INSTITUT D'ELEVAGE ET DE MEDECINE V?Z!ERINAIRE DES...
INSTITUT D'ELEVAGE ET DE MEDECINE V?Z!ERINAIRE DES PAYS TROPICAUX
LABORATOIRF NATIONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RFCHERCHES VKIERINAIRFS
DAKAR-HANN
EXPERIMENTATION AFLATOXINE
RECHERCHES EN COURS ET PREVISIONS
Dès 1363, trois organismes de recherche au Sénégal (O.R.A.N.A.,
C.R.A. et I.E.M.V.T.) ont abordé, chacun dans son domaine, les différents
aspects du problème posé par la contamination des arachides par Aspergillus
flavus.
Le Laboratoire natlonal de 1'Elevage et de Recherches vétérinaires
(I.E.M.v.T.) de Dakar, a proposé à l'agrement du Minist&re de 1'Economie
rurale un programme de recherches étalé sur trois ans, qui a été accepté.
Le but de ces recherches est de déterminer chez diverses espèces
animales en particulier les ruminants, les limites de la toxicité de l'afla-
toxine, ses effets éventuels sur les productions animales et spécialement
sur la production laitière. Voir enfin, si le lait et la viande produits
par des animaux absorbant de l'aflatoxine sont susceptibles de pr&senter
un danger pour la santé publique,
Touchant le domaine de l'hygiène des denrées alimentaires",
l'intérêt de ces recherches demeure cependant essentiellement économique.
Le Sénégal, en effet, est un gros cxporkteur de tourteaux d'arachide
(plus de 180.000 tonnes pour la campagne 1962-1963 représentant une valeur
de plus de 2 milliards de francs C.F.A.). Il convenait donc d'étudier les
possibilités et d'écarter le discrédit qui, du fait d'une connaissance
incomplete du problème de l'aflatoxine, risquerait de frapper ce dérivé
important de la production arachidière.
. . . / .*.
.
Le programme de recherches concernant l'aflatoxine comporte deux
étapes essentielles :
l”- Etude des effets de rations contaminées sur l'état de gestation
et la production du lait.
2"- Etude de l'action de l'aflatoxine sur la croissance et l'état
d'entretien des bovins de race lowale.
Les recherches actuellement en cours portent sur l'étude de la
lactation et la croissance des jeunes,
Un premier temps comporte l'expérimentation sur un lot de vaches,
des la mise be.s, d'une ration alimentaire comportant 500 g de tourteau
d'arachide contaminé par l'aflatoxine au taux de 3 PPM, soit une absorption
journalière par chaque vache de 1,5 mg d'aflatoxine pure.
Un nombre égal de vaches servant de témoins, sont entretenues
dans les mêmes conditions mais reçoivent 500 g de tourteau exempt d'afla-
toxine. Ce travail doit être poursuivi pendant six mois et sera suivi sur
un nouveau lot de vaches par une expérimentation analogue avec un taux de
contamination par l'aflatoxine réduit de moitié, soit 1,5 PPM.
1.0 - MOYENS DE TRAVAIL
a) Local de stebulation
Les étables existant au laboratoire ne permettant pas d'abriter
les vaches et les veaux destin& à cette expérimentation, un nouveau local
a do être aménagé.
Il est constitué par un hangar métallique de grandes dimensions
(30 x 12 mètres) dont une partie est aménagée pour la stabulation des ani-
ma.ux, l'autre permettant le stockage des pailles et foins.
b) Local de production d'aflatoxine et de conditionnement des rations
Les doses d'aflatoxine administrées ne pouvant &zs, en raison
de leur importance, extraites des produits naturellement contaminés, il a
fallu prévoir une production réguliére d'aflatoxine.
l ., / a..
3
En raison des dangers de contamination que présente 1'Aspergillus
flavus, un local a é-t6 spécialement aménagé pour cette production.
Ce bâtiment comprend :
.
- une salle de repiquage de la souche équipée d'une paillasse et d'une
Sorbonne,
1
.
- une salle de culture,
- une salle de conditionnement, une Sorbonne pour les manipulations
dangereuses,
- une salle dz dauche pour le personnel,
c) Instruments, verrerie, produits chimiques
L'équipement de ce b'&iment de production a nécessité en parti-
culier :
- une grande étuve de culture,
- un malaxeur mélangeur électrique,
- de la verrerie,
- des produits chimiques et biologiques nécessaires pour les tests hépati-
ques et les analyses de lait.
d) Achat d'animaux
23 jeunes vaches en état de gestation ont été achetees dans la
région de Tambacounda en mars 1965.
2"- METHODES ET MOYENS D'EXPERIMENTATION
a) Production d'aflatoxine
Après de nombreux t%tonnements et la recherche d'un bon milieu
de culture, la méthode suivante a été adoptée pour la production d'aflatoxine
Une souche d'Aspergillus flavus conservée à la température ambian-
-
-
te et B l'obscuritd est repiquée une fois par mois.
Tous les 15 jours, on ensemence a l'aide de cette souche 3 kg
d'arachides broyées préalablement stérilisées. Mises à incuber h l'étuve
dans des conditions d'humidite et de température très précises pendant 8
jours.
. . . / . . .
.-
Cette culture est ensuite passée au four Pasteur à 180°C
pendant 1 heure. Elle est ensuite dégraissée dans des extracteurs et le
tourteau obtenu fait l'objet :
- d'un dosage physico-chimique par chromatographie
- d'un dosage biologique sur caneton et sur oeuf embryonnk,
Dès que le taux est connu (variant de 150 à 300 PPM) des rations
individuelles sont préparées et stockées en ch<a&re froide dans des sacs
plastique jusqu'a leur administration.
b) Surveillance des animaux
Pesées
Les vaches sont pesées une fois par semaine, les jeunes sont
pesés chaque jour.
Tests hépatiques
Afin de deceler précocement une éventuelle altération fonction-
nelle ou lésionnelle au niveau du foie ou des reins des animaux traites,
un certain nombre de tests biochimiques sont réalisés périodiquement. Ils
comportent aussi bien chez les adultes que chez les jeunes les dosages
suivants :
numération globulaire
hématocrite
protéines totales
rapport albumine/globuline
lipides totaux
transaminases
Mac Lagan
pigments biliaires et sels biliaires
temps de saignement et de coagulation
polypeptides/N total
urée urinaire
sels et pigments biliaires dans l'urine,
Recherches sur le lait
Des prél&vements de lait sont faits régulièrement en vue des
doscages suivants :
- densité
- matiéres grasses
- chlorure
- lactose
- protéines totales
- recherche et dosage de l'aflatoxine.
. . ./ . . .
. --_
.:
->
5
Recherches histologiques et présence éventuelle d'aflatoxine dans la
viande et les abats
Sur tout animal mort en cours d'expérimentation, des prélèvements
sont faits en vue d'examens histopathologiques.
L'~aflatoxine est recherchée dans les broyats de muscles et d'abats,
3"- REALISATION PRATIQUE ET mAVAUX REALISES
23 vaches pleines en début d'expérience
4 avortements au cours du transport de Tambacounda à Dakar
1 mort en cours de parturition
L'expérimentation débute avec 18 <animaux répartis en deux lots
égaux de 9 animaux.
ler lot - recevant des rations contaminées
2ème lot - témoins.
ler lot - une vache n'ayant pas encore mis bas
une vache morte de péripneumonie en cours d'expérience.
Il y a actuellement 7 vaches suitées recevant journellement des
tourteaux contamin& (1,5 mg/jour d'aflatoxine).
2ème lot - 3 vaches n'ayant pas encore mis bas
6 vaches témoins suitées recevant une alimentation normale
(tourteaux sains)
Veaux : 7 veaux à la mamelle dont la mè?e reçoit de l'aflatoxine
6 veaux h. la mamelle dont la mène ne reçoit pas d'afla-
toxine
1 veau mort quelques jours après sa mère.
4"- ETAT ACTUEL DES RECHERCHES
Etant donné les multiples mises au point nécessaires avant le
début de l'expérimentation principale (entre autres l'obtention de tourteaux
riches en aflatoxine), la nécessité d'attendre que les locaux prévus pour
ce travail soient achevés, l'expérimentation n'a ccmmencée qu'assez tardi-
vement. Les résultats sont encore partiels, une interprétation permettant
.*. /
.0.
6
d'affirmer ou d'infirmer la toxi.cité des tourteaux d'arachide pour la vache
en lactation et le veau à la mamelle serait prématurée.
Cependant :
l*/ Les tests hépatiques des adultes sont dQjà perturbés au bout de deux
mois (trans~aminases).
2"/ Les tests hdpatiques des jeunes à la mamelle ne sont pas modifiés.
3"/ La croissance des jeunes semble normale.
ho/ L'état général des adultes ne semble pas perturbé, sans aucun amaigris-
sement sensible par rapport aux témoins.
DEPENSES EFFECTUEES LORS DE LA PREYIIEFB TRANCHE (Ière (année 1964-1965)
Crédits alloués : 5.928.000
Dépenses par rubriques
l"/ Construction du loc‘al de stabulation
1.681.516
Construction du local de production
d'aflatoxine
433.132
,* . . . . **...* . . . . . . l
,....
2"/ Achat et transport d'animaux .* .,....
goo. 000
3"/ Alimentation du bEtai1 ..* . . . . . . . . . . .
855.000
4'/ Mat6riel de laboratoire et divers . . .
1.056.030
5"/ Personnel (jusqu'au 31 ao% 1965) ,,.
950.400
Total
5.876.078
5.876.078
Reste au 31.8.65
51.922
-----------_----_-_----------~----------
. .
..--------_-__-___--_---------P -------a
. . . . / **.
.-
7
PROGRAWQZ DE RECHERCHES PREVU POUR LA 2ème TRANCHE 196-i-1966
Au cours de cette 2ème tranche d'expérimentation, les recherches
déja en cours seront poursuivies et d'autres entreprises :
l'/ Influence de l'aflatoxine sur la croissance du jeune à la mamelle
(taux de contamination des tourteaux 3 PPM).
2"/ Toxicité des tourteaux contaminés sur l'adulte (3 PPM). Etude des
lésions éventuelles.
3”/ Influence de l'aflatoxine sur la croissance des jeunes veaux sevrés
recevant une ration complémentaire composée de tourteaux contaminés
73 PPkI)
4"/ Etude de l'action de tourteaux normalement contaminés (1 à 1,5 PPM) sur :
a) la sante de l'adulte
b) la lactation
c) la croissznce des jeunes à la mamelle
d) la croissance des jeunes sevrés.
Les contr^oles seront effectués en suivant le protocole exposé
pour la lère tranche d'expérimentation.
PREWISIONS ET MOYF,NS A ME!M%E EN PLACE POUR LA REALISATION DE LA 2ème
TRANCREDERECHERCXES,
1°/ Personnel l ..L*.............*....*..,.......*....,,
2.148.000
1 laborantine (65.000 x 12) . . . . .
780.000
1 agent technique (32.000 x 1 2 )
384.000
1 aide de laboratoire (24,000 x 12) 288.000
2 garçons de laboratoire
(15.000 x 12 x 2) . . . . . . . .
360.000
2 bouviers (14.000 x 12 x 2) . . . .
336.000
2.148.000
. . . / .*.
8
REPORT
2.148.000
27 Achat de 20 vaches à 25,000 francs . . . . . . . . . . . . . . . .
5~0,000
3”/ Alimentzkion du bétail
325
l . . . . . . . . . . . . . . . . ...*.**.*..
l 000
4”/ Produits chimiques et divers .,....,..,..,.......,.
220.000
TOTAL . . . . . .
3.193.000
zzEzzz=======
Ces prévisions correspondent & un minimum qui conditionne la
poursuite norm,ale des recherches en cours et de celles prévues pour la
2ème tranche 65/66.
LABORATOIRF NATIONAL DE L'ELEVAGE
ET DE RFCHERCHES VKIERINAIRFS
DAKAR-HANN
EXPERIMENTATION AFLATOXINE
RECHERCHES EN COURS ET PREVISIONS
Dès 1363, trois organismes de recherche au Sénégal (O.R.A.N.A.,
C.R.A. et I.E.M.V.T.) ont abordé, chacun dans son domaine, les différents
aspects du problème posé par la contamination des arachides par Aspergillus
flavus.
Le Laboratoire natlonal de 1'Elevage et de Recherches vétérinaires
(I.E.M.v.T.) de Dakar, a proposé à l'agrement du Minist&re de 1'Economie
rurale un programme de recherches étalé sur trois ans, qui a été accepté.
Le but de ces recherches est de déterminer chez diverses espèces
animales en particulier les ruminants, les limites de la toxicité de l'afla-
toxine, ses effets éventuels sur les productions animales et spécialement
sur la production laitière. Voir enfin, si le lait et la viande produits
par des animaux absorbant de l'aflatoxine sont susceptibles de pr&senter
un danger pour la santé publique,
Touchant le domaine de l'hygiène des denrées alimentaires",
l'intérêt de ces recherches demeure cependant essentiellement économique.
Le Sénégal, en effet, est un gros cxporkteur de tourteaux d'arachide
(plus de 180.000 tonnes pour la campagne 1962-1963 représentant une valeur
de plus de 2 milliards de francs C.F.A.). Il convenait donc d'étudier les
possibilités et d'écarter le discrédit qui, du fait d'une connaissance
incomplete du problème de l'aflatoxine, risquerait de frapper ce dérivé
important de la production arachidière.
. . . / .*.
.
Le programme de recherches concernant l'aflatoxine comporte deux
étapes essentielles :
l”- Etude des effets de rations contaminées sur l'état de gestation
et la production du lait.
2"- Etude de l'action de l'aflatoxine sur la croissance et l'état
d'entretien des bovins de race lowale.
Les recherches actuellement en cours portent sur l'étude de la
lactation et la croissance des jeunes,
Un premier temps comporte l'expérimentation sur un lot de vaches,
des la mise be.s, d'une ration alimentaire comportant 500 g de tourteau
d'arachide contaminé par l'aflatoxine au taux de 3 PPM, soit une absorption
journalière par chaque vache de 1,5 mg d'aflatoxine pure.
Un nombre égal de vaches servant de témoins, sont entretenues
dans les mêmes conditions mais reçoivent 500 g de tourteau exempt d'afla-
toxine. Ce travail doit être poursuivi pendant six mois et sera suivi sur
un nouveau lot de vaches par une expérimentation analogue avec un taux de
contamination par l'aflatoxine réduit de moitié, soit 1,5 PPM.
1.0 - MOYENS DE TRAVAIL
a) Local de stebulation
Les étables existant au laboratoire ne permettant pas d'abriter
les vaches et les veaux destin& à cette expérimentation, un nouveau local
a do être aménagé.
Il est constitué par un hangar métallique de grandes dimensions
(30 x 12 mètres) dont une partie est aménagée pour la stabulation des ani-
ma.ux, l'autre permettant le stockage des pailles et foins.
b) Local de production d'aflatoxine et de conditionnement des rations
Les doses d'aflatoxine administrées ne pouvant &zs, en raison
de leur importance, extraites des produits naturellement contaminés, il a
fallu prévoir une production réguliére d'aflatoxine.
l ., / a..
3
En raison des dangers de contamination que présente 1'Aspergillus
flavus, un local a é-t6 spécialement aménagé pour cette production.
Ce bâtiment comprend :
.
- une salle de repiquage de la souche équipée d'une paillasse et d'une
Sorbonne,
1
.
- une salle de culture,
- une salle de conditionnement, une Sorbonne pour les manipulations
dangereuses,
- une salle dz dauche pour le personnel,
c) Instruments, verrerie, produits chimiques
L'équipement de ce b'&iment de production a nécessité en parti-
culier :
- une grande étuve de culture,
- un malaxeur mélangeur électrique,
- de la verrerie,
- des produits chimiques et biologiques nécessaires pour les tests hépati-
ques et les analyses de lait.
d) Achat d'animaux
23 jeunes vaches en état de gestation ont été achetees dans la
région de Tambacounda en mars 1965.
2"- METHODES ET MOYENS D'EXPERIMENTATION
a) Production d'aflatoxine
Après de nombreux t%tonnements et la recherche d'un bon milieu
de culture, la méthode suivante a été adoptée pour la production d'aflatoxine
Une souche d'Aspergillus flavus conservée à la température ambian-
-
-
te et B l'obscuritd est repiquée une fois par mois.
Tous les 15 jours, on ensemence a l'aide de cette souche 3 kg
d'arachides broyées préalablement stérilisées. Mises à incuber h l'étuve
dans des conditions d'humidite et de température très précises pendant 8
jours.
. . . / . . .
.-
Cette culture est ensuite passée au four Pasteur à 180°C
pendant 1 heure. Elle est ensuite dégraissée dans des extracteurs et le
tourteau obtenu fait l'objet :
- d'un dosage physico-chimique par chromatographie
- d'un dosage biologique sur caneton et sur oeuf embryonnk,
Dès que le taux est connu (variant de 150 à 300 PPM) des rations
individuelles sont préparées et stockées en ch<a&re froide dans des sacs
plastique jusqu'a leur administration.
b) Surveillance des animaux
Pesées
Les vaches sont pesées une fois par semaine, les jeunes sont
pesés chaque jour.
Tests hépatiques
Afin de deceler précocement une éventuelle altération fonction-
nelle ou lésionnelle au niveau du foie ou des reins des animaux traites,
un certain nombre de tests biochimiques sont réalisés périodiquement. Ils
comportent aussi bien chez les adultes que chez les jeunes les dosages
suivants :
numération globulaire
hématocrite
protéines totales
rapport albumine/globuline
lipides totaux
transaminases
Mac Lagan
pigments biliaires et sels biliaires
temps de saignement et de coagulation
polypeptides/N total
urée urinaire
sels et pigments biliaires dans l'urine,
Recherches sur le lait
Des prél&vements de lait sont faits régulièrement en vue des
doscages suivants :
- densité
- matiéres grasses
- chlorure
- lactose
- protéines totales
- recherche et dosage de l'aflatoxine.
. . ./ . . .
. --_
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Recherches histologiques et présence éventuelle d'aflatoxine dans la
viande et les abats
Sur tout animal mort en cours d'expérimentation, des prélèvements
sont faits en vue d'examens histopathologiques.
L'~aflatoxine est recherchée dans les broyats de muscles et d'abats,
3"- REALISATION PRATIQUE ET mAVAUX REALISES
23 vaches pleines en début d'expérience
4 avortements au cours du transport de Tambacounda à Dakar
1 mort en cours de parturition
L'expérimentation débute avec 18 <animaux répartis en deux lots
égaux de 9 animaux.
ler lot - recevant des rations contaminées
2ème lot - témoins.
ler lot - une vache n'ayant pas encore mis bas
une vache morte de péripneumonie en cours d'expérience.
Il y a actuellement 7 vaches suitées recevant journellement des
tourteaux contamin& (1,5 mg/jour d'aflatoxine).
2ème lot - 3 vaches n'ayant pas encore mis bas
6 vaches témoins suitées recevant une alimentation normale
(tourteaux sains)
Veaux : 7 veaux à la mamelle dont la mè?e reçoit de l'aflatoxine
6 veaux h. la mamelle dont la mène ne reçoit pas d'afla-
toxine
1 veau mort quelques jours après sa mère.
4"- ETAT ACTUEL DES RECHERCHES
Etant donné les multiples mises au point nécessaires avant le
début de l'expérimentation principale (entre autres l'obtention de tourteaux
riches en aflatoxine), la nécessité d'attendre que les locaux prévus pour
ce travail soient achevés, l'expérimentation n'a ccmmencée qu'assez tardi-
vement. Les résultats sont encore partiels, une interprétation permettant
.*. /
.0.
6
d'affirmer ou d'infirmer la toxi.cité des tourteaux d'arachide pour la vache
en lactation et le veau à la mamelle serait prématurée.
Cependant :
l*/ Les tests hépatiques des adultes sont dQjà perturbés au bout de deux
mois (trans~aminases).
2"/ Les tests hdpatiques des jeunes à la mamelle ne sont pas modifiés.
3"/ La croissance des jeunes semble normale.
ho/ L'état général des adultes ne semble pas perturbé, sans aucun amaigris-
sement sensible par rapport aux témoins.
DEPENSES EFFECTUEES LORS DE LA PREYIIEFB TRANCHE (Ière (année 1964-1965)
Crédits alloués : 5.928.000
Dépenses par rubriques
l"/ Construction du loc‘al de stabulation
1.681.516
Construction du local de production
d'aflatoxine
433.132
,* . . . . **...* . . . . . . l
,....
2"/ Achat et transport d'animaux .* .,....
goo. 000
3"/ Alimentation du bEtai1 ..* . . . . . . . . . . .
855.000
4'/ Mat6riel de laboratoire et divers . . .
1.056.030
5"/ Personnel (jusqu'au 31 ao% 1965) ,,.
950.400
Total
5.876.078
5.876.078
Reste au 31.8.65
51.922
-----------_----_-_----------~----------
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..--------_-__-___--_---------P -------a
. . . . / **.
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PROGRAWQZ DE RECHERCHES PREVU POUR LA 2ème TRANCHE 196-i-1966
Au cours de cette 2ème tranche d'expérimentation, les recherches
déja en cours seront poursuivies et d'autres entreprises :
l'/ Influence de l'aflatoxine sur la croissance du jeune à la mamelle
(taux de contamination des tourteaux 3 PPM).
2"/ Toxicité des tourteaux contaminés sur l'adulte (3 PPM). Etude des
lésions éventuelles.
3”/ Influence de l'aflatoxine sur la croissance des jeunes veaux sevrés
recevant une ration complémentaire composée de tourteaux contaminés
73 PPkI)
4"/ Etude de l'action de tourteaux normalement contaminés (1 à 1,5 PPM) sur :
a) la sante de l'adulte
b) la lactation
c) la croissznce des jeunes à la mamelle
d) la croissance des jeunes sevrés.
Les contr^oles seront effectués en suivant le protocole exposé
pour la lère tranche d'expérimentation.
PREWISIONS ET MOYF,NS A ME!M%E EN PLACE POUR LA REALISATION DE LA 2ème
TRANCREDERECHERCXES,
1°/ Personnel l ..L*.............*....*..,.......*....,,
2.148.000
1 laborantine (65.000 x 12) . . . . .
780.000
1 agent technique (32.000 x 1 2 )
384.000
1 aide de laboratoire (24,000 x 12) 288.000
2 garçons de laboratoire
(15.000 x 12 x 2) . . . . . . . .
360.000
2 bouviers (14.000 x 12 x 2) . . . .
336.000
2.148.000
. . . / .*.
8
REPORT
2.148.000
27 Achat de 20 vaches à 25,000 francs . . . . . . . . . . . . . . . .
5~0,000
3”/ Alimentzkion du bétail
325
l . . . . . . . . . . . . . . . . ...*.**.*..
l 000
4”/ Produits chimiques et divers .,....,..,..,.......,.
220.000
TOTAL . . . . . .
3.193.000
zzEzzz=======
Ces prévisions correspondent & un minimum qui conditionne la
poursuite norm,ale des recherches en cours et de celles prévues pour la
2ème tranche 65/66.