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REP1IBLIQuE DU SENEGliL
-.w---------
MINISTERE DE IARECEIERCHE
SCIE.NTIFIQUE EiT TECHNIQUE
-----------
INSTITUT SENEW~LAIS DE EUXJ-lERCfXS
AGRICOLES (1.S.R.A.)
LABORATOIRE NATIONAL DE L'BLEVAGE
ET DE REtX!ZRC~S VETERINAIRES
DAKAR-HANN
LE VACCIII CONTRE LA PESTE BOVIYE
-'-:-:-'-.-
.
. .
Par J, SARR
REF. No 89/VIRO.
OCTOBIIE 1983
LE VACCIN CONTRE LA PESTE BOVINE
Par J. SARR*
-:..*-:-:..:...-
.
.
HISTORIQUE DES MEZ3ODES D'IMMUNISATION
Les premières tentatives d'immunisation ont consisté en
une inoculation de bile frakhe d'animaux morts de peste par
les éleveurs boers en Afrique du Sud.
Cette méthode de vaccination se répandit à partir de 1897
en Afrique, en Extrême-Orient et en Europe.
Par la suite, plusieurs méthodes d'immunisations furent
préconisées donnant des résultats variables (tableau n*l>.
w Laboratoire national de 1'Elevage et de Recherches vétérinaires
DAKAR-~.
-4
B - LES VACCIIJS A VIRUS MODITIES
l- Virus caprini.sÉ
"u-I---e LI--".I
Le virus cap7xinisé :Fut mis au point ~32~7 1\\3 preGm fois p3.r
Edwards (1924-1925) pm adaptaticn du virus bwi~estique à 13
chkre.
: '
Ce vaccin fut utilisé avec :;uccès en Inde, rmis se tiv~?la en-
mre t&s virulent mur le l$tail africain.
La souche actuellemnt r@xmdue en Afrique, a stibi plus de six
cents passages sur chkre et peut être cnnsid&& comme fixse.
Ge plus, elle ne diffuse pas ccme la souche indienne.
Pkis les vaccins 2 virus caprinis& yrkcntmt les inconv&ent:3 :
- les rEactions pcst-vaccinales sont souvent fortes
<-
(Ndarna de Cuir&, Ankc~le Ct'Cu~anda, Tkhe..a du CmFc,
bovins am5lîoh3 iqwtiés cxi leurs cwimrmts. , , ) ,
- ext&iorisatims dqaffections latentes (Theileriose,
ccxxidiose, ysteurellcse etc...,.),
- maladies i.ntercurw.ntes chez les arGmux inccul.és,
ii1I18nunit6 conf6rée pm ce vaccin appax?aC,t tr& 223$3ement
et dure plusieurs vannées (au m3ins 5 ans).
2- Virus la@.nise
----m-v- -I-u-
Le virus peut infecter twtes les races de lapin, ixis les T?~US
jemes' (4mis'envimn) smt I:L!S ylus xGx?tifs.
Lsinoculaticn se fait ~k32 wit- IV et les animux sent sacri-
fi-& entre GO-70 hemes a@:s incculaticn.
Le vaccin reste quand m&w d'urie utiliwtiori prudente chez cer-
tabes races particüLi&3ment sensibles.
3 - Les virus aviani+
-.-..---.w-,--,,,-%b2
Le virus bcvipes%ique peut se cultiver sur I- -xx1 mbryonn~~ .
L'atttkuation est plus rfZguli&x lcrsquc le virus est txjcTurs
inccul6 par voisL intmvitelline que r~ar vc2i.z chrx%-allantcZ-
dienne.
l
LE VACCIN CONTRE L,A PESTE BOVINE
Par J. SARR"
-:..:-:-;-:-.-.
.,.
HISTORIQUE DES METY3ODES D'l34MJNISATION
Les premikws tentatives d'immunisation ont consisté en
une inoculation de bile fr,aîche d'animaux morts de peste par
les éleveurs boers en Afrique du Sud.
Cette méthode de vaccination se répandit 2 partir de 1897
en Afrique, en Extrême-Orient et en Europe.
Par la suite, plusieurs méthodes d'immunisations
furent
prkconisées donnant des résultats variables (tableau n"l>.
t Labor&oix national de lIElevage et de Recherches vétérinaires
DAKAR-&%IN.
-2
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KIZAKI - 1913 - awis 1
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SON et DELFY, 1926) -(
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VirusmdifiC : 1
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1 virus capri.nisG
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1 EDM/\\‘t7J?L, 1930) ; 1
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12) virus l.apinisC :
I
I
I (Nmm, 1933) ; 1
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I 3) virus avianisg
\\sLOFE et coll.,
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19!.!6) ;
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14) virus lapinis+a- I
vimisé (LA)
I
1 (NAQ~MuRi",., 1953) j 1
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15) vims F.P,R,n (MORt
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NET, GILBERT et
Sm7, 3.956) ;
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i 6) V&U~ en Culture l
I
l de tissus (PL& 1
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MlC3-R et FERRIS,
I
1957).
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4
I
I
(w> P.P.R. = Peste des petits ruminants.
-3
LES PRINCIPAUX TYPES DE VACCINS.
Les principaux types de vaccins utiZi&s dans la lutte contre
la peste bovine sont:
- les vaccins tués,
- les vaccins vivants.
A - LES VACCINS TUES
- pulpe splénique infectiie inactivée par la glycérine
- rate, ganglions, pomns traités au foml, au ph&wl,
au toluène ou au chloroforme.
Les inactivants corrnm! la glyc?&ine, le phénol et le toluène ont
l'inconv6nient d'être très tiitants par voie sous.cutanée et d'a-
voir un pouvoir bact&icide faible.
La valeur respective des pulpes vaccinales est par ordre dkcrois-
sant : znygdales, ganglions lymphatiques, rate, poumons. Le pou-
voir dogène des amygdales, selon Kakizaki et Nakamura, est une
fois et demie à trois fois plus élevé que celui des Tanglions lym-
phatiques.
- Pulpe d'organe forrrûl&e ou sapnisee et absûrb&e sur hy-
droxyde d'alumine (Jacotot). Ce vaccin est beaucoup plus
actif que les premiers.
Ces types de vaccins présentGent l'avantage
- d'avoir une valeur imnuniaante constante
- d'être a'une inrxxuité totale
- d'entrafiner une absence totale de rkction organique, ce
qui 6vite le r&ei:l des infections latentes, pxrticuliè-
rewnt fréquentes en 5%;ne tropicale (coccidiose, piro-
plasmse, trypanoso@ase etc......),
Leur p¶tion est ais&e,%. snnt tous aujourd'hui abandonnés
pour les raisons suivantes :
- le temps d'Établissement de l'ixmunité est long (plus de
12 jours),
- le prix de revient est élevé,
- le renderrent est faible,
- la durge de l'tiit6 est courte (maximum 6 m&),
- 4
B - LES VACCIIJS A VIRUS MODIFIES
l- Virus caprinisi.
u-4.."----* s..--..w-
Le virus caprinis6 fut mis au point pur l2 pwnière fois par
Edwards (1924-1925) par adaptatir?n du virue bwQ)estique à la
ch&re.
Ce vaccin fut utilisé avec :w.ccès en Inde, mais se rt%Sla cn-
tore tr&s virulent pur le titail africain.
Lt souche actuellement r@andue en Afrique, a subi plus de six
cents passages sur chèvre et peut être cnnsid&Ge comme fix&e.
Ee plus, elle ne diffuse pas c~nme la souche indienne.
Pais les vaccins 5 virus caprinisés p.GscntenC des incc~nv&ients:
- les Gactions pst-vaccinales sont souvent fortes
(b?dama de Cuir&, Pflkcle d'Cu?anda, Zahllrna. du Cznpc;,
bovins cimélior6s im~~rt&i ou leurs c%?isements...),
- ex-&iorisati~ns dPa.ffections latentes (Theilericse,
ccl(lllidicse, pasteurellcss etc.....).
- maladies intercurwntes chez les ~=zimau.x inccul.Gs.
L'-immunit6 conf'&$e ]:Id? ce vaccin appm.zTt ‘b?h ??ar)idement
et dure plusieurs années bu reins 5 ans?.
2- Virus lapinise
-----..a-- ---u-
La seule souctl2 vaccinale vul~~ariséc; est la XGX~XKE III. File
est consid6tie comme suffisamment ~tt&G:e leur la ~:z2upwt des
racés bovines et est constante &ans ses caract$res dq~G.s envi-
mn son DOOkme pa.sse~se sur lzyin.
Le virus peut infecter -tzutes les races de layin, m-Gs les r‘lus
jeunes' (4m.G' environ) sont d.~.s plus r&qtifis.
L'in~oculaticn se fait par vrit: IV et 1~s ;Inimaux sont sacri-
fi& entre GO-70 heures ap$s i.nc:culaticn.
Le vaccin reste ~EQ-K~ meme dvune utiliwtion prudente chez cer-
taines races particuli&ement sensihlcs.
3 - Lw virus avianisës
-.-ma----.‘..m.m------...--
Le virus bvipestiq,ue peut se cultiver sur 2~~euf embryw~.~~
.
L'atténuation est plus r$ulière lorqw le, virus est twj:‘.urs
inocul6 par voie intravitelline Que !-tar voiz chorio-allan-tc1-
- .-
dienne.
Beaucoup d'espoirs fuwnt placés dans la souche japonaise BA
puisque l'oeuf entier pouvait être utilisé comme prcduit vac-
cinal (237 passages).
Hais, ce vaccin prt?kente un certain nombre d'inconvénients :
le virus est difficile 2 mettre en évidence dans
l
l'oeuf (fixation du CT-ITS&~~~; irkwAA5on EU bovin
etc.,..).
.
la persistance G'G taux de virulence El& pour le
bovin, interdit son emploi chez des animux t&s sen-
sibles
la difficulté pour les laboratoires peu entraînés à
entretenir la souche,
L3 souche lapinisée-avianisée de Nakamra et Miyamto, confère
une solide irmunité tout en ftant rmins virulente que la'souche
lapin&e. Elle a pu être Utilis&e en Inde et au Japon sur des
mces bovines connues pow leur extrême sensibilité à la Peste
bovine.
.
VAUX?% A VIRLJS RODIFIES
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l Type
I
voie
I
Temps
d'ifwu? atiin
d"incubation
I
l
I
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caprinis6
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sec
1 3-1c jO- 1
lapinisé - 1
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1 60-70 heures1
avianisé
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scuche BA
I Intravitelline I
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CULTURES CELLULAIRES DE F;ZEMIERE'EXPiANTA'TION SENSIBLES ..
AU VIRUS BOVIPESTIOUE
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Origine
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- Rein foetal
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- Rein de veau
+
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Bovin
foetal
+
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- Testicule
+
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- Thyroi'd
+
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- Leucocytes
+
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- Rein foetal
+
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- Testicule
+
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Chevre
- Eei;i
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- Reln foetal
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Porc
- Rein de porc
nouveau-né
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- Cellules cmbryon-
Poulet
naires
+
+
Chien
- Rein
+
+
- Rein foetal
Lapin
- Testicule
- Rein de lapin
, nouveau-&
Hamster
- Rein
+
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Singe (c, aethiops) - Rein
+
+
- Cellules amnio-
Homme
tiques
+
LI GNEES CELLULA t RES SENS l BLES AU VI RUS BOV I PESTI QUE
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DEMI-Vi E OU VI RUS A DIFFERENTES TEMPERATURES DE CONSERVATION
APRES LYOPH l L I SA-Ï I ON
Support de tyophi I isation
- 2 0 ‘à 2TdC
+4 Oc:
+20 à 25OC
37OC
LAYE/OS .5
6 mois,
8 semai nes 1 semai ne
-
5 $ lactalbumine hydrolysat
4 - 5 mots
4 - 3 jours
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CULTURES CELLULAIRES DE FREMI ERE EXPLiiNT,~TIOti
%NS I BLES
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AU VIRUS BOVIPESTIQUE
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Déve I oppe-
E f f e t cytopa-
Origine
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+
+
- Rein de veau
+
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Bovin
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+
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- T e s t i c u l e
+
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- ThyroÏd
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- Leucocytes
+
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Mouton
- T e s t i c u l e
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Chevre
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- Rein foetal
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Poulet
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+
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- Rein foetal
Lapin
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- Rein de lapin
1, n o u v e a u - &
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Hamster
- Rein
+
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(C, aethiops) - R e i n
+
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Singe
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Homme
fi ques
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LIGNEES CELLULAIRES SENSIBLES AU VIRUS BOVIPESTIQUE
Iffet cytopa-
Origine ceII~,!aire
Développe-
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Appellation
ment
thogène
Teiefn de bov,in
MD3K
?ein de porc
P K
?ein de Hamster
BHKZI-Cl3
Zellules néoplas iques
iumaines
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+
+
hein de singe
MS/VERO
+
+
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I
1
1
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Plowright et Ferris
(1952 - 1962)
I
I
I
1Isopi (1.961) .. ..
1 Rein de bovir,
. i T i +(*) / -I-- ..i, ,f j ,,..
I
Testicule de bovin
,:JT
1:
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Rein de lapin
NT
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Fibm~~1mte-s de ~:OU- ,
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I Tokuda et ail.
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(1.962)
1 leucocytes de bovin 1 N:I? /
+ 1 -
, ?dT 1
t
--l_.---. I
I 143kamura (1965)
Rein de chien
1 t.)* l + t + t Njy t
1
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1
l t
I
NT = non test&
(w> = sur cellules embryonmires seulement.
DEMI-VIE DU VIRUS A DIFFERENTES TEMPERATURES DE CONSERVATION
APRES LYOPHILISATIOh'
Support de lyophilisation
-20'3 2T°C
+4v
+20 à 25OC
37OC
LAYE/OS.T
6 mois
8 semaines
1 semaine
-
5 % lactalbumine hydrolysat 4-5 mois
-
4 - 3 jours
Demie-vie du virus à différentes températures
de conservation
Millet de conservation
6OOC ,
%OC
3FC
25oc
4-7oc
- Fkte/ganglions de bo-
vin infectG
5ml-l
105 mn
6, 4 heures
2, 3 jours
- Sang de bovin infec-
té
s?nn
21 heures
36 hemes
2, 3 jours
- Laye/os,5
3, 5mn
165 mn
9,2 jours
kye/OS. 5 = 0,5 % lactalbumine hydmlysate, 0,1 % yeast extract en tampon Parle 5 B sérum de veau
-7
C - VACCINS SUR CULTURES CELLULAIRES
Le vaccin hovipestique sur cultures cellulaires fut obte-
nu à partir de la souche sauvage Kabete 0 de Plowright et Ferris en
1957.
Ce vaccin est supérieur Zï tous les autres cités plus haut sur
la plan de l'innocuité pur toutes les espèces animales auxquelles le
pxddit peut être destiné :
Nous traiterons successivewnt :
de'la propreté et de la st&ilité du matériel,
des cultures cellulaires destinées à la production,
des souches vaccinales de virus,
des produits biologiques entrant dans la fabrication du
vaccin,
des contrôles du produit final,
des conditions de stockage et de distribution.
l- Progreté et stérilité du rnat&iel
e-w -__---------I-_--------------
la verrerie
l
. la st6rilisation du materie
. le stockage du matériel st&ile.
2- Cultures cellulaires
.s------------------...
Deux types de cellules peuvent être utilisés
- les reins de foetus ou de veau nouveau-né
-'les cellules vero.
a) cellules de rein de foetus bovin ou de veau
xcultures primaires
K cultures secondaires
Pour ces types cellulaires, il est indispensable d'éviter
toute manipulation qui pourrait avoir comme conséquence une
rrodification de la morphologie et du caryotype dsorigine.
b) cellules de lignée vero
. banque de cellules
. de contrôle de contamination par d'k&res virus ou myco-
plasmas à chaque étape du processus de ptititi
-8
. conrrôle de la sensibilite au virus pc?-r rctpport 2 1;: col-
lection d'orkine
chan,p,er de collection dès que le besoin se fait sentir.
l
3- Les souches vaccinales
----------c---------I_
carte d'ickntit6 de 3.2 .souche
La souche RPKO de FJlowri$tt et Terris est. la p1.u~ r@andw.
Son innocuitiZ totale et suri haut pouvoir immu.n~@ne sont
stables entre le 9@me rt le 122ème pzE+~es,
Système de lots de semence avec un ti~tre minimum de 105
DICT 5cI/ml.
Système de conservation : ,> des tep&Murcs inf<ri:zures
3 -30°C, les souches se conservent sans v?riation si..@-
ficative du titre pendant au moins 5 ans.
4 - E?nsduits biologiques entrant cknç la pwkction
-..---------e-..
-~-------------------'
m--s.----.-
. Le s&rum : le s&um doit &re exempt dz tout inhibitcur de
la croissance du virus.
Les concentrations doivent
tarder 1'ECP.
. LES milieux de cultures
I_'
5 - F%duction de virus-vacc!-n
--------------------____I_
Voir fiches techniqii~:;s
l
T&oins ctillules
l
Ces cellules tikzins doivent ?tre conservks w zwins 7
joua q.rès la r&.2olt:: C~CL: bo3xs inoculCes avec 1.i: virus ,
Inoculaticns à t&s 113ute multi$i.cit+ d'infection.
l
5 - CW&rGle du produit final
. . ..---e---w--- ---e--1-11--
. st&ilitC
. D&termination de la t~~ncur en virus.
La teneur en virus de clxq- lot de vaccin y compris le
lot de semence est r%lisc par au mins deux titra~cs sur
cellules d'origine 'bovine ou sur liyn& vero.
. . /. .
-9
. Sécurité d'emploi
Necessaire seulement sur le lot de semence qui, conserv6 à- une
temp&ature inf&ieure à -3OOC peut se conserver sans variation
de titre pendant au moins 5 ans.
Pour cela utiliser au rxG.ns une dizaine de flacons pris au hasard
à raison de 500 x 102,5 DTCT 50.
Les animaux sont gard& en observation pendant 3 semaines.
Le pouvoir pathogène résiduel du.virys,pwyra *etre évalué par
l'ampleur des réactions post-vaccinales.
Son pouvoir de diffusion sera appréci6 par,une Épreuve sériologique
chez les animaux témoins.
. Test d'efficacit6
. Epreuve de stabilité thermique
Détermination des conditions optimales de stabilité du virus
(pH, température, conservation du vaccin lyophilis6 ou rkonsti-
tu&, etc...).
Conditions de stockage et de distribution
- Etiquetage
- Conditions de stockage avant et apr& reconstitution
- Date limite d'utilisation.
. . /. ..*
- 10
En résum6
Tout vaccin mis 2 1~: dis~x.i-cî.on dc?s utilisateurs doit avoir un tit:re
suffisant et '&Y! I&n tolbé pm les animux auxquels il est destiné.
Souches
I Dxe minimzle rk3.r
Rkctions pst-
l
I
arrima1
vaccinales
1
I
i-i-f
I
1 Izipinisé Mka.m.ra III) ] 10297 RID 50
I
-t
I
1
I
I
1
Av.iani&
103 EID 50
l
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I
,++
I
I Culture cellulaire
lo2,5 DICT 50
nulles
I
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I
I
I
I
I
I
1
ANVEXE
- Tissupeste
- Bisec
- Fiches d'utilisaticm
- Milieux de cul-hxres cellulaires
- Sqqmrt de lyophilisxtion.
. . . / . . .
- 11
Pour en savoir plus
1 - MAC LEOD (N.G.1, EVANS (S.A.), SCOTT (GJ?.>, 1957. Bull. Epi~. Afr.
5- 313,
2- Méthodes de production et de contrblë des vaccins bvipestiques,
caprinisés, lapinisk et avianisés,
Rapport comité d'expert de standardisation biologique.
S&e des mgmrts techniques no 444 p. 42-57, 1970.
- 12
VIRUS-VACCIN ?X CUL'I'URE CI:LLUIJJRE CONTRE LA IXSTE BOVIW 0Iom de code :
Tissupeste)
On utilise la souche Kabete 0 a.tt&-&k -ar 60 passages sur cultures
rénales de première explantatian d'embryon de veau.
Le vaccin est constitug pzr le liquide nutritif des cellules infectées.
PrGparation
On se sert d'une culture confluente de cellules renales dvembryon de
veau obtenu aprè s tqpsination des cellules $ithcliales et culture en
boîte de Roux 3 l'ktuve à 37OC.
La souche virale est Inocul~e à raison de 2 2 5 ml nar 'boîte..
Lorsque le tapis cellulaire est dGtru-i.t 2 80 %, les boîtes sont
congelées 3 -25OC.
Après déccngGlation,
les dGbris cellulaires sont &imin& par centri-
fugation.
On utilise une solution de Hark7s contenant 10 % de saccharose
(H. B.S.S.S.) et 20 4 de lait &x&& en poudre comme support de lyophilisa-
tion à raison de : - 1 parkie de liquide de culture
- 1 partie de H. B.S,S,S. - lait &rGm?.
Le m&npe est r+arti en flacons de typ-.t? ;-Gnicilline à raison de 1 ml
par flacon (50 doses), puis I.yophilis~, I;I, conservation se fait au congéla-
teur a -15OC.
Contrôle de purete
Le contrXe de st<rilité se fait avant et aprks lyophilisation (sur le
vaccin reconstitué) sur bouillon d.c culture et sur ,$lose ~rofondc; mis à
l's-tuve à 37OC pendant 72 heures.
Le titrage est ;:ffectuG après lyophilisation sur tubes de culture
cellulaire de rein d'embryon de veau. Le titre minimum doit *rstre de 10235
unités infectantes 50 p.100 (m&thGde de FED et IWENCH) par ajose
vaccinale.
- 13
Testsd'innccuité et d'efficacité
Une %Preuve de séwrite d'emploi chez les bovins est effectu6e sur
chaque lot de semence (une dose,de,vaccin est inoculée par voie sous-
cutanée à 2 bovins qcli sont mis enobservation pendant trois semaines
durant lesquelles aucune tiaction pathologique ne devra intervenir>,
Les 26bus ne p&sentent aucune m'action. l?arfois une légere fièvre
transitoire et un peu de larmoiementpeuvent *être observés chez certains
taurins particulièrement sensibles .@Jdaxa); t
"
Les tests d'efficacite sont effectués tous les 2 ans à partir de
semence (constitue par la souche Conserv&e à -7OOC) sur deux bovins dont
l'état de sensibilite a @té con-tr@l~ par séroneutralisation ; chaque animal
reçoit une dose vaccinale.
15 jours apr;js, on fait une prise de sang afin de contrôler ultérieuremmt
,
la présence d'anticorps neutralisants ;
. .
les animaux sont ensuite éprouvés
avec 1 000 DICT 50 de la souche sauvage DK (Dakar) inoculés par voie sous-
cutanse ; ils sont alors gardés en observation durant un m3is afin de con-
trôler l'absence de toute r6action clinique,
La du&e de l'immunit? pcst-vaccinale dcyasse largement un ran mais
il est recommandé de vacciner chaque anné.e successivement pendant 3 ans.
.
. . ./ . . .
FWWS R.S.S.S(pmr 10 litres)
Fl - Chlmwe de sodium.........................
8@ F
chlonlrc de ptasçiu?n .....................
4 g
Sulfate de rmp&.um ......................
'2 g
Em Q.S. pxlr ............................
4m cc
A2 - Chlorure de calcium . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1,85 F
Em Q.S. parr .**.*,e...,......*....*....
50 cc
I&langer Al et A2 et ajuster 2 500 cc.
R- FIxx~hate discdique 12 f-I20 ....,O,.,.....
1,85 ,T
Phosphate mx-iopxtassique . . . ..*........o.
0,6 f?
Dextrose .*.,.....*.*.....*....*..Q......
19 g
Eau QS. pmr . ..*......*.....*..**....*.
500 cc
%%X$'W Al ) A2 et B ap& stérilisatinn de chacm :
%09 à llO-1150.
c- Bicarbonate de scdium ..,...O...,........
3,5 g
Rouge de ph&wl ."............S...,,.....
n,z g
E?m Q.S. pxlr .
..*.........*...**o.....*.
250 cc
Ajuster le m&nge de 41 , A2 et F-3 c7 10 litres et c~outer
la solution C.
Ajouter : Saccharose 19 3.
I?ki.c51line .........................
1 000 000 I!*I.
Streptomycine .......................
18
Filtrer sur Seitz.
Ncm de l*op&ateur ..........................................
mtê ........................................................
Filtration ........................
lxte ....................
Remrqws ...................................................
J.-JANG L&T (mur 10 li-hxs)
A - Chlorure de sodium . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
80 F:
Chlomre de -tassium . . . . . ..*...*......
4 g
Sulfate de magnésium ...,.,........O,..,
2 ,g
Em bidistillée Q.S. ?our . . . . . . . . . . . . ..l 000 cc
ikltoCl~VeF 20 nm 3 llS* pendant 20 mn.
.
B - Hydrolysat de lactalbumine
. . ..*..t....*
50 f?
Phosphate discdique l2H20
. . . . ...*.....
132 g
Eu Q.S. pour . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..s.. 1000 cc
Autoclaves 20' à ll,+*C
C - Phosphate mnopotassiq,ue *..*...a.......
036 R
Dextrose .*...,..................*.*....
1.0 g
1
,!
'-
Eau Q.S. pour .*....,.*.,.......*....*..
500 cc
&.xtoclaver
_
20' à Il+
D - Bicarbonate de sodium . . . . . . . . . . . . . . . ..~
3,s e;
Rouge de ph&ol . . . . . . . . . . . . . . . ..e......
$2 P
Dissoudre le bicarbonate dans la plus petite quantité d'eau
wssible. Ajouter le roule de phéncl. A.giter fr6querrment.
Compléter le volme à 250 cc.
E - Chlorure de calcium 2H20 . . . . . ..o..*.*.
1,85 g
Eau Q.S. pour ..*................,......
250 cc
Autoclaver 20' à 115O
F - Extrait de levure DIFCO . . . . . . . ...**....
10 i?
Eau Q.S. pour . . . . . . ..*.............m...
11
P6Lanl;rer avec la solution D et filtrer sur Seitz
Autoclaver A, B, C, D, E et F et filtrer sur Seitz. Avant fil-
tration, ajcuter p6nicilline : 1 000 000 1J.I.
Didro~cine : 1 g
Date ...................................................
Nom de lsop&atew .....................................
-Filtration ............i......i ..... Ikte .......... .......
Remarques *.....*........*.*.*.........*.................
KILIEIJ HYY: - YEARLE ENRICHI J?OUR CFLLULES
VIZRO ET MS
1 - PREPARER MES SOLUTIONS SIJIV~NTES POUR 3.0 .I:ITRES DE II'ILIEIJ
.
I
Solution A
Chlorure de sodium *......*.........*0....
58 q
Chlorure de potassium .
..*.*...*...o*.....
1+ CT
Chlore de calcium 2H20 ..*...........,.
2,SG ,g
Sulfate de rra,qnésium 7H20 ..eO.,....e....,
2F
%u bidistillée st&ile . . . . . . . ..*...0..." ,500 ml
II
Solution B
Phosphate mr;nosodique 2H20 .,,......e,....
1,4 fY
Glucose . . . . . . . . . . . . . . . . ..*....*..*....... 10 g
EU bidistillée stérile ,.....,.....~,.,.. 500 ml
Solution C
Bicwbonate de scdium .*..*.........0*....
16,75 !?
Rouge de phknol .
..O........**.*..ee....*.
0909 R
Eau hidistill& .st&-ile . . . . . . . . ..*.e*.... 350 ml
Solution D
Yydmlysat de lactalbumine DIX0 .0.*.....
SO q
Yeast extract DIFCO . . . . ..*..o......o.....
1 .fT
Eau bitiistillée st&ile . . . . . . . . . . D . . . . . ..'830 rd
II - fUOCrT+ER A D LE3 SOLUTIONS A, B, C
,
Solution E
L.
Glutamine
'
.*...*..**.....*..*..,*......
1 !?
.Acide 1,. glutamiqpe ..*...................
3. p
L. M&hionine . ..*...................*.*..
1,s fT
. . .
L. Argininine khlohydpate
. . . . . . . . . ..a....
0,4 g'
,.s
Acide foli$e "
..s..............,.....*.*..
0,01 0:,
Biotine
.
.'
..*.........*..........**o......e
0,Ol g
Eau
bidïstillk
"
. .."...................... 350 mi'
.
IV - AJOUL'ER E A Lp13'TSEl%L;E:
V - ANTIBIOTIQ~ : RhiciUine : 2 millions, Streptomycine i ,2 gros.
VI- FILT'CRSUR~.
.
_.
.
OBSERVATIONS ...............................................
OPERATEUR ..................................................
SOLUTION DE MIST DESSICANS
A - Tampn sorensen
I- Phosphate discdique déshydrata
............
9,5 g
Eau bidistillée
...........................
1 000 cc
II - Phcsphate rry-inopctassicpe dkhydr:iti
a...o*.
9 , 1. g
E&u bidistillée
*......,.,...o**.,.*....*..
1 0-m cc
I‘~&n,p.zr : 545 cc de 1 et 50 cc de II
Autoclaver 33 k3 à 120°C.
1
. I
Remarque : Si'cni emploie du NazHpOk,
2H20, *eser 11 ,rr nû ~Lieu de 9,s g
Si cri emploie du Na2HPO )+, 12H20, peser 2~?,95 y snEt preque 24 g.
3 - Mist dessiczns
I- Tzqpn swensen ...........................
250 cc
Lxtose ...................................
70 g
I-JydXjlgTsat de lactalbumine
................
20 l.5
13issoudre à chaud.
II - Skvm d&zomplémentC
..*.,*.0..*"T..........
750 cc
IGlanger I et II: lorsque 1 est r&r+.dj.
riltrer sur Seitz 2 litres,
Le mist dessicans est uti.lis& wrme suTTort de .1~7cphi.lis~xtim
au ccwrs
de la p&watictn du vaccin peste bovins p&~~x& sur cultwes de -tissu à
raison de : 1 partie de liqxide virulent
1 partie de mist dessica.ns.
TISSUPEST
Vaccin contre la peste bovine
la peste des $hits ruminants
@ Souche vaccinale :
ter les flacons dans
du sable ou de la
Virus Kabete 0 atténué
sciure hurnc:ctlhr> (~1~
par passages sur cultures
dc Ics mninfc~nlr il
cellulaires.
l’ombre.
0 Préseytation :
e Dilution :
Vaccin lyophilisé cn fla-
con de 5 ml - !XI clo5t?s t,;rr
licxxxv,ti tut1
Ic
v,r( (, it 1
flacon.
clans 50 rnl de dilu~tll5.
L e s d i l u a n t s à utilis,cr
* Conservation :
wnt :
- A
u
congelateur
-
1 5 ° C m i n i m u m :
conwrvatior I rk: I r-t5
longue durée : 1 ZI 2
ans.
A u refrig6r~rtcur
-l
4” C : 1 mois.
Dans le c a s de rup-
rut-c de chnînct d
u
froid sur le terrain
le vaccin peut être
conservé sans perte
+ Dose A utiliser et mode
d’activité à la tem-
d’administration
:
pérature
maximale
de 35” C pendant 1
1 ml de vaccin reco>sti-
semaine.
tué par ‘la voie sous-cuT~w%
Pour é v 1 ter tout
chez les bovins âgés de plus
échauffement, il est
de 6 mois quelle que soit la
recommandé de pla-
r a c e .
- - .__-__-_--_ .-.._” ..-.. _ _ ._ .._. _..
.
..___. _-._- ___... -.. . -__, _._-
.I.
.
, .
@ Réactions post - vaccina-
Dans les conditions d’éle-
les :
vage en milieu tropical, il
est recommandé de procé-
- Chez les zébus, pas
der chez les primo-vaccinés
de réaction notable.
4 l a v a c c i n a t i o n d u r a n t 3
- C h e z l e s t a u r i n s :
années consécutives.
on note parfois une
fièvre lkgère et du
larmoiement.
* Vaccinations associhes :
Peut être associé avec la
* Immunité :
vaccination anti - peripneu-
Apparition : 8 jours après
monique
(Tl
lyophiiisé,
la vaccination.
KH3J. lyoph/lisé).
Durée : plusieurs années.
2 ans au minimum.
8 Remarque :
Le vaccin peut être utili-
I, Indications :
sé dans les mêmes condi-
Prévention de la peste
tions pour la prophylaxie
bovine chez les zébus et tes
médicale de la peste des pe-
taurins âgés de plus de 6
tits ruminants chez les ovins
mois.
et les caprins.
BISEC
Vaccin mixte contre la peste bovine
et la péripneumonie
0 Souche vaccinale :
conserver à la icm-
Peste bi;virw : vi rus
Kabete 0 vivant atte-
nué par passages sur
cultures cellulaires.
- Péri pneumonie : sou-
che Tl vivante att&
r.~uCc* I~I r.lrlliv(!t* ‘,111’
LJ<JUill~,il.
@ Prkmtation :
Vaccin lyophilisé en fla-
I) Dilution :
cons de 20 ml - 40 doses
,
par flacon.
.
Reconstituer le vaccin
dans 40 ml de diluant :
-
0 Conservation :
Les diluants prescrits
snnt :
- A u congéiatcur < -
. I
15°C meinimum:
- le sérum physiotogi-
conservation de très
que normal (8 g de
longue durée : 1 à 2
c h l o r u r e dc wnium
ans.
p o u r 1 iii-w d”aau
- A u r é f r i g é r a t e u r +
distil’lée),
4” C, pour quelques
- fa solution m o l a i r e
semaines.
de sulfate de ma-
;’
Dans le cas de rup-
gnésium (246 g de
ture de chaîne du
sulfate de magné-
froid sur le terrain
sium 7 H2 0 pour 1
le vaccin peut se
titre d’eau distillée).
.
-_l_-l--.
- _ - _ - _ _
_ - _ . _ . -
.-
-
- . . _ . -
_..
_ --_“._.
- - - - . -
--__
-_
.
, .
.
.
/’
/’
* Dosa B utiliser et mode
I,r lylotirrt! oil Itt fi0
d’administration :
varsCnoben WI
Les
Itnu~~~~~~~~x t ,i 11 t i n 0,
1 ml I%II IL) WJic! ‘,OWp CL.1
doivent donc Ctro
tanée au tiers supérieur de
c~x;iminés 2 à ; SC’
la côte de vaccin rcconsti-
maines après la vac-
tué quelle que soit la race,
chez les bovins âgés de plus
cination.
de 6 mois.
r) Immunité :
- Apparition 8 jours
0 Réactions post - vaccina-
après la vaccination
les :
pour les 2 maladies.
- Durée :
- Chez les zébus : pas
de réaction notable.
- peste bovine : 2
ans minimum.
- Chez les taurins ou
- péripneumonie :
animaux métis : il
peut apparaître dans
1 an.
quelques c a 5 des
œdèmes locaux sans
r) Indications :
‘
incidence sur l’état
Vaccin convenant parfai-
général de l’animal.
tement pour les campagnes
Exceptionnellement,
de prophylaxie dans les ré-
ces reactions peu-
gions air cocxicient à des
vent devenir alar-
degrés divers la peste bovi-
r
mantes, Elles cèdent
.
ne et la péripneumonie ou
alors a u traitement
~~~~nlernent rfnns dos &y;ion:,
par ta spiramycine,
menacees.
: ,
REP1IBLIQuE DU SENEGliL
-.w---------
MINISTERE DE IARECEIERCHE
SCIE.NTIFIQUE EiT TECHNIQUE
-----------
INSTITUT SENEW~LAIS DE EUXJ-lERCfXS
AGRICOLES (1.S.R.A.)
LABORATOIRE NATIONAL DE L'BLEVAGE
ET DE REtX!ZRC~S VETERINAIRES
DAKAR-HANN
LE VACCIII CONTRE LA PESTE BOVIYE
-'-:-:-'-.-
.
. .
Par J, SARR
REF. No 89/VIRO.
OCTOBIIE 1983
LE VACCIN CONTRE LA PESTE BOVINE
Par J. SARR*
-:..*-:-:..:...-
.
.
HISTORIQUE DES MEZ3ODES D'IMMUNISATION
Les premières tentatives d'immunisation ont consisté en
une inoculation de bile frakhe d'animaux morts de peste par
les éleveurs boers en Afrique du Sud.
Cette méthode de vaccination se répandit à partir de 1897
en Afrique, en Extrême-Orient et en Europe.
Par la suite, plusieurs méthodes d'immunisations furent
préconisées donnant des résultats variables (tableau n*l>.
w Laboratoire national de 1'Elevage et de Recherches vétérinaires
DAKAR-~.
-4
B - LES VACCIIJS A VIRUS MODITIES
l- Virus caprini.sÉ
"u-I---e LI--".I
Le virus cap7xinisé :Fut mis au point ~32~7 1\\3 preGm fois p3.r
Edwards (1924-1925) pm adaptaticn du virus bwi~estique à 13
chkre.
: '
Ce vaccin fut utilisé avec :;uccès en Inde, rmis se tiv~?la en-
mre t&s virulent mur le l$tail africain.
La souche actuellemnt r@xmdue en Afrique, a stibi plus de six
cents passages sur chkre et peut être cnnsid&& comme fixse.
Ge plus, elle ne diffuse pas ccme la souche indienne.
Pkis les vaccins 2 virus caprinis& yrkcntmt les inconv&ent:3 :
- les rEactions pcst-vaccinales sont souvent fortes
<-
(Ndarna de Cuir&, Ankc~le Ct'Cu~anda, Tkhe..a du CmFc,
bovins am5lîoh3 iqwtiés cxi leurs cwimrmts. , , ) ,
- ext&iorisatims dqaffections latentes (Theileriose,
ccxxidiose, ysteurellcse etc...,.),
- maladies i.ntercurw.ntes chez les arGmux inccul.és,
ii1I18nunit6 conf6rée pm ce vaccin appax?aC,t tr& 223$3ement
et dure plusieurs vannées (au m3ins 5 ans).
2- Virus la@.nise
----m-v- -I-u-
Le virus peut infecter twtes les races de lapin, ixis les T?~US
jemes' (4mis'envimn) smt I:L!S ylus xGx?tifs.
Lsinoculaticn se fait ~k32 wit- IV et les animux sent sacri-
fi-& entre GO-70 hemes a@:s incculaticn.
Le vaccin reste quand m&w d'urie utiliwtiori prudente chez cer-
tabes races particüLi&3ment sensibles.
3 - Les virus aviani+
-.-..---.w-,--,,,-%b2
Le virus bcvipes%ique peut se cultiver sur I- -xx1 mbryonn~~ .
L'atttkuation est plus rfZguli&x lcrsquc le virus est txjcTurs
inccul6 par voisL intmvitelline que r~ar vc2i.z chrx%-allantcZ-
dienne.
l
LE VACCIN CONTRE L,A PESTE BOVINE
Par J. SARR"
-:..:-:-;-:-.-.
.,.
HISTORIQUE DES METY3ODES D'l34MJNISATION
Les premikws tentatives d'immunisation ont consisté en
une inoculation de bile fr,aîche d'animaux morts de peste par
les éleveurs boers en Afrique du Sud.
Cette méthode de vaccination se répandit 2 partir de 1897
en Afrique, en Extrême-Orient et en Europe.
Par la suite, plusieurs méthodes d'immunisations
furent
prkconisées donnant des résultats variables (tableau n"l>.
t Labor&oix national de lIElevage et de Recherches vétérinaires
DAKAR-&%IN.
-2
.
l
PMsIVE
l
ACTIVC
I
NIXTE
I
CROISE
l
I
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-_I_<__ -,.. . . . . L. --
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I
I
I
Skx-infection
{&X,I,X et TURNER~l398)~ I
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l
I
I
l
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f
jVac&x pulpe-
@
_
d.'or- 1
I
I
1
gms inacti.vks (KA-
KIZAKI - 1913 - awis 1
!
1
I
SON et DELFY, 1926) -(
l
I
l
+ gel dlalumine'&JA-
I
I
!
I
COTOT, 1940)
I
1
I
1
I
l
Shy-vaccimtion 1
I
I
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I
I
l
I
I
I
l
!
VirusmdifiC : 1
I
'1)
1 virus capri.nisG
WHEIN, 1926 - i
l
1 EDM/\\‘t7J?L, 1930) ; 1
l
12) virus l.apinisC :
I
I
I (Nmm, 1933) ; 1
l
I 3) virus avianisg
\\sLOFE et coll.,
I
l
I
19!.!6) ;
l
I
14) virus lapinis+a- I
vimisé (LA)
I
1 (NAQ~MuRi",., 1953) j 1
1
15) vims F.P,R,n (MORt
I
I
NET, GILBERT et
Sm7, 3.956) ;
1
,
1
-.
1
.I
i 6) V&U~ en Culture l
I
l de tissus (PL& 1
‘1
’
,i
. 5
I
l
MlC3-R et FERRIS,
I
1957).
l
I
1
1
i
I
\\I
4
I
I
(w> P.P.R. = Peste des petits ruminants.
-3
LES PRINCIPAUX TYPES DE VACCINS.
Les principaux types de vaccins utiZi&s dans la lutte contre
la peste bovine sont:
- les vaccins tués,
- les vaccins vivants.
A - LES VACCINS TUES
- pulpe splénique infectiie inactivée par la glycérine
- rate, ganglions, pomns traités au foml, au ph&wl,
au toluène ou au chloroforme.
Les inactivants corrnm! la glyc?&ine, le phénol et le toluène ont
l'inconv6nient d'être très tiitants par voie sous.cutanée et d'a-
voir un pouvoir bact&icide faible.
La valeur respective des pulpes vaccinales est par ordre dkcrois-
sant : znygdales, ganglions lymphatiques, rate, poumons. Le pou-
voir dogène des amygdales, selon Kakizaki et Nakamura, est une
fois et demie à trois fois plus élevé que celui des Tanglions lym-
phatiques.
- Pulpe d'organe forrrûl&e ou sapnisee et absûrb&e sur hy-
droxyde d'alumine (Jacotot). Ce vaccin est beaucoup plus
actif que les premiers.
Ces types de vaccins présentGent l'avantage
- d'avoir une valeur imnuniaante constante
- d'être a'une inrxxuité totale
- d'entrafiner une absence totale de rkction organique, ce
qui 6vite le r&ei:l des infections latentes, pxrticuliè-
rewnt fréquentes en 5%;ne tropicale (coccidiose, piro-
plasmse, trypanoso@ase etc......),
Leur p¶tion est ais&e,%. snnt tous aujourd'hui abandonnés
pour les raisons suivantes :
- le temps d'Établissement de l'ixmunité est long (plus de
12 jours),
- le prix de revient est élevé,
- le renderrent est faible,
- la durge de l'tiit6 est courte (maximum 6 m&),
- 4
B - LES VACCIIJS A VIRUS MODIFIES
l- Virus caprinisi.
u-4.."----* s..--..w-
Le virus caprinis6 fut mis au point pur l2 pwnière fois par
Edwards (1924-1925) par adaptatir?n du virue bwQ)estique à la
ch&re.
Ce vaccin fut utilisé avec :w.ccès en Inde, mais se rt%Sla cn-
tore tr&s virulent pur le titail africain.
Lt souche actuellement r@andue en Afrique, a subi plus de six
cents passages sur chèvre et peut être cnnsid&Ge comme fix&e.
Ee plus, elle ne diffuse pas c~nme la souche indienne.
Pais les vaccins 5 virus caprinisés p.GscntenC des incc~nv&ients:
- les Gactions pst-vaccinales sont souvent fortes
(b?dama de Cuir&, Pflkcle d'Cu?anda, Zahllrna. du Cznpc;,
bovins cimélior6s im~~rt&i ou leurs c%?isements...),
- ex-&iorisati~ns dPa.ffections latentes (Theilericse,
ccl(lllidicse, pasteurellcss etc.....).
- maladies intercurwntes chez les ~=zimau.x inccul.Gs.
L'-immunit6 conf'&$e ]:Id? ce vaccin appm.zTt ‘b?h ??ar)idement
et dure plusieurs années bu reins 5 ans?.
2- Virus lapinise
-----..a-- ---u-
La seule souctl2 vaccinale vul~~ariséc; est la XGX~XKE III. File
est consid6tie comme suffisamment ~tt&G:e leur la ~:z2upwt des
racés bovines et est constante &ans ses caract$res dq~G.s envi-
mn son DOOkme pa.sse~se sur lzyin.
Le virus peut infecter -tzutes les races de layin, m-Gs les r‘lus
jeunes' (4m.G' environ) sont d.~.s plus r&qtifis.
L'in~oculaticn se fait par vrit: IV et 1~s ;Inimaux sont sacri-
fi& entre GO-70 heures ap$s i.nc:culaticn.
Le vaccin reste ~EQ-K~ meme dvune utiliwtion prudente chez cer-
taines races particuli&ement sensihlcs.
3 - Lw virus avianisës
-.-ma----.‘..m.m------...--
Le virus bvipestiq,ue peut se cultiver sur 2~~euf embryw~.~~
.
L'atténuation est plus r$ulière lorqw le, virus est twj:‘.urs
inocul6 par voie intravitelline Que !-tar voiz chorio-allan-tc1-
- .-
dienne.
Beaucoup d'espoirs fuwnt placés dans la souche japonaise BA
puisque l'oeuf entier pouvait être utilisé comme prcduit vac-
cinal (237 passages).
Hais, ce vaccin prt?kente un certain nombre d'inconvénients :
le virus est difficile 2 mettre en évidence dans
l
l'oeuf (fixation du CT-ITS&~~~; irkwAA5on EU bovin
etc.,..).
.
la persistance G'G taux de virulence El& pour le
bovin, interdit son emploi chez des animux t&s sen-
sibles
la difficulté pour les laboratoires peu entraînés à
entretenir la souche,
L3 souche lapinisée-avianisée de Nakamra et Miyamto, confère
une solide irmunité tout en ftant rmins virulente que la'souche
lapin&e. Elle a pu être Utilis&e en Inde et au Japon sur des
mces bovines connues pow leur extrême sensibilité à la Peste
bovine.
.
VAUX?% A VIRLJS RODIFIES
_-_.-- -..
l Type
I
voie
I
Temps
d'ifwu? atiin
d"incubation
I
l
I
l
caprinis6
l
sec
1 3-1c jO- 1
lapinisé - 1
I V
1 60-70 heures1
avianisé
I
I
I
I
1
l
scuche BA
I Intravitelline I
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1
lapin%-
1
I
I
I avianisé
I
s.c
I
3
i oeuf entier 1
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I
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l
l
I
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I
I
I
I
I
I
I
I
I
1
I
I
l
I
l
I
I
l
I
I
I
I
.
.
CULTURES CELLULAIRES DE F;ZEMIERE'EXPiANTA'TION SENSIBLES ..
AU VIRUS BOVIPESTIOUE
.
.
.
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. . I
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.-
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D&&‘l~p+C"" Effbj-‘cytopa-
Origine
Tissu
ment
thogène
- Rein foetal
+
+
- Rein de veau
+
i-
nouveau-&
- Muscle pcaucier
Bovin
foetal
+
f
- Testicule
+
+
- Thyroi'd
+
ç
- Leucocytes
+
+
- Rein foetal
+
4.
bu-ton
- Testicule
+
f
Chevre
- Eei;i
+
+
.
_-
. . <
<.
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. . .
.<. .:.
- Reln foetal
+
+
Porc
- Rein de porc
nouveau-né
+
-I-
- Cellules cmbryon-
Poulet
naires
+
+
Chien
- Rein
+
+
- Rein foetal
Lapin
- Testicule
- Rein de lapin
, nouveau-&
Hamster
- Rein
+
-i-
Singe (c, aethiops) - Rein
+
+
- Cellules amnio-
Homme
tiques
+
LI GNEES CELLULA t RES SENS l BLES AU VI RUS BOV I PESTI QUE
.....-~
_ __~.-.-
~-
_. ~~..
-..--
DEMI-Vi E OU VI RUS A DIFFERENTES TEMPERATURES DE CONSERVATION
APRES LYOPH l L I SA-Ï I ON
Support de tyophi I isation
- 2 0 ‘à 2TdC
+4 Oc:
+20 à 25OC
37OC
LAYE/OS .5
6 mois,
8 semai nes 1 semai ne
-
5 $ lactalbumine hydrolysat
4 - 5 mots
4 - 3 jours
_,.
._
. .,
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CULTURES CELLULAIRES DE FREMI ERE EXPLiiNT,~TIOti
%NS I BLES
~”
.
AU VIRUS BOVIPESTIQUE
.
.
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I.
.
Déve I oppe-
E f f e t cytopa-
Origine
Tissu
ment
thogène
- Rein foetal
+
+
- Rein de veau
+
4-
nouveau-n6
- Musc1 e peaucier
Bovin
foeta l
+
+
- T e s t i c u l e
+
4
- ThyroÏd
+
+
- Leucocytes
+
+
- Rein foetal
+
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Mouton
- T e s t i c u l e
+
-t
Chevre
- Eei ;I
+
+
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1..
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.
.
- Rein foetal
-b
-b
Porc
- Rein de porc
nouveau-ne
+
+
- C e l l u l e s embryon-
Poulet
na i res
+
+
Chien
- Rein
+
+
- Rein foetal
Lapin
- T e s t i c u l e
- Rein de lapin
1, n o u v e a u - &
I
Hamster
- Rein
+
+
(C, aethiops) - R e i n
+
+
Singe
- C e l l u l e s amnio-
Homme
fi ques
*
LIGNEES CELLULAIRES SENSIBLES AU VIRUS BOVIPESTIQUE
Iffet cytopa-
Origine ceII~,!aire
Développe-
.-
Appellation
ment
thogène
Teiefn de bov,in
MD3K
?ein de porc
P K
?ein de Hamster
BHKZI-Cl3
Zellules néoplas iques
iumaines
HELA
+
+
hein de singe
MS/VERO
+
+
.<“.
. - .
. ,
I
1
1
t
Plowright et Ferris
(1952 - 1962)
I
I
I
1Isopi (1.961) .. ..
1 Rein de bovir,
. i T i +(*) / -I-- ..i, ,f j ,,..
I
Testicule de bovin
,:JT
1:
I','
,
Rein de lapin
NT
1
-
t
I
I
!- t-
1
Fibm~~1mte-s de ~:OU- ,
t
t
t
I
le-t.
t t
I
I NT
I
-
I+
I+
1
I
I
----+--
l
I
I
I
I Tokuda et ail.
I
I
t
t i
1
t
(1.962)
1 leucocytes de bovin 1 N:I? /
+ 1 -
, ?dT 1
t
--l_.---. I
I 143kamura (1965)
Rein de chien
1 t.)* l + t + t Njy t
1
l
/
1
l t
I
NT = non test&
(w> = sur cellules embryonmires seulement.
DEMI-VIE DU VIRUS A DIFFERENTES TEMPERATURES DE CONSERVATION
APRES LYOPHILISATIOh'
Support de lyophilisation
-20'3 2T°C
+4v
+20 à 25OC
37OC
LAYE/OS.T
6 mois
8 semaines
1 semaine
-
5 % lactalbumine hydrolysat 4-5 mois
-
4 - 3 jours
Demie-vie du virus à différentes températures
de conservation
Millet de conservation
6OOC ,
%OC
3FC
25oc
4-7oc
- Fkte/ganglions de bo-
vin infectG
5ml-l
105 mn
6, 4 heures
2, 3 jours
- Sang de bovin infec-
té
s?nn
21 heures
36 hemes
2, 3 jours
- Laye/os,5
3, 5mn
165 mn
9,2 jours
kye/OS. 5 = 0,5 % lactalbumine hydmlysate, 0,1 % yeast extract en tampon Parle 5 B sérum de veau
-7
C - VACCINS SUR CULTURES CELLULAIRES
Le vaccin hovipestique sur cultures cellulaires fut obte-
nu à partir de la souche sauvage Kabete 0 de Plowright et Ferris en
1957.
Ce vaccin est supérieur Zï tous les autres cités plus haut sur
la plan de l'innocuité pur toutes les espèces animales auxquelles le
pxddit peut être destiné :
Nous traiterons successivewnt :
de'la propreté et de la st&ilité du matériel,
des cultures cellulaires destinées à la production,
des souches vaccinales de virus,
des produits biologiques entrant dans la fabrication du
vaccin,
des contrôles du produit final,
des conditions de stockage et de distribution.
l- Progreté et stérilité du rnat&iel
e-w -__---------I-_--------------
la verrerie
l
. la st6rilisation du materie
. le stockage du matériel st&ile.
2- Cultures cellulaires
.s------------------...
Deux types de cellules peuvent être utilisés
- les reins de foetus ou de veau nouveau-né
-'les cellules vero.
a) cellules de rein de foetus bovin ou de veau
xcultures primaires
K cultures secondaires
Pour ces types cellulaires, il est indispensable d'éviter
toute manipulation qui pourrait avoir comme conséquence une
rrodification de la morphologie et du caryotype dsorigine.
b) cellules de lignée vero
. banque de cellules
. de contrôle de contamination par d'k&res virus ou myco-
plasmas à chaque étape du processus de ptititi
-8
. conrrôle de la sensibilite au virus pc?-r rctpport 2 1;: col-
lection d'orkine
chan,p,er de collection dès que le besoin se fait sentir.
l
3- Les souches vaccinales
----------c---------I_
carte d'ickntit6 de 3.2 .souche
La souche RPKO de FJlowri$tt et Terris est. la p1.u~ r@andw.
Son innocuitiZ totale et suri haut pouvoir immu.n~@ne sont
stables entre le 9@me rt le 122ème pzE+~es,
Système de lots de semence avec un ti~tre minimum de 105
DICT 5cI/ml.
Système de conservation : ,> des tep&Murcs inf<ri:zures
3 -30°C, les souches se conservent sans v?riation si..@-
ficative du titre pendant au moins 5 ans.
4 - E?nsduits biologiques entrant cknç la pwkction
-..---------e-..
-~-------------------'
m--s.----.-
. Le s&rum : le s&um doit &re exempt dz tout inhibitcur de
la croissance du virus.
Les concentrations doivent
tarder 1'ECP.
. LES milieux de cultures
I_'
5 - F%duction de virus-vacc!-n
--------------------____I_
Voir fiches techniqii~:;s
l
T&oins ctillules
l
Ces cellules tikzins doivent ?tre conservks w zwins 7
joua q.rès la r&.2olt:: C~CL: bo3xs inoculCes avec 1.i: virus ,
Inoculaticns à t&s 113ute multi$i.cit+ d'infection.
l
5 - CW&rGle du produit final
. . ..---e---w--- ---e--1-11--
. st&ilitC
. D&termination de la t~~ncur en virus.
La teneur en virus de clxq- lot de vaccin y compris le
lot de semence est r%lisc par au mins deux titra~cs sur
cellules d'origine 'bovine ou sur liyn& vero.
. . /. .
-9
. Sécurité d'emploi
Necessaire seulement sur le lot de semence qui, conserv6 à- une
temp&ature inf&ieure à -3OOC peut se conserver sans variation
de titre pendant au moins 5 ans.
Pour cela utiliser au rxG.ns une dizaine de flacons pris au hasard
à raison de 500 x 102,5 DTCT 50.
Les animaux sont gard& en observation pendant 3 semaines.
Le pouvoir pathogène résiduel du.virys,pwyra *etre évalué par
l'ampleur des réactions post-vaccinales.
Son pouvoir de diffusion sera appréci6 par,une Épreuve sériologique
chez les animaux témoins.
. Test d'efficacit6
. Epreuve de stabilité thermique
Détermination des conditions optimales de stabilité du virus
(pH, température, conservation du vaccin lyophilis6 ou rkonsti-
tu&, etc...).
Conditions de stockage et de distribution
- Etiquetage
- Conditions de stockage avant et apr& reconstitution
- Date limite d'utilisation.
. . /. ..*
- 10
En résum6
Tout vaccin mis 2 1~: dis~x.i-cî.on dc?s utilisateurs doit avoir un tit:re
suffisant et '&Y! I&n tolbé pm les animux auxquels il est destiné.
Souches
I Dxe minimzle rk3.r
Rkctions pst-
l
I
arrima1
vaccinales
1
I
i-i-f
I
1 Izipinisé Mka.m.ra III) ] 10297 RID 50
I
-t
I
1
I
I
1
Av.iani&
103 EID 50
l
l
I
,++
I
I Culture cellulaire
lo2,5 DICT 50
nulles
I
/
I
I
I
I
I
I
1
ANVEXE
- Tissupeste
- Bisec
- Fiches d'utilisaticm
- Milieux de cul-hxres cellulaires
- Sqqmrt de lyophilisxtion.
. . . / . . .
- 11
Pour en savoir plus
1 - MAC LEOD (N.G.1, EVANS (S.A.), SCOTT (GJ?.>, 1957. Bull. Epi~. Afr.
5- 313,
2- Méthodes de production et de contrblë des vaccins bvipestiques,
caprinisés, lapinisk et avianisés,
Rapport comité d'expert de standardisation biologique.
S&e des mgmrts techniques no 444 p. 42-57, 1970.
- 12
VIRUS-VACCIN ?X CUL'I'URE CI:LLUIJJRE CONTRE LA IXSTE BOVIW 0Iom de code :
Tissupeste)
On utilise la souche Kabete 0 a.tt&-&k -ar 60 passages sur cultures
rénales de première explantatian d'embryon de veau.
Le vaccin est constitug pzr le liquide nutritif des cellules infectées.
PrGparation
On se sert d'une culture confluente de cellules renales dvembryon de
veau obtenu aprè s tqpsination des cellules $ithcliales et culture en
boîte de Roux 3 l'ktuve à 37OC.
La souche virale est Inocul~e à raison de 2 2 5 ml nar 'boîte..
Lorsque le tapis cellulaire est dGtru-i.t 2 80 %, les boîtes sont
congelées 3 -25OC.
Après déccngGlation,
les dGbris cellulaires sont &imin& par centri-
fugation.
On utilise une solution de Hark7s contenant 10 % de saccharose
(H. B.S.S.S.) et 20 4 de lait &x&& en poudre comme support de lyophilisa-
tion à raison de : - 1 parkie de liquide de culture
- 1 partie de H. B.S,S,S. - lait &rGm?.
Le m&npe est r+arti en flacons de typ-.t? ;-Gnicilline à raison de 1 ml
par flacon (50 doses), puis I.yophilis~, I;I, conservation se fait au congéla-
teur a -15OC.
Contrôle de purete
Le contrXe de st<rilité se fait avant et aprks lyophilisation (sur le
vaccin reconstitué) sur bouillon d.c culture et sur ,$lose ~rofondc; mis à
l's-tuve à 37OC pendant 72 heures.
Le titrage est ;:ffectuG après lyophilisation sur tubes de culture
cellulaire de rein d'embryon de veau. Le titre minimum doit *rstre de 10235
unités infectantes 50 p.100 (m&thGde de FED et IWENCH) par ajose
vaccinale.
- 13
Testsd'innccuité et d'efficacité
Une %Preuve de séwrite d'emploi chez les bovins est effectu6e sur
chaque lot de semence (une dose,de,vaccin est inoculée par voie sous-
cutanée à 2 bovins qcli sont mis enobservation pendant trois semaines
durant lesquelles aucune tiaction pathologique ne devra intervenir>,
Les 26bus ne p&sentent aucune m'action. l?arfois une légere fièvre
transitoire et un peu de larmoiementpeuvent *être observés chez certains
taurins particulièrement sensibles .@Jdaxa); t
"
Les tests d'efficacite sont effectués tous les 2 ans à partir de
semence (constitue par la souche Conserv&e à -7OOC) sur deux bovins dont
l'état de sensibilite a @té con-tr@l~ par séroneutralisation ; chaque animal
reçoit une dose vaccinale.
15 jours apr;js, on fait une prise de sang afin de contrôler ultérieuremmt
,
la présence d'anticorps neutralisants ;
. .
les animaux sont ensuite éprouvés
avec 1 000 DICT 50 de la souche sauvage DK (Dakar) inoculés par voie sous-
cutanse ; ils sont alors gardés en observation durant un m3is afin de con-
trôler l'absence de toute r6action clinique,
La du&e de l'immunit? pcst-vaccinale dcyasse largement un ran mais
il est recommandé de vacciner chaque anné.e successivement pendant 3 ans.
.
. . ./ . . .
FWWS R.S.S.S(pmr 10 litres)
Fl - Chlmwe de sodium.........................
8@ F
chlonlrc de ptasçiu?n .....................
4 g
Sulfate de rmp&.um ......................
'2 g
Em Q.S. pxlr ............................
4m cc
A2 - Chlorure de calcium . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1,85 F
Em Q.S. parr .**.*,e...,......*....*....
50 cc
I&langer Al et A2 et ajuster 2 500 cc.
R- FIxx~hate discdique 12 f-I20 ....,O,.,.....
1,85 ,T
Phosphate mx-iopxtassique . . . ..*........o.
0,6 f?
Dextrose .*.,.....*.*.....*....*..Q......
19 g
Eau QS. pmr . ..*......*.....*..**....*.
500 cc
%%X$'W Al ) A2 et B ap& stérilisatinn de chacm :
%09 à llO-1150.
c- Bicarbonate de scdium ..,...O...,........
3,5 g
Rouge de ph&wl ."............S...,,.....
n,z g
E?m Q.S. pxlr .
..*.........*...**o.....*.
250 cc
Ajuster le m&nge de 41 , A2 et F-3 c7 10 litres et c~outer
la solution C.
Ajouter : Saccharose 19 3.
I?ki.c51line .........................
1 000 000 I!*I.
Streptomycine .......................
18
Filtrer sur Seitz.
Ncm de l*op&ateur ..........................................
mtê ........................................................
Filtration ........................
lxte ....................
Remrqws ...................................................
J.-JANG L&T (mur 10 li-hxs)
A - Chlorure de sodium . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
80 F:
Chlomre de -tassium . . . . . ..*...*......
4 g
Sulfate de magnésium ...,.,........O,..,
2 ,g
Em bidistillée Q.S. ?our . . . . . . . . . . . . ..l 000 cc
ikltoCl~VeF 20 nm 3 llS* pendant 20 mn.
.
B - Hydrolysat de lactalbumine
. . ..*..t....*
50 f?
Phosphate discdique l2H20
. . . . ...*.....
132 g
Eu Q.S. pour . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..s.. 1000 cc
Autoclaves 20' à ll,+*C
C - Phosphate mnopotassiq,ue *..*...a.......
036 R
Dextrose .*...,..................*.*....
1.0 g
1
,!
'-
Eau Q.S. pour .*....,.*.,.......*....*..
500 cc
&.xtoclaver
_
20' à Il+
D - Bicarbonate de sodium . . . . . . . . . . . . . . . ..~
3,s e;
Rouge de ph&ol . . . . . . . . . . . . . . . ..e......
$2 P
Dissoudre le bicarbonate dans la plus petite quantité d'eau
wssible. Ajouter le roule de phéncl. A.giter fr6querrment.
Compléter le volme à 250 cc.
E - Chlorure de calcium 2H20 . . . . . ..o..*.*.
1,85 g
Eau Q.S. pour ..*................,......
250 cc
Autoclaver 20' à 115O
F - Extrait de levure DIFCO . . . . . . . ...**....
10 i?
Eau Q.S. pour . . . . . . ..*.............m...
11
P6Lanl;rer avec la solution D et filtrer sur Seitz
Autoclaver A, B, C, D, E et F et filtrer sur Seitz. Avant fil-
tration, ajcuter p6nicilline : 1 000 000 1J.I.
Didro~cine : 1 g
Date ...................................................
Nom de lsop&atew .....................................
-Filtration ............i......i ..... Ikte .......... .......
Remarques *.....*........*.*.*.........*.................
KILIEIJ HYY: - YEARLE ENRICHI J?OUR CFLLULES
VIZRO ET MS
1 - PREPARER MES SOLUTIONS SIJIV~NTES POUR 3.0 .I:ITRES DE II'ILIEIJ
.
I
Solution A
Chlorure de sodium *......*.........*0....
58 q
Chlorure de potassium .
..*.*...*...o*.....
1+ CT
Chlore de calcium 2H20 ..*...........,.
2,SG ,g
Sulfate de rra,qnésium 7H20 ..eO.,....e....,
2F
%u bidistillée st&ile . . . . . . . ..*...0..." ,500 ml
II
Solution B
Phosphate mr;nosodique 2H20 .,,......e,....
1,4 fY
Glucose . . . . . . . . . . . . . . . . ..*....*..*....... 10 g
EU bidistillée stérile ,.....,.....~,.,.. 500 ml
Solution C
Bicwbonate de scdium .*..*.........0*....
16,75 !?
Rouge de phknol .
..O........**.*..ee....*.
0909 R
Eau hidistill& .st&-ile . . . . . . . . ..*.e*.... 350 ml
Solution D
Yydmlysat de lactalbumine DIX0 .0.*.....
SO q
Yeast extract DIFCO . . . . ..*..o......o.....
1 .fT
Eau bitiistillée st&ile . . . . . . . . . . D . . . . . ..'830 rd
II - fUOCrT+ER A D LE3 SOLUTIONS A, B, C
,
Solution E
L.
Glutamine
'
.*...*..**.....*..*..,*......
1 !?
.Acide 1,. glutamiqpe ..*...................
3. p
L. M&hionine . ..*...................*.*..
1,s fT
. . .
L. Argininine khlohydpate
. . . . . . . . . ..a....
0,4 g'
,.s
Acide foli$e "
..s..............,.....*.*..
0,01 0:,
Biotine
.
.'
..*.........*..........**o......e
0,Ol g
Eau
bidïstillk
"
. .."...................... 350 mi'
.
IV - AJOUL'ER E A Lp13'TSEl%L;E:
V - ANTIBIOTIQ~ : RhiciUine : 2 millions, Streptomycine i ,2 gros.
VI- FILT'CRSUR~.
.
_.
.
OBSERVATIONS ...............................................
OPERATEUR ..................................................
SOLUTION DE MIST DESSICANS
A - Tampn sorensen
I- Phosphate discdique déshydrata
............
9,5 g
Eau bidistillée
...........................
1 000 cc
II - Phcsphate rry-inopctassicpe dkhydr:iti
a...o*.
9 , 1. g
E&u bidistillée
*......,.,...o**.,.*....*..
1 0-m cc
I‘~&n,p.zr : 545 cc de 1 et 50 cc de II
Autoclaver 33 k3 à 120°C.
1
. I
Remarque : Si'cni emploie du NazHpOk,
2H20, *eser 11 ,rr nû ~Lieu de 9,s g
Si cri emploie du Na2HPO )+, 12H20, peser 2~?,95 y snEt preque 24 g.
3 - Mist dessiczns
I- Tzqpn swensen ...........................
250 cc
Lxtose ...................................
70 g
I-JydXjlgTsat de lactalbumine
................
20 l.5
13issoudre à chaud.
II - Skvm d&zomplémentC
..*.,*.0..*"T..........
750 cc
IGlanger I et II: lorsque 1 est r&r+.dj.
riltrer sur Seitz 2 litres,
Le mist dessicans est uti.lis& wrme suTTort de .1~7cphi.lis~xtim
au ccwrs
de la p&watictn du vaccin peste bovins p&~~x& sur cultwes de -tissu à
raison de : 1 partie de liqxide virulent
1 partie de mist dessica.ns.
TISSUPEST
Vaccin contre la peste bovine
la peste des $hits ruminants
@ Souche vaccinale :
ter les flacons dans
du sable ou de la
Virus Kabete 0 atténué
sciure hurnc:ctlhr> (~1~
par passages sur cultures
dc Ics mninfc~nlr il
cellulaires.
l’ombre.
0 Préseytation :
e Dilution :
Vaccin lyophilisé cn fla-
con de 5 ml - !XI clo5t?s t,;rr
licxxxv,ti tut1
Ic
v,r( (, it 1
flacon.
clans 50 rnl de dilu~tll5.
L e s d i l u a n t s à utilis,cr
* Conservation :
wnt :
- A
u
congelateur
-
1 5 ° C m i n i m u m :
conwrvatior I rk: I r-t5
longue durée : 1 ZI 2
ans.
A u refrig6r~rtcur
-l
4” C : 1 mois.
Dans le c a s de rup-
rut-c de chnînct d
u
froid sur le terrain
le vaccin peut être
conservé sans perte
+ Dose A utiliser et mode
d’activité à la tem-
d’administration
:
pérature
maximale
de 35” C pendant 1
1 ml de vaccin reco>sti-
semaine.
tué par ‘la voie sous-cuT~w%
Pour é v 1 ter tout
chez les bovins âgés de plus
échauffement, il est
de 6 mois quelle que soit la
recommandé de pla-
r a c e .
- - .__-__-_--_ .-.._” ..-.. _ _ ._ .._. _..
.
..___. _-._- ___... -.. . -__, _._-
.I.
.
, .
@ Réactions post - vaccina-
Dans les conditions d’éle-
les :
vage en milieu tropical, il
est recommandé de procé-
- Chez les zébus, pas
der chez les primo-vaccinés
de réaction notable.
4 l a v a c c i n a t i o n d u r a n t 3
- C h e z l e s t a u r i n s :
années consécutives.
on note parfois une
fièvre lkgère et du
larmoiement.
* Vaccinations associhes :
Peut être associé avec la
* Immunité :
vaccination anti - peripneu-
Apparition : 8 jours après
monique
(Tl
lyophiiisé,
la vaccination.
KH3J. lyoph/lisé).
Durée : plusieurs années.
2 ans au minimum.
8 Remarque :
Le vaccin peut être utili-
I, Indications :
sé dans les mêmes condi-
Prévention de la peste
tions pour la prophylaxie
bovine chez les zébus et tes
médicale de la peste des pe-
taurins âgés de plus de 6
tits ruminants chez les ovins
mois.
et les caprins.
BISEC
Vaccin mixte contre la peste bovine
et la péripneumonie
0 Souche vaccinale :
conserver à la icm-
Peste bi;virw : vi rus
Kabete 0 vivant atte-
nué par passages sur
cultures cellulaires.
- Péri pneumonie : sou-
che Tl vivante att&
r.~uCc* I~I r.lrlliv(!t* ‘,111’
LJ<JUill~,il.
@ Prkmtation :
Vaccin lyophilisé en fla-
I) Dilution :
cons de 20 ml - 40 doses
,
par flacon.
.
Reconstituer le vaccin
dans 40 ml de diluant :
-
0 Conservation :
Les diluants prescrits
snnt :
- A u congéiatcur < -
. I
15°C meinimum:
- le sérum physiotogi-
conservation de très
que normal (8 g de
longue durée : 1 à 2
c h l o r u r e dc wnium
ans.
p o u r 1 iii-w d”aau
- A u r é f r i g é r a t e u r +
distil’lée),
4” C, pour quelques
- fa solution m o l a i r e
semaines.
de sulfate de ma-
;’
Dans le cas de rup-
gnésium (246 g de
ture de chaîne du
sulfate de magné-
froid sur le terrain
sium 7 H2 0 pour 1
le vaccin peut se
titre d’eau distillée).
.
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* Dosa B utiliser et mode
I,r lylotirrt! oil Itt fi0
d’administration :
varsCnoben WI
Les
Itnu~~~~~~~~x t ,i 11 t i n 0,
1 ml I%II IL) WJic! ‘,OWp CL.1
doivent donc Ctro
tanée au tiers supérieur de
c~x;iminés 2 à ; SC’
la côte de vaccin rcconsti-
maines après la vac-
tué quelle que soit la race,
chez les bovins âgés de plus
cination.
de 6 mois.
r) Immunité :
- Apparition 8 jours
0 Réactions post - vaccina-
après la vaccination
les :
pour les 2 maladies.
- Durée :
- Chez les zébus : pas
de réaction notable.
- peste bovine : 2
ans minimum.
- Chez les taurins ou
- péripneumonie :
animaux métis : il
peut apparaître dans
1 an.
quelques c a 5 des
œdèmes locaux sans
r) Indications :
‘
incidence sur l’état
Vaccin convenant parfai-
général de l’animal.
tement pour les campagnes
Exceptionnellement,
de prophylaxie dans les ré-
ces reactions peu-
gions air cocxicient à des
vent devenir alar-
degrés divers la peste bovi-
r
mantes, Elles cèdent
.
ne et la péripneumonie ou
alors a u traitement
~~~~nlernent rfnns dos &y;ion:,
par ta spiramycine,
menacees.
: ,