à la filtration. Rincer 3 fois le bécher et Iv cr:+uset de
Gooch no1 contenant le résidu avsc de Ifeau chaude. Laver en dernier lieu
2 fois 3vec de l'acétone. SGkhw le creuset à I'kl-uve 19O'C pendant une nuit.
Peser le creuset contenant le &tdu..On pro&de~ensu[fe B la mfn&al isat[on
au four à 55°C.
t.jT)F = PI = p2
x 100
E
Pl
: Poids du creuset contenant le rtsidu npr8s sechage 2 I'ktuve
p2
: Poids du creuset contenant le résidu après nl&ralisation
E
: Prise d'essai.
2 - Détermination de I'ADF : Acide de-ter-gent fiber et de la tignine
Réactif
- ADS : Acid dwterpnt solution
Aclda sulfurique 1N ..‘.......C..,...,..
7 t
Cetyl trlmethyl amrnonium
bromide technique : CETAD ,....,........ 20 q
Dissoudra le CFTAB dans l'acide sulfurique.
- Acide sulfirique 72 p.100.
!Mode opératoire
Pour la d6terminotion de 1'4OF, la technique est identique à celle du
NDF. Apr&s traltemen t Z9 I'ADS, filtrer, laver, sécher a I'6tuvo et pes,er
soit Pl.
- 6
Après sechage à Iqétove,
le creuset contenant le rkidu est traite à
l'acide sutfurique 72 p~lQ0 pendant 3 heures. La prsparatlqn est remude twtes
les Flel:rfis P l'aide d'un agitateur.
Prochdilr ensuite au lavage avec dc l'eau
chauds et 2 la filtrati 0 n sous vide. Secher, peser : soit P-.
Yinkaliser le r6s du nu four à 550e pendant trcis hcwres, peser :
soit P3.
Caicui
*DF _ Pl - p3
x 100
P
PZ “‘PS
lignlne = P
x 100
ou P = prise d'essai
Pl
: poids du creuset sec apres traitement au l%S
p2
: poids du creuset sec aprk traitement à I'actde sulfurique 72 p.100
PS : poids du creuset aprks min&-alisation.
Détermination'de la silice
Les candres obtenus aprk inein~ration au four lors dFz. lu d6termination
de la iignine sent traités 3 l'acide hydrobromique 48 p.lM pendant 2 heures.
Filtrer avec une pompe A vide et laver le r6sidu ovcc de t'acdtone, sfcher,
min&aliser et peser : soit PI+.
Silice =
P4 - T x 100
E
T = tare du creuset
E z prise d'essai initiale.
Le plan de Van Soest offre un e méthodologie rapide et facile de détermi-
nation des pr incipaux constituants tnwbranaires de la ce Iluie v+.~~~-tûle (sauf
les tanins ei les substances pectiques qui sont prkents
dans des proportions
très faib\\osI,
II permet Ifétude des facteurs limitants de la digestibilit6 qui sont
lies h la composition des fourrages.
/
.*., . . .
,
-7
11 nous a @ix? donné I'occasi:~n
dgappliquer ce plan de d&erminaticn des
fibres pour six échantillons de fourra~tcs.
Tableau 1 : Wsultat en p.,lOO de matière skhe.
I
r
1
NumBre
Espèc.2 végéta I e
NDF p.100 ADF p.100 Lion!ne Cellulose sTii
HSmicel-
1
vraie
j
03 a f ulae
7370
Cenchrus cil taris
57,66
32,33
3,61
22,13
0,58'
25,3^
7371
Cynodon dactylzn
.
51,l
2S,46
4,ll
21,51
I
1
! %234
22,64
~-~
7372
Pennisetum sp.
.
13,69r--
46,71
8,21
36,6
3,901
24,38
7373
Chrysopogon aucheri.,
73,c)6
45,68
7,59
??!,53
7,56
27 3s
#-
I
73711
Chrysopogon ûuchcri..
75,70
50,16
t-3,69
33,85
/7,62
25,54
7579
I Lolium multiflorum..,
1
4386 1 22 45
9
/
1,50
1
19,22
11,731
30,61
P&~us effectuerons une comparaison de ces résultats avec ceux des tests
de digestibi!itG? que nous avons effcctu~ Tour voir si ce petit nombre
d'khantilion confirme la correlation nsgative entre NDF et digestibilith
dont fait état la biblioqraphie (181.
.,. / . . .
-8
II - ETUDE COMP&RhTlVE DE QUATRE METHXIES DvETUDE DE LA ?IGESTIRILlTt
19 VtTRO DES FOURR9GES
1 - fl3-hodologie d'analyse
Les technlaues de détermination in vitré de In di?estihilit& dc: la
matière s&che des fnurrages offrent I'avantaq,0 ti'?i-re nlus ra;;i$Aa quo la
m&khode des essais in vivo.
Leur principe est bas3 sur IF reproduction au Labor?+oire 4~s ccrditiws
ruminales.
~US avons travaill6 avec 19s mêmes &chantill!?ns avec ;11ffbrenlesm5thodes
Dow tester leur reproductibilits et Ier relations entre elles. i-es diffé-
rentes mkthodes utilisées sont :
- In mAthode double enzymntiqua : pepsine cellulsse
- la méthode des sach&s nylon
- la méthode de TII ley et Tcrry
- la méthode de Tillay et Terry modifi& par Van SZ&-.
1.3) La techniguP dcublê enzymatigue
--e------ ------------- --mm --
On fait subir à la prise d'essai un!? attaque successive de ,-!::ux enzymes :
la pepsine puis la cefiulase.
Les solutic.ns Utilis&es sont : 13 pepsine acide : 9,2 <.1XI et la sotu-
i!bn .A2 ccllulase : 1,5 9 de cnllulass dans 1 I di-: s3lulicn t.:!r:::-j::
d'ac6t~ta
de sodium.
ler stade :
La $echnique consiste 5 aJouter 10 ml de solution de pepsine ncide dans
un tube à essai contenant la prtse de OP1 9 de fourrsq,s.
Incuber le tube dans
un bain-marie à 40' pendant 45 heures en les wc;itant deux fois Far jour.
Qn centrifuge ensuite les tubes ot 6limine le surnageant. is r&idu est
Isv6 deux fcis avec de l'eau distillBe.
. . /. .*.
-9
28 stade :
l I consiste en ~'ad,.Joncticn
3e 10 ml de s~lutlon cellulasique au résidu.
L' incubation dure 43 ht?urcs
B NIo avec deux agitations F*af- ~jour.
On prz.Sc!e ensuite 2 une centrifugation. Lv surnaqeart est &iimiriB, le
ri5stju ost IavQ trois fols avec :Jr l'eau distilI& rt st%h& 2 Iv4-tuvs.
Lâ pourcent- de matl6re
sAche disparu r~~r~sentr‘ In Aiqastibilitb de
la matière sache.
1.0) La &thode des sachets nylon
-----U-----L----_-------
1-1
Le tissu nylc\\n a des mailles de d5 micrnns.
Los sachets sont cousus.2
la m?rhinn a'Jec des dimensions cl,? 9 x 15 cm.
Les animaux sont deux bovins males castrés pcrf-?Jnt des fistules du rumen&
lis sont nourris r'lu p2turago naturel o-i- co~plGmentés avec ,?3 la paille de
I
trif9Iium.
Le fourrage ;i analyser ~?st broy6 .V,NX un tamis (re 1 mm.
La ttichnique c?nslste en I'introducticn dans Ic: rumen 3 trzvzrs la fis-
tulc des cachots conterant chacun !Ine prise d'essai de 3 g -_1::t f-:urraze broyé.
L'incubsti~n dans te ruwn durs 48 heares a'~ hout rlesquels
les sachets sr;nt
I avhs sous un ccurant d'eau ,jusquvà c8 que I 'SI~ de 13vzce wit claire.
Las sachets sont ensuite incubYs dans la wlut!nn de p3jJsine tciric :
0,2 p.100 pendant /ifi heures 2 40:
Laver
, sécher et peser les sachets.
Le pwrcentage de matiGre ssche disparu à I’iSSUS de ce i-r-oitement
re?r&wte la dicestibi1i-C de la matière s&che.
1.c) ia méthode de Tit tey et Terry (151
c..-m.I#wc---------..-"
---a-w--
Cvest la technique q ue ncus employons en rcutin$? 6 Dakar. EfIc+ simule
les cJw?iti;:ns chîqiquvs du tractus gastro-intostinat avec deux stsd~s. La
prise dvessai de 0,5 I: de I*&hantillnn broy6 est soumis au traitomcnt d'un
m6lange de jus de rumen etde salive artlflciell-e("!ZC
!7ou~all),
pGndant 18 h
. . /. ..*
.
dans un tube de 100 ml à 39'. La jjre?aration est ensuite centrifu+e, te
surns.;Jeunt
elimin6, Le r6sidu est lave une fafs avec de l'ew distitl6c.
La r;e uxième étap consiste en IPndJorcti~n de 50 ml de soiuticn de
nepsine chlorhydrique au r&idu.
Le tub:: est ensuite incuF>G zu bain-mari62
à S" pena,3nt
48 hsures au t;>lA- desqwlles on pro&% W la centrifugation.
Le surnap2c7n-t
est Gliminé et Ie rkidu IavA deux fois B I'o-3~ dizitillfe Fuis
SéCh5
à I’ki-uvc Jusqu’au poids constant.
Le p3urcentnqo pondAr31 de fourrage SC!C disparu, c?rri3B du poids fAsi-
duel moyen des tubes blancs, represcnte
i? c-l i~estihilitd de la matiRre skhe.
1.d) F-iodification;anportées 3 lc? mdthcde de Ti!Itix et Tsrry gai-
r---"--------.mL -1---_1--_1--__------------ -------- - -.m
Van Soest (18)
L-"---w.--
a) Premlhre modiftcai-lnn
El 1~ nv:M fac; fnndamentnl:~. El le tf~uche * surtc!lf la technique c@t-atoire.
Le premier stade, le traitement .-le la prisy dPessai r,at- te jus dr; rumen et la
saliva artificielle est le même qu;,A celui prtconisé par Til lay ut T,;rry ;
mais a?r&s ce stade, il n'y a pas une hlimination du Jus d? rugen. On passe
iiractemcnl- 3 la deuxi&w $asu -,n ojou-knt 2 ml d'acide chlorhydriqw 6 N
et 3,5 (r de pepsine en poudre 2 chaque pr&çaration.
r)n ajoute 1 ml de t~~Ilu&ne
(pour bloquer l'activité microbienne) avant de proc6dor 3 IPincubnticn A
39"5 psnd;nt 40 h. Le principe du ca!cul est le m%w. II y 3 ici wins de
manipulai-ion 3 faire.
bi DWxiBm modificatjon
toi la modiffca-tian est fnndz:~en-l-aie.
Pnrès la premier s-ta& dvincuba-
tion avec le m&l~ngo de jus do rumen, on fait une d&tw-mination du WI du
rkidu de lrincuhation
! 0 p.100 = 100 - N[iF du r8sidu p.100
i l : raprkente la digastibllit6 réelle
KIF : Yeutral deter~ent fibw.
/
l . . . . .
.
- 11
1.c) r13-haqde scwmative de Van Soesl
I--_UI_------_----L-----lCC-
Cpcst une rfFthnde d'estimatiw di? la dipstibi lit6 r&lle Y partir des
,!r>nn>es chiniçués par la formule suivanto :
2- Rkultats'ét discussion
Tableau 2 : Tableau comparatif d% diffkenfes mkthodes de $jiqostibi
1 it(:
tas di+pitibiiitGs sot?t exrrimk en pur cent rfy: ,mati&-e skhe..
.
W?t-hcdologie d'analyse
Genre
I
Sachets
I
Ï-il loy E“t
Tiliey et
IGi-hoc! :! so-
Csl I üi.?sF,
Terry modif.
nylon
S’~WTi2”r i b’t’.
,
/
terry
1 par Van Soest ;!Ei V~G Soes
1
I
1
Cenchrus
6:jp 3.2
74,31
6P,Es1
XI*34
-<;, 73
Cynodon
t' ; 77
E' _
78,02
68, 79
79,71,
72,1?
Pennisetum
34,6c;
46,61
42,cQ
53,36
12,68
Chrysopogon
37,2x
X7,73
42,41
54,6^
57,c)??
Chryscpopn
x , 30
45,Fl
39,27
53,20
i 51 ,
i
Lolium
1
x3,84
90,81
89,35
9 1 9'3,"
9û,5'7
,
Le tableau (23 montre tirte diffbrcnce
non Ggligeable entra dtff&en+es
n6ihod,s,
a.. / ..*
- 12
La m&thr?4e des sachets t-pilon donw une surestimai-ion de la disestibil it6.
î&,us avons opGrB !JnF: dauble couture du nylon. II y a eu probablemopt des
ger+2rJ .$ travers les ?Oints de couture que la soudure serait la meilleure
façon d ' -irr:;> 5~
?-her. Blen mise au ?.>lnt et siandardisee, cetts technique serait
un b>n ~:iutiI de détermination de la solubilit6 de la matiks sikhe et des
diffkents r:rkriments dans le rumen.
La tecknique doubie enzymatique pepsine callulase sous-3stiw la dilss-
tibiiitij
ck la matiehre sèche, II y F une bonna corr&lation entre la m&thode
in vivo c;-t la pepsine cellulase, Yais C&IF dernlko technique ne treduit
cepen=fant pss les phérwménes auyL- subissent les fourrnnes au niveau c?u tractus
digestif. Elle a seulement l'avantage de ne pas nécwsitor I'cntretien dtffi-
cil:? d'animaiix fistulés du rumen !C, Y, 10).
Lss &thodcs dt-; Tilley et Tsrry a$ Tilley et Terry n-todi~fick? prit- Van
Soest dc;nn:3nt respectivement une estimation de la dinestibiIIt& appst-ente et
de la digcs-tibilit6 réella. LÎ:S m?di%icaticns dc=- pr:~Qdur~ s,îpcr-i%cs yar Van
Soest !171 sont int6ressantes.
El 13s s~mplifien-t In manipuisti!~n ct diminuent
les risr;!-4:3s dgerreur,
La dktermination de la dinestibilité ?ar 1'6quation
de Van Soest donne des veleurspr?ches
de celles obtenws par la m6thock de
TII ley -t Tzrry mdifiée C>ar Van Secs t. II serait int&essant du refaire ces
analyses avec ur, wmbre d'échantillon plus &lev"v rzur &rifi(rir la reproducti-
vi-l-5 des m%hodes d3ns notre Lsbsrato ire.
Los tableaux 1 et 2 montrent les relations d'inversv y-oyrtimnalit4
qui ex i '
S+ent entre In 3arci cellulaire v6+?+alo (NDFJ et IYI digestibilit6;
confirmant air? le rôle dnpressif qu'il .]c:ue sur la valeur aii~mcntairo des
fourraps.
l . /
. l .*
- 13
III - tXTR4CTIOW DES TANINS (12)
1 - Ini-roductic~n
Les c~mpos~?s
phéwliques cn g3n6rai, les tanins @n particulier, sont
d~imnz-tants d6presseurs C!C?
I'utilisJiicn di-estlve des fourrages qui /as
contiennent. SFils ont une utIIisùticn bérkfiqw dans l'injus-i-ri&
du cuir,
I t-3 ton I ns inhibent aussi I'actlvit6 +znzymatique 2f.1 suc aastrique en r+we
t,:mns qusils nr+cipitont les prot&lnes et certains vitamines.
II y a une corr~la-tinn GI-roits o-t- n6c;ative
cntr5 la diptibilit6 et
la tantiur !zn tanInsdes v@x%taux.
L'etude de 0:s comroses ph6noliquos revêt donc une irwx-tance particu-
I ièrc? rïr nutrition animale.
Nx dkterminations
ont 61-6 surtout qualitai-ives et consis-tsnt on I'ex-
trnctix et la mise en évidence des classes da tanlns par un c~,r-l-ain nombre
de r.$actions
chimiques.
L9extracticn des tanins a &t-G cffectu~e 3voc un solvant Folaire : I'acC-
ii'5
.!
totw 2 wixan-i-s
dix pour cent.
> :
Lûs tests de vkification cohcerncn t la pr&ipitation le la TUlatine et
la coloration du N M-anal chlorhydrique 5 p,lr>O.
2 - Las I'iantes
Lzs essais ont 6-6 ef.factuks sur ies fwil tes de ad:3ux 3enros : ChUS
natalerIsis et Ftfsrolobium stallatum, appartwant rosnectivemant 5 !a famille
des anscardieceae et des pa?ilionacaae!. Ces plantes sont mnnues pour leurs
fortes teneurs on tanins.
3 - Les rbactlfs
1 - Acétone 70 p.lOc3
2- P,cétate d'Yterhium
3- Solution de triethanolamine acBtone 70 p..tOC)
g - Acide cxaiiqus 0,15 M
5 - Gelûtine
: solution acqueuse 5 p,.lOQ
fi- Nbutancl chlorhydrique 5 p.lM?
..a
/
. . .
- 14
7 - Neutrnl detergent solution :
Lauryl sulfate de sX!ium *. l .*. l l . . * l .,.‘.‘... . 9 3 3 g
Acide éthylknn diamine tetracktîque ..,..,., 13,cjl 3
%3-ax . , . . . ..* , . . l . . , l . . . . , . . . ,‘. . .‘. . , . ,.... ,‘.‘. ,’
$81
0
Hydropnophwghate disszdique anhydre
l . . l . .’ l
2,5G
0
10 ml
2 - Ethoxy
o-thnrol
. . . . . . . . . . . . . l
s, . . . . . .
,‘. . . .‘.
Eau distilt&
..,.,.~.~...*.*.*.~*~~.,.~..~.
11
4- L.2 mûa #ratr\\ire
La prise d'essai de 5 III~ ,r?st !-rit-ut-& dans un mot-i-izr wec 5 ml tifaci:tw?e
70 T?.?OO. La $lesû supkieuro du liquide est ensuite transf&ee
dans un tuba
à centriftiger 5 travers un creuset +le Goc,ch no1 . .
Lss::pérst ior: est mena; ctnq f:)is. Pincer ensuite le m3rtiar c:t verser
la total i-i6 du contenu dans 1.2 creuset.
LS r6sidu ccntenu dans le crsuse-i do Gooch est -t-rai-l-F au dhtwqent neutre
pondant UÏIG heure. II est ensuite lavé 2 l'eau chaude puis rince BVL‘C de
I'ac~?-t~ne pur.
Le tube contenant le filtrat sst souvis à u n e ccntrifu*!.atii:n
a-t le surna-
yxnt 6limit-G.
Le culot est la& trois fois avec de I'acAt3ne pur. LGs nig-
~ments sont GI imin& :lans le surnageant rsr centrifu!Tation n?r&s chaque lavage.
Le cuiot est ensutte lavé avec d<; Ivcau distiII6e et I:3 t;iirnaç.Stint Aii-
mlne.~
Ce-H-2 cpZration est mcnAe trois fois.
La pr&zi~~itati0n des tanins est réalisCe par sd,ioncti+n de 5 ml d'Yter
bium acGtote et de 20 ml de triethanolarrine acktone 70 7.100.
T:u culct de centrifugation , pc‘ur Gliminer I'Yterbium, 9n le fait preci-
gitor avec 5 ml d'acide vxnllque.. Apr5s cantrlfu~ation du m4lawp, le culct
d'~xnlai-e .d'YterbIum est rkupknbl~;. Le surnnpsant contient d3s tanins.. Cette
çr,Iution
et !E résidu fibreux :->ré-tr;~i-t6 au NDS vent subir &ux tasts:d'une
part Ic tast de pr&ipi-Fation des p-oteines snkifiqw; aux tanins, d'autre
rat-t 19actiSw AI Nhutanol chlzhydriquo 5 p.100 2 1NW.
Les rkiultats sont repr6sentes dans le tableau suivant.
. . ./ . . .
- 1”
Tzblsw 3 : Test d'identification des tanins..
1f?tc;rr!loFium stallntum
l
Rhus natal3-6is
l
1
!
I ?3iufic-n
+
+
+
de tanins
'
1
+
+
!
l
i
%-l-te mithcdal5~ie wt-met d7extraire et & mettre ,2r: &id.,ncz !a 3rEsence
de tanins dans Iss fwrra7es.
LC-s i-4-s d'identification mwitrent la ~r65sence
da +nins chez Fhus natalensis e-t Pterobium stella-tum.
!-3 caractère: positif du -tas-t a:~ Nbutr:nc:I chlrrhytiriquz du rkiclu fibreux
montre que IPextractinn ciçt InconplEte..
La bibiioqraphïe coweilic dc qwr-
suivra iFcxtrac7ion av8c I r? t&th~n~f acqueux 80 p.10 ? chaud (:Si.
Lvutilisntl~n des prn~remrw3 SP% nous a =crmis de fiwlisw les tests
de ccwpar3iwi? ~ntrs 42s rations à base de fourra?cc: 153 tyws trol,icaux et
diff6rents niv:zux de co!;plémentaticn utii i+nnt des ~T)U+pr.~dui?-s
acre-
indistrielc. La rk-taction des rgsultats est en ccurs, Ce trgvait fora I'cbjot
d'!Jn expos< iw-c de In mission d'&aluai-i:,n dtr prD>ramrna al imunti-ire eu
b6tnil trf3pical.
. . . / . . .
- 1'6
LE C%J:\\C SI$? LA NI!TRil-t ON ANI?‘ALE ET LP EVAL::ATIr)N OC LA VALEUR AL l MEKTA t FIE
DES FXJRRAGES
3~ 19 septembre RU 8 octobre 1?83,
les expos6s et s&inaires ont pM-é
sur :
1) lP~~voluation de la valeur ~~romstolo~ique ries fwrroqes
2) la digestibilit& des fourrages : les etudss cnt nltri-i? sur les mithodes
in vive e i in vitro
3) l'ame! ioratIc:n de la valeur nutritive des fcurra:ws par les traitements
chimiques et bi~~loqiques
0 1% i _,
r>iturages
naturels : la mithc~k?lc~gie
qEn4role d'Fi-ulc et la valeur
alimcn-taire des pâturages
5) I'ityestion
: kthode de determlnati~:;n
et fac-t$urs
limitants
6) la cinetique de la diçestion chez les ruminants
7) Ios .factcurs anti-nutrltlonnels
et leur action dans la r)hysiologie de la
digestion des ruminants : ce chapitre concerne I'&tude des tanins, ta
IiJnine,
!es alcslcTdes et autrvs G16ments toxiquas,
L 55 eminents
spkialistes :)r&en ts ent ani& les d+~ats suivi -1~ discus-
sions rich+rs et fructueuses qui rnt y-mis aux narticin.ants de rJiverses
&ions ~.i'i frique de se faire h&nhficier de teurs exp&riencs; n~ut:rvIIes.
Les élsments du nro~ramme montrent le caract8ro diversifie et imrcrtant
des sujtnts abord% pendant deux semaines. Ce temps nous semble un ;Jw trop
court. La C!ur%e du cours devra etrv allongée et les sujets ûb~?v:.f+$, ~ius
spécialii&s9 pouvant faire I'obje t de changements chaque ann6e. ~+NS pensons
que cette limitation du champ d'int6rêt du prnqramme permettra aux :;irtici-
pants rIJet tirer nIus grand profit.
- 17
Nous exrrimnns
1'
notre profonin reconnaissance au CIF%\\ p,Zilr wus evoir
offert iPoppcrtunit6 d'effmztwr ce5 travwx 2111 siSIc.
<
I
ious
atiressnns vss vifs rrmsrctmants au Dr J in LAVBOU4P~4E CY+ au Pr.
fXJTTE~~!C)RTIi pzur I vmcadremcnt d:mt ncus ûwns
pu hEnGficier auprès dieux.
~.!PJs t-mmrcions lr= Dr Jess REE9, p.mr le suivi wnstant ct les crnssils
qu'il 3 biw voulu ncus Frodirjuer,
tout le imrscnnel ?u Lablrstcire de F!utri-
tim pGur lu ccllab~ratinn efficîce que nous y ûwns eu.
Enfir,,
nous reqrstton s de n'avait- ?a- pu visiter les ~i”:X~f3iX?W? du
Kenya e-i- dv t!zad;yn. Cela a 3-Q dû dPuns part 3 das prrd,ièwz Aa cocrdinni-ion
entre le quartier qQnérel d'Addis AbZa L-i- ILCA Naimbi, et- d"eutre un m3nqt.m
de visa l?e ncus i! pas pf?rf!IîS d'entrer SILI Ni$ria.
- 13
OLIVR~33 El !WBLICATlr>EiS
!INS!ULTES
1 - GI:;IER Sylvie -. Zvalu3tion des constituants membranï~irc:s
5 partir des
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le rurnen des foins traités oti ncn 2 Iti soude. /'+nn.F?bd.V+i-.,
19El : 125 :
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7 - KEPIFTW (T.J.) - The
of nylon t-,agr to charactcriso fhe ;;otcntial
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107-I ?6.
8 - FI(f?HREZ and CRSKOV - Ths use of :lacrcn baqs incubatcd in thc runen tc,
rlldasure extent o+ protein le~radaticn.
?- MOEEL GARAY Georpina - Etude comparative de la -ligestibl Lit-6 Yos aliments
chez Ics ruminants 0btw-w avec la technique classique das biivns in vivo
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Ecole nstionel~~ vBtArinaire -19Alfcrt,
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11 - F& w,NI.JS (W.R. ? - AmI ysis r>f forap.2,
rouqhaq,>
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?lânt c2l I val 1. gutl ine n&es and grccedures.
12
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S/lip
of solut7ie ,henol ics, ins<7lui:.Ie
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and fibsrs in plants in j-ht? dit-4 nf tdi id aris $dPtrestiC
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16 - VAN SIYST (P. J . 1 - Séminaire tenu Ic;rs du cours ~!II CIPEA sur /a nutrition
finimalt 6+-t lv&aluation de la production fout-t-ag&re
du 19 se;?ten+re au
3 cxtobre 19e3,
17 - '//IN %?EST (P.J.1 - Nutritionsi ecolqy of the ruminant. Publishsd and
jistributed by fi S f! Bonkr lric 1215 NrL! !<linspla~o, 1383.
18 - V;IN SXST (r,J.) - Develo!~mrnt of a ccmprehensive systsm of f*ed analyses
and its application to fcrqes.
Pr6sen-G Icrs riu 58h meeting annuel de
I -? SociCtE n&ricains des Sciences animales. New Rrunswick. New Jersey.
19 - Standardization of analytical methodoloqy f?r feeds. Proceadin~ c-f a
workshq held in Ottawa : Canada 12 - 14 mat-ch 1979.
Editors
: Figder W.J., t?alch C.C. and Grnham M.
/
REFURL 1 QUE Dl1 SENEGAL
----e--m-”
Mi Il i STERE DE LA RECHERCHE
SCIENTIFIQUE ET TECHNIQUE
- w - - - - - w - - -
INSTITUT SENEGALAIS !IIE RECHERCHES
AGRICOLES (1 ..S.R.A.l
- - - - - w - - B - - -
. LAPOR4TCI RE NATIONAL !JE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
R A P P O R T D E S T A G E
DE FORMAT t Oi’! COMP’LEMENTA I RE EFFECTUE AU C I PEA
( C E N T R E INTEHNPTIONAL
P O U R L!ELEVAGE EN AFE?IQUE)
D U 1 0 A O U T A U 2 6 N O V E M B R E 1 9 8 3
P a r S a f iétou T o u r é F A L L
REF.NO1O1/PHYSlO,
DECEMSRE 1 9 8 3 .
RAPPORT DE STAGE
DE FORMATION COMPLE~!ENTAIQE EFFECTUE AU ClpEA
(CENTRE INTERNATlOYAL POlIri L'ELEVAGE EN AFRIQUE)
DU ?O F\\OUT AU 26 YOVEMBRE 1983
Par Sa+iBfou Touré FALL
Ou I!i août au 26 novembre 1383, nos activités ont port6 a~ CIPEA sur :
1) t'analyse des constituants grossiers des fourrages pour les techniques de
Van Soast : Acid detergent fiber (ADF), Neutral detsrgent fibert CI%F),
Ilgnine, silice, cellulose et hémicelluloses.
2) L'étude comparative de quatre m6thodes de d6termination de la digestibi-
lité des fourrages in vitro :
- la m&hode de Tilley et Terry
- la mkthode des sachets nylon
- la méthode de la pepsine cellulase
- la m&thode de Tiiley et Tarry modlff& par Van Soest et 13 méthode
dvestimation de la digestibilité par I'Aquation sommstive de Van Soesf.
3) L'extraction pt I 'identification des tanins.
4) A la section informatique, nous avons pu traiter une partie des donnCses
du programme alimentation du bétail tropical.
5) Du 19 stiptembre au 8 octobre 1383, nous avons participé au cours sur la
nutrition anima la et l'évaluation de la valwr alimenta iro des fourrages,
organfs6 par le CIPEA.
. . . / . . .
- 2
l - ANALYSE DES CQMTITUA!JTS GROSSIERS DES FOURRACES PAP LES TECHNIQUES
D
E
Vnti SO!%T
fNGKX.IUCTION
tâ cellule v&$-fale est compo&e de la rrembrane ce~ialaire et feS élhments
intracel l u t a i r e s , c ’ e s t - à - d i r e : le noyau, le cytoplasme et lss autres inclu-
slons cytoplasmiqu9s.
Les elements intrscellulaîres sont en grande partie cons-hi illÉS de SUbS-
tances nutritives solubles : les Iipoprotéines et les hydrates de carbone.'
Ce contenu cellulaire est digestible à 98 pour cent environ'
~a paroi cellulaire constitue un mur ccmpose de cellutose, ~qhemIcellulose,
de lignine, de substances pectlques, de silices et de tanins 6 faible pour-
centage.
Les liaisons entre ces élements sont trk solides et cela constitue un
facteur Iimitant de la digestibilit6 des fourrages, La d&termina,tion de la
cellulose par une doubio hydrolyse acide et basique ne rend pas compte pre-
cisément de ta teneur des fourrages en cet Clément
; par Iv mke processus
L'h6micetlulose est hydrolyse en partie. Elle ne r-nd pas conpto aussi de la
quantitb total e de fibres compos.ant;is
de la paroi cellulaire,
C'est cet approche analytique des composantes de JR paroi csllulairn qui
justifie i'utilisation des détergents acides et neutres dans les techniques
de Van Socst pour la d&t-ermination globale o-t differencI& des constituants
pat-ihtaux de 13 cellule végétale.
Le traitement d'une prise d'essai au détergent neutre suivi d'une minera-
îisation donne le NDF "neutrol dstergent fiber" qui représente ] 'ensemble
des constituants pariétaux de la cel(ule v6gAtale. 11 a une correlation n,+a-
tlve avec la digestibilité.
La prise dvessai, trait6e au d&i'ergent acidie, donne l'ADF, c'est-à-dire
"l'acide detergen-t flber" qui représente t'ensemble des constituants membra-
naires diminue de t'hémicellulose. Cvest en faite la iiqno-ceiiutose et la
sllke. La @terminal-ion de I'ADF est une étape préparatoire pour te dosage
de 12) lignine dans les fourrages. En effet, les résidus de 1'4DF traités avec
l’acide sulfurique 72 p.100, puis m inéralisé donne la teneur en 1 ignine.
. . /
. l . .
- 3
La silice représente les cendres insolubles dans l'acide hydromique.
Le plan de r%termlnîtTon des 6l&ments grossiers dôs fourr3~es est
r&wnl par le sch&ma n'l.
Schéma 1
D&ix wtt acide
ion
Cellulose
~ OF
Ltgnine
1 Silice
H?miccllulose
\\
Lignine
Silice
4
- 4
TECHNlQiiES C)PERATO1RES
1 - NDl= : "NOtitraI detergent flhar"
Cs.& une rcéthode raptdc d 3 dkfwml nation de I'ensembls de la parol
cellulaire. Elle permet donc par cc>nsGqucnt de d&krmtner 15s. substances
solubles presque tctalement disponibles pour l'assimilailon.
L3 prise d?essai est trait& pendant 1 heure au d&-erq2nt neutrs 3 chaud.
Le rgsidu est filtré, lavé, séch6 puis minéralisé.
Le poids disparu après minéral isaticn est rapport6 S. 100 9.
Matériel
1 - Syçike ci'oxtractlon : CompOSé de six él6ments thermor&~leabl~ ineivlduel-
Isment et muni d'un condensateur
2- Système d;c! filtration 115 C: une pompe F vide
3- Creusets de Woch no1 ayant une capacit8 de 50 ml
4 - Eau chaude.
Réactif
1 - DQterr)cnt neutre
Lauryl sulfate de sodium .a.............*.*.....
30 (-7
EDTR sel dissodique
. . ..*.....**..............,.
15,61 9
F,orax
l . ..**..L..*......~...............*.*.*...
6,!31 g
Hydr~~6nophospha-te dissodique anhydre
. . . . . . . . . . 4,5h C-J
2-Ethoxyethanoi .*....*.., ........................
10 ml
Eau distillée .....................................
1 1.
Dans un bécher, mélanger le borax et I'EDTA, ajouter une ;>arti,: de l'eau
distlil6e et faire dissoudre en chauffant. Ajcuter le lauryl sulfate dc
sodium et le Z-ethoxyethanol.
Mettre le phosphate rlissodlnus dans 10 bécher,
ajouter de l'eau distill& et chauffer jusqu'à dIssolution. Mettrt! le reste
des inyrédicnts.
VBrificr et ajuster le pH qui doit être situé entre 6,9 et 7,l.
. ..L,.
- 5
2 - AcSione pur.
Mode op6ratolre
Peser 1 (3 du fourrage broyé ; mettre dans un bécher de 600 ml adaptable
au système de wflux. Ajouter 10 ml de d+tergent neutre. Porter à 6bullitton
:.< :
en 5 mn. Maintenir 2 ébuli i-l-ion constante pendant ? heure.
ProcBder à la filtration. Rincer 3 fois le bécher et Iv cr:+uset de
Gooch no1 contenant le résidu avsc de Ifeau chaude. Laver en dernier lieu
2 fois 3vec de l'acétone. SGkhw le creuset à I'kl-uve 19O'C pendant une nuit.
Peser le creuset contenant le &tdu..On pro&de~ensu[fe B la mfn&al isat[on
au four à 55°C.
t.jT)F = PI = p2
x 100
E
Pl
: Poids du creuset contenant le rtsidu npr8s sechage 2 I'ktuve
p2
: Poids du creuset contenant le résidu après nl&ralisation
E
: Prise d'essai.
2 - Détermination de I'ADF : Acide de-ter-gent fiber et de la tignine
Réactif
- ADS : Acid dwterpnt solution
Aclda sulfurique 1N ..‘.......C..,...,..
7 t
Cetyl trlmethyl amrnonium
bromide technique : CETAD ,....,........ 20 q
Dissoudra le CFTAB dans l'acide sulfurique.
- Acide sulfirique 72 p.100.
!Mode opératoire
Pour la d6terminotion de 1'4OF, la technique est identique à celle du
NDF. Apr&s traltemen t Z9 I'ADS, filtrer, laver, sécher a I'6tuvo et pes,er
soit Pl.
- 6
Après sechage à Iqétove,
le creuset contenant le rkidu est traite à
l'acide sutfurique 72 p~lQ0 pendant 3 heures. La prsparatlqn est remude twtes
les Flel:rfis P l'aide d'un agitateur.
Prochdilr ensuite au lavage avec dc l'eau
chauds et 2 la filtrati 0 n sous vide. Secher, peser : soit P-.
Yinkaliser le r6s du nu four à 550e pendant trcis hcwres, peser :
soit P3.
Caicui
*DF _ Pl - p3
x 100
P
PZ “‘PS
lignlne = P
x 100
ou P = prise d'essai
Pl
: poids du creuset sec apres traitement au l%S
p2
: poids du creuset sec aprk traitement à I'actde sulfurique 72 p.100
PS : poids du creuset aprks min&-alisation.
Détermination'de la silice
Les candres obtenus aprk inein~ration au four lors dFz. lu d6termination
de la iignine sent traités 3 l'acide hydrobromique 48 p.lM pendant 2 heures.
Filtrer avec une pompe A vide et laver le r6sidu ovcc de t'acdtone, sfcher,
min&aliser et peser : soit PI+.
Silice =
P4 - T x 100
E
T = tare du creuset
E z prise d'essai initiale.
Le plan de Van Soest offre un e méthodologie rapide et facile de détermi-
nation des pr incipaux constituants tnwbranaires de la ce Iluie v+.~~~-tûle (sauf
les tanins ei les substances pectiques qui sont prkents
dans des proportions
très faib\\osI,
II permet Ifétude des facteurs limitants de la digestibilit6 qui sont
lies h la composition des fourrages.
/
.*., . . .
,
-7
11 nous a @ix? donné I'occasi:~n
dgappliquer ce plan de d&erminaticn des
fibres pour six échantillons de fourra~tcs.
Tableau 1 : Wsultat en p.,lOO de matière skhe.
I
r
1
NumBre
Espèc.2 végéta I e
NDF p.100 ADF p.100 Lion!ne Cellulose sTii
HSmicel-
1
vraie
j
03 a f ulae
7370
Cenchrus cil taris
57,66
32,33
3,61
22,13
0,58'
25,3^
7371
Cynodon dactylzn
.
51,l
2S,46
4,ll
21,51
I
1
! %234
22,64
~-~
7372
Pennisetum sp.
.
13,69r--
46,71
8,21
36,6
3,901
24,38
7373
Chrysopogon aucheri.,
73,c)6
45,68
7,59
??!,53
7,56
27 3s
#-
I
73711
Chrysopogon ûuchcri..
75,70
50,16
t-3,69
33,85
/7,62
25,54
7579
I Lolium multiflorum..,
1
4386 1 22 45
9
/
1,50
1
19,22
11,731
30,61
P&~us effectuerons une comparaison de ces résultats avec ceux des tests
de digestibi!itG? que nous avons effcctu~ Tour voir si ce petit nombre
d'khantilion confirme la correlation nsgative entre NDF et digestibilith
dont fait état la biblioqraphie (181.
.,. / . . .
-8
II - ETUDE COMP&RhTlVE DE QUATRE METHXIES DvETUDE DE LA ?IGESTIRILlTt
19 VtTRO DES FOURR9GES
1 - fl3-hodologie d'analyse
Les technlaues de détermination in vitré de In di?estihilit& dc: la
matière s&che des fnurrages offrent I'avantaq,0 ti'?i-re nlus ra;;i$Aa quo la
m&khode des essais in vivo.
Leur principe est bas3 sur IF reproduction au Labor?+oire 4~s ccrditiws
ruminales.
~US avons travaill6 avec 19s mêmes &chantill!?ns avec ;11ffbrenlesm5thodes
Dow tester leur reproductibilits et Ier relations entre elles. i-es diffé-
rentes mkthodes utilisées sont :
- In mAthode double enzymntiqua : pepsine cellulsse
- la méthode des sach&s nylon
- la méthode de TII ley et Tcrry
- la méthode de Tillay et Terry modifi& par Van SZ&-.
1.3) La techniguP dcublê enzymatigue
--e------ ------------- --mm --
On fait subir à la prise d'essai un!? attaque successive de ,-!::ux enzymes :
la pepsine puis la cefiulase.
Les solutic.ns Utilis&es sont : 13 pepsine acide : 9,2 <.1XI et la sotu-
i!bn .A2 ccllulase : 1,5 9 de cnllulass dans 1 I di-: s3lulicn t.:!r:::-j::
d'ac6t~ta
de sodium.
ler stade :
La $echnique consiste 5 aJouter 10 ml de solution de pepsine ncide dans
un tube à essai contenant la prtse de OP1 9 de fourrsq,s.
Incuber le tube dans
un bain-marie à 40' pendant 45 heures en les wc;itant deux fois Far jour.
Qn centrifuge ensuite les tubes ot 6limine le surnageant. is r&idu est
Isv6 deux fcis avec de l'eau distillBe.
. . /. .*.
-9
28 stade :
l I consiste en ~'ad,.Joncticn
3e 10 ml de s~lutlon cellulasique au résidu.
L' incubation dure 43 ht?urcs
B NIo avec deux agitations F*af- ~jour.
On prz.Sc!e ensuite 2 une centrifugation. Lv surnaqeart est &iimiriB, le
ri5stju ost IavQ trois fols avec :Jr l'eau distilI& rt st%h& 2 Iv4-tuvs.
Lâ pourcent- de matl6re
sAche disparu r~~r~sentr‘ In Aiqastibilitb de
la matière sache.
1.0) La &thode des sachets nylon
-----U-----L----_-------
1-1
Le tissu nylc\\n a des mailles de d5 micrnns.
Los sachets sont cousus.2
la m?rhinn a'Jec des dimensions cl,? 9 x 15 cm.
Les animaux sont deux bovins males castrés pcrf-?Jnt des fistules du rumen&
lis sont nourris r'lu p2turago naturel o-i- co~plGmentés avec ,?3 la paille de
I
trif9Iium.
Le fourrage ;i analyser ~?st broy6 .V,NX un tamis (re 1 mm.
La ttichnique c?nslste en I'introducticn dans Ic: rumen 3 trzvzrs la fis-
tulc des cachots conterant chacun !Ine prise d'essai de 3 g -_1::t f-:urraze broyé.
L'incubsti~n dans te ruwn durs 48 heares a'~ hout rlesquels
les sachets sr;nt
I avhs sous un ccurant d'eau ,jusquvà c8 que I 'SI~ de 13vzce wit claire.
Las sachets sont ensuite incubYs dans la wlut!nn de p3jJsine tciric :
0,2 p.100 pendant /ifi heures 2 40:
Laver
, sécher et peser les sachets.
Le pwrcentage de matiGre ssche disparu à I’iSSUS de ce i-r-oitement
re?r&wte la dicestibi1i-C de la matière s&che.
1.c) ia méthode de Tit tey et Terry (151
c..-m.I#wc---------..-"
---a-w--
Cvest la technique q ue ncus employons en rcutin$? 6 Dakar. EfIc+ simule
les cJw?iti;:ns chîqiquvs du tractus gastro-intostinat avec deux stsd~s. La
prise dvessai de 0,5 I: de I*&hantillnn broy6 est soumis au traitomcnt d'un
m6lange de jus de rumen etde salive artlflciell-e("!ZC
!7ou~all),
pGndant 18 h
. . /. ..*
.
dans un tube de 100 ml à 39'. La jjre?aration est ensuite centrifu+e, te
surns.;Jeunt
elimin6, Le r6sidu est lave une fafs avec de l'ew distitl6c.
La r;e uxième étap consiste en IPndJorcti~n de 50 ml de soiuticn de
nepsine chlorhydrique au r&idu.
Le tub:: est ensuite incuF>G zu bain-mari62
à S" pena,3nt
48 hsures au t;>lA- desqwlles on pro&% W la centrifugation.
Le surnap2c7n-t
est Gliminé et Ie rkidu IavA deux fois B I'o-3~ dizitillfe Fuis
SéCh5
à I’ki-uvc Jusqu’au poids constant.
Le p3urcentnqo pondAr31 de fourrage SC!C disparu, c?rri3B du poids fAsi-
duel moyen des tubes blancs, represcnte
i? c-l i~estihilitd de la matiRre skhe.
1.d) F-iodification;anportées 3 lc? mdthcde de Ti!Itix et Tsrry gai-
r---"--------.mL -1---_1--_1--__------------ -------- - -.m
Van Soest (18)
L-"---w.--
a) Premlhre modiftcai-lnn
El 1~ nv:M fac; fnndamentnl:~. El le tf~uche * surtc!lf la technique c@t-atoire.
Le premier stade, le traitement .-le la prisy dPessai r,at- te jus dr; rumen et la
saliva artificielle est le même qu;,A celui prtconisé par Til lay ut T,;rry ;
mais a?r&s ce stade, il n'y a pas une hlimination du Jus d? rugen. On passe
iiractemcnl- 3 la deuxi&w $asu -,n ojou-knt 2 ml d'acide chlorhydriqw 6 N
et 3,5 (r de pepsine en poudre 2 chaque pr&çaration.
r)n ajoute 1 ml de t~~Ilu&ne
(pour bloquer l'activité microbienne) avant de proc6dor 3 IPincubnticn A
39"5 psnd;nt 40 h. Le principe du ca!cul est le m%w. II y 3 ici wins de
manipulai-ion 3 faire.
bi DWxiBm modificatjon
toi la modiffca-tian est fnndz:~en-l-aie.
Pnrès la premier s-ta& dvincuba-
tion avec le m&l~ngo de jus do rumen, on fait une d&tw-mination du WI du
rkidu de lrincuhation
! 0 p.100 = 100 - N[iF du r8sidu p.100
i l : raprkente la digastibllit6 réelle
KIF : Yeutral deter~ent fibw.
/
l . . . . .
.
- 11
1.c) r13-haqde scwmative de Van Soesl
I--_UI_------_----L-----lCC-
Cpcst une rfFthnde d'estimatiw di? la dipstibi lit6 r&lle Y partir des
,!r>nn>es chiniçués par la formule suivanto :
2- Rkultats'ét discussion
Tableau 2 : Tableau comparatif d% diffkenfes mkthodes de $jiqostibi
1 it(:
tas di+pitibiiitGs sot?t exrrimk en pur cent rfy: ,mati&-e skhe..
.
W?t-hcdologie d'analyse
Genre
I
Sachets
I
Ï-il loy E“t
Tiliey et
IGi-hoc! :! so-
Csl I üi.?sF,
Terry modif.
nylon
S’~WTi2”r i b’t’.
,
/
terry
1 par Van Soest ;!Ei V~G Soes
1
I
1
Cenchrus
6:jp 3.2
74,31
6P,Es1
XI*34
-<;, 73
Cynodon
t' ; 77
E' _
78,02
68, 79
79,71,
72,1?
Pennisetum
34,6c;
46,61
42,cQ
53,36
12,68
Chrysopogon
37,2x
X7,73
42,41
54,6^
57,c)??
Chryscpopn
x , 30
45,Fl
39,27
53,20
i 51 ,
i
Lolium
1
x3,84
90,81
89,35
9 1 9'3,"
9û,5'7
,
Le tableau (23 montre tirte diffbrcnce
non Ggligeable entra dtff&en+es
n6ihod,s,
a.. / ..*
- 12
La m&thr?4e des sachets t-pilon donw une surestimai-ion de la disestibil it6.
î&,us avons opGrB !JnF: dauble couture du nylon. II y a eu probablemopt des
ger+2rJ .$ travers les ?Oints de couture que la soudure serait la meilleure
façon d ' -irr:;> 5~
?-her. Blen mise au ?.>lnt et siandardisee, cetts technique serait
un b>n ~:iutiI de détermination de la solubilit6 de la matiks sikhe et des
diffkents r:rkriments dans le rumen.
La tecknique doubie enzymatique pepsine callulase sous-3stiw la dilss-
tibiiitij
ck la matiehre sèche, II y F une bonna corr&lation entre la m&thode
in vivo c;-t la pepsine cellulase, Yais C&IF dernlko technique ne treduit
cepen=fant pss les phérwménes auyL- subissent les fourrnnes au niveau c?u tractus
digestif. Elle a seulement l'avantage de ne pas nécwsitor I'cntretien dtffi-
cil:? d'animaiix fistulés du rumen !C, Y, 10).
Lss &thodcs dt-; Tilley et Tsrry a$ Tilley et Terry n-todi~fick? prit- Van
Soest dc;nn:3nt respectivement une estimation de la dinestibiIIt& appst-ente et
de la digcs-tibilit6 réella. LÎ:S m?di%icaticns dc=- pr:~Qdur~ s,îpcr-i%cs yar Van
Soest !171 sont int6ressantes.
El 13s s~mplifien-t In manipuisti!~n ct diminuent
les risr;!-4:3s dgerreur,
La dktermination de la dinestibilité ?ar 1'6quation
de Van Soest donne des veleurspr?ches
de celles obtenws par la m6thock de
TII ley -t Tzrry mdifiée C>ar Van Secs t. II serait int&essant du refaire ces
analyses avec ur, wmbre d'échantillon plus &lev"v rzur &rifi(rir la reproducti-
vi-l-5 des m%hodes d3ns notre Lsbsrato ire.
Los tableaux 1 et 2 montrent les relations d'inversv y-oyrtimnalit4
qui ex i '
S+ent entre In 3arci cellulaire v6+?+alo (NDFJ et IYI digestibilit6;
confirmant air? le rôle dnpressif qu'il .]c:ue sur la valeur aii~mcntairo des
fourraps.
l . /
. l .*
- 13
III - tXTR4CTIOW DES TANINS (12)
1 - Ini-roductic~n
Les c~mpos~?s
phéwliques cn g3n6rai, les tanins @n particulier, sont
d~imnz-tants d6presseurs C!C?
I'utilisJiicn di-estlve des fourrages qui /as
contiennent. SFils ont une utIIisùticn bérkfiqw dans l'injus-i-ri&
du cuir,
I t-3 ton I ns inhibent aussi I'actlvit6 +znzymatique 2f.1 suc aastrique en r+we
t,:mns qusils nr+cipitont les prot&lnes et certains vitamines.
II y a une corr~la-tinn GI-roits o-t- n6c;ative
cntr5 la diptibilit6 et
la tantiur !zn tanInsdes v@x%taux.
L'etude de 0:s comroses ph6noliquos revêt donc une irwx-tance particu-
I ièrc? rïr nutrition animale.
Nx dkterminations
ont 61-6 surtout qualitai-ives et consis-tsnt on I'ex-
trnctix et la mise en évidence des classes da tanlns par un c~,r-l-ain nombre
de r.$actions
chimiques.
L9extracticn des tanins a &t-G cffectu~e 3voc un solvant Folaire : I'acC-
ii'5
.!
totw 2 wixan-i-s
dix pour cent.
> :
Lûs tests de vkification cohcerncn t la pr&ipitation le la TUlatine et
la coloration du N M-anal chlorhydrique 5 p,lr>O.
2 - Las I'iantes
Lzs essais ont 6-6 ef.factuks sur ies fwil tes de ad:3ux 3enros : ChUS
natalerIsis et Ftfsrolobium stallatum, appartwant rosnectivemant 5 !a famille
des anscardieceae et des pa?ilionacaae!. Ces plantes sont mnnues pour leurs
fortes teneurs on tanins.
3 - Les rbactlfs
1 - Acétone 70 p.lOc3
2- P,cétate d'Yterhium
3- Solution de triethanolamine acBtone 70 p..tOC)
g - Acide cxaiiqus 0,15 M
5 - Gelûtine
: solution acqueuse 5 p,.lOQ
fi- Nbutancl chlorhydrique 5 p.lM?
..a
/
. . .
- 14
7 - Neutrnl detergent solution :
Lauryl sulfate de sX!ium *. l .*. l l . . * l .,.‘.‘... . 9 3 3 g
Acide éthylknn diamine tetracktîque ..,..,., 13,cjl 3
%3-ax . , . . . ..* , . . l . . , l . . . . , . . . ,‘. . .‘. . , . ,.... ,‘.‘. ,’
$81
0
Hydropnophwghate disszdique anhydre
l . . l . .’ l
2,5G
0
10 ml
2 - Ethoxy
o-thnrol
. . . . . . . . . . . . . l
s, . . . . . .
,‘. . . .‘.
Eau distilt&
..,.,.~.~...*.*.*.~*~~.,.~..~.
11
4- L.2 mûa #ratr\\ire
La prise d'essai de 5 III~ ,r?st !-rit-ut-& dans un mot-i-izr wec 5 ml tifaci:tw?e
70 T?.?OO. La $lesû supkieuro du liquide est ensuite transf&ee
dans un tuba
à centriftiger 5 travers un creuset +le Goc,ch no1 . .
Lss::pérst ior: est mena; ctnq f:)is. Pincer ensuite le m3rtiar c:t verser
la total i-i6 du contenu dans 1.2 creuset.
LS r6sidu ccntenu dans le crsuse-i do Gooch est -t-rai-l-F au dhtwqent neutre
pondant UÏIG heure. II est ensuite lavé 2 l'eau chaude puis rince BVL‘C de
I'ac~?-t~ne pur.
Le tube contenant le filtrat sst souvis à u n e ccntrifu*!.atii:n
a-t le surna-
yxnt 6limit-G.
Le culot est la& trois fois avec de I'acAt3ne pur. LGs nig-
~ments sont GI imin& :lans le surnageant rsr centrifu!Tation n?r&s chaque lavage.
Le cuiot est ensutte lavé avec d<; Ivcau distiII6e et I:3 t;iirnaç.Stint Aii-
mlne.~
Ce-H-2 cpZration est mcnAe trois fois.
La pr&zi~~itati0n des tanins est réalisCe par sd,ioncti+n de 5 ml d'Yter
bium acGtote et de 20 ml de triethanolarrine acktone 70 7.100.
T:u culct de centrifugation , pc‘ur Gliminer I'Yterbium, 9n le fait preci-
gitor avec 5 ml d'acide vxnllque.. Apr5s cantrlfu~ation du m4lawp, le culct
d'~xnlai-e .d'YterbIum est rkupknbl~;. Le surnnpsant contient d3s tanins.. Cette
çr,Iution
et !E résidu fibreux :->ré-tr;~i-t6 au NDS vent subir &ux tasts:d'une
part Ic tast de pr&ipi-Fation des p-oteines snkifiqw; aux tanins, d'autre
rat-t 19actiSw AI Nhutanol chlzhydriquo 5 p.100 2 1NW.
Les rkiultats sont repr6sentes dans le tableau suivant.
. . ./ . . .
- 1”
Tzblsw 3 : Test d'identification des tanins..
1f?tc;rr!loFium stallntum
l
Rhus natal3-6is
l
1
!
I ?3iufic-n
+
+
+
de tanins
'
1
+
+
!
l
i
%-l-te mithcdal5~ie wt-met d7extraire et & mettre ,2r: &id.,ncz !a 3rEsence
de tanins dans Iss fwrra7es.
LC-s i-4-s d'identification mwitrent la ~r65sence
da +nins chez Fhus natalensis e-t Pterobium stella-tum.
!-3 caractère: positif du -tas-t a:~ Nbutr:nc:I chlrrhytiriquz du rkiclu fibreux
montre que IPextractinn ciçt InconplEte..
La bibiioqraphïe coweilic dc qwr-
suivra iFcxtrac7ion av8c I r? t&th~n~f acqueux 80 p.10 ? chaud (:Si.
Lvutilisntl~n des prn~remrw3 SP% nous a =crmis de fiwlisw les tests
de ccwpar3iwi? ~ntrs 42s rations à base de fourra?cc: 153 tyws trol,icaux et
diff6rents niv:zux de co!;plémentaticn utii i+nnt des ~T)U+pr.~dui?-s
acre-
indistrielc. La rk-taction des rgsultats est en ccurs, Ce trgvait fora I'cbjot
d'!Jn expos< iw-c de In mission d'&aluai-i:,n dtr prD>ramrna al imunti-ire eu
b6tnil trf3pical.
. . . / . . .
- 1'6
LE C%J:\\C SI$? LA NI!TRil-t ON ANI?‘ALE ET LP EVAL::ATIr)N OC LA VALEUR AL l MEKTA t FIE
DES FXJRRAGES
3~ 19 septembre RU 8 octobre 1?83,
les expos6s et s&inaires ont pM-é
sur :
1) lP~~voluation de la valeur ~~romstolo~ique ries fwrroqes
2) la digestibilit& des fourrages : les etudss cnt nltri-i? sur les mithodes
in vive e i in vitro
3) l'ame! ioratIc:n de la valeur nutritive des fcurra:ws par les traitements
chimiques et bi~~loqiques
0 1% i _,
r>iturages
naturels : la mithc~k?lc~gie
qEn4role d'Fi-ulc et la valeur
alimcn-taire des pâturages
5) I'ityestion
: kthode de determlnati~:;n
et fac-t$urs
limitants
6) la cinetique de la diçestion chez les ruminants
7) Ios .factcurs anti-nutrltlonnels
et leur action dans la r)hysiologie de la
digestion des ruminants : ce chapitre concerne I'&tude des tanins, ta
IiJnine,
!es alcslcTdes et autrvs G16ments toxiquas,
L 55 eminents
spkialistes :)r&en ts ent ani& les d+~ats suivi -1~ discus-
sions rich+rs et fructueuses qui rnt y-mis aux narticin.ants de rJiverses
&ions ~.i'i frique de se faire h&nhficier de teurs exp&riencs; n~ut:rvIIes.
Les élsments du nro~ramme montrent le caract8ro diversifie et imrcrtant
des sujtnts abord% pendant deux semaines. Ce temps nous semble un ;Jw trop
court. La C!ur%e du cours devra etrv allongée et les sujets ûb~?v:.f+$, ~ius
spécialii&s9 pouvant faire I'obje t de changements chaque ann6e. ~+NS pensons
que cette limitation du champ d'int6rêt du prnqramme permettra aux :;irtici-
pants rIJet tirer nIus grand profit.
- 17
Nous exrrimnns
1'
notre profonin reconnaissance au CIF%\\ p,Zilr wus evoir
offert iPoppcrtunit6 d'effmztwr ce5 travwx 2111 siSIc.
<
I
ious
atiressnns vss vifs rrmsrctmants au Dr J in LAVBOU4P~4E CY+ au Pr.
fXJTTE~~!C)RTIi pzur I vmcadremcnt d:mt ncus ûwns
pu hEnGficier auprès dieux.
~.!PJs t-mmrcions lr= Dr Jess REE9, p.mr le suivi wnstant ct les crnssils
qu'il 3 biw voulu ncus Frodirjuer,
tout le imrscnnel ?u Lablrstcire de F!utri-
tim pGur lu ccllab~ratinn efficîce que nous y ûwns eu.
Enfir,,
nous reqrstton s de n'avait- ?a- pu visiter les ~i”:X~f3iX?W? du
Kenya e-i- dv t!zad;yn. Cela a 3-Q dû dPuns part 3 das prrd,ièwz Aa cocrdinni-ion
entre le quartier qQnérel d'Addis AbZa L-i- ILCA Naimbi, et- d"eutre un m3nqt.m
de visa l?e ncus i! pas pf?rf!IîS d'entrer SILI Ni$ria.
- 13
OLIVR~33 El !WBLICATlr>EiS
!INS!ULTES
1 - GI:;IER Sylvie -. Zvalu3tion des constituants membranï~irc:s
5 partir des
t:32hnIqu~s prTi;osGes
par Van Soest ; Thbse Occteur In$nieur. !..ab. de
Zootechnie !PAPG, janvier 1974.
2- S3ERIP;G (ti.K.1, VAN SOEST !P.J.! - Forage fiher anzly~uâ (Apparatus,
Reagents,
Irccedures, and 57me a?pI icstions).
~?gric~~iturr
Mnd bcok n"379.
:3 - :;ASLiiM (E,i - Chemictry of vv,ztale tzninc,_..Dpi- of chemistry the univarslty
Shafficld Englnnd Lcndemic press Lon+n 1966.
A - !-L%%i?TH O'.J .) - The nutriti%IaL anc! ecologicsl significacre cf ZCF~F
tanins 373 related nolyphenoi.
Thsc; de Wctorat pr&srnt.3
a Lcrnel
!.Jniversity
en 1981.
6- ISTASSE CL,>, C. VAN EEf\\lAE?4, iJGiG!~T i'J.1, GIFLEN (F1.1 ùt 'IjlENi=~l-? (J.hl.1 -
Estimation L:ar la technique dae; ssche-ts nyirsn de la r!i:?-3stI!>i i ii-é dans
le rurnen des foins traités oti ncn 2 Iti soude. /'+nn.F?bd.V+i-.,
19El : 125 :
199-205,
7 - KEPIFTW (T.J.) - The
of nylon t-,agr to charactcriso fhe ;;otcntial
dayraCaf)i
fity of fends for ruminants tropical znimsl prodlAction ;98~~ 5 :
107-I ?6.
8 - FI(f?HREZ and CRSKOV - Ths use of :lacrcn baqs incubatcd in thc runen tc,
rlldasure extent o+ protein le~radaticn.
?- MOEEL GARAY Georpina - Etude comparative de la -ligestibl Lit-6 Yos aliments
chez Ics ruminants 0btw-w avec la technique classique das biivns in vivo
st ta t;ichnique dite des s+cs. Thèse maitre ès sciences v&%rinaircs.
Ecole nstionel~~ vBtArinaire -19Alfcrt,
1183.
. . . / l . .
- 10
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bag technique for the evaluiiticn of f&,edsuffs.
Tropical animal yroductien, 1989 5 : 195-213,
11 - F& w,NI.JS (W.R. ? - AmI ysis r>f forap.2,
rouqhaq,>
L ..,c, nnd coxJ?sition of the
?lânt c2l I val 1. gutl ine n&es and grccedures.
12
REEL, (J.9.) et al, - i?Elatir>tI
S/lip
of solut7ie ,henol ics, ins<7lui:.Ie
?t-r;anthocysnidin
and fibsrs in plants in j-ht? dit-4 nf tdi id aris $dPtrestiC
ungulates. Mn puhliC.
13
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of
hWqe samy I BS, Thv grassl:nd research instituta, Hurloy, Nr F%i&n
hcar! Berkshire, 1908,
16 - VAN SIYST (P. J . 1 - Séminaire tenu Ic;rs du cours ~!II CIPEA sur /a nutrition
finimalt 6+-t lv&aluation de la production fout-t-ag&re
du 19 se;?ten+re au
3 cxtobre 19e3,
17 - '//IN %?EST (P.J.1 - Nutritionsi ecolqy of the ruminant. Publishsd and
jistributed by fi S f! Bonkr lric 1215 NrL! !<linspla~o, 1383.
18 - V;IN SXST (r,J.) - Develo!~mrnt of a ccmprehensive systsm of f*ed analyses
and its application to fcrqes.
Pr6sen-G Icrs riu 58h meeting annuel de
I -? SociCtE n&ricains des Sciences animales. New Rrunswick. New Jersey.
19 - Standardization of analytical methodoloqy f?r feeds. Proceadin~ c-f a
workshq held in Ottawa : Canada 12 - 14 mat-ch 1979.
Editors
: Figder W.J., t?alch C.C. and Grnham M.