x $L-+ REPUBLIQUE DU SENEGAL ...
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REPUBLIQUE DU SENEGAL
-_-“-_-------
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
_--_--_--_-
DEPARTEMENT DE RECHERCHES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
------__-__
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A.)
- - - - - - - - - - -
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P, 2057
DAKAR-HANN
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
- - - - - - - - - - - -
HISTORIQUE - DEFINITION - SYSTEMATIQUE
POUVOIR PATHOGENE - CONTAMINATIONS DE LABORATOIRE
Par M. KONTE
R E F . No 006/P,INF.
JANVIER 1990
REPUBLIQUE DU SENEGAL
------___-_-
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
--------_---
DEPARTEMENT DE RECHERCHES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
- - - - - - - - - - - -
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A.)
_-----_----
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P. 2057
DAKAR-HANN
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
------------
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES ET
LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
Dakar, 20-24 novembre 1989
Par M. KONTE
R E S U M E
---.- ._._._._._._
. . . . . . . .
Dans le cadre d’un séminaire de formation organisé pour des
1
Vétérinaires chargés de la production de vaccins, des généralités
sur les Mycoplasmes ayant trait à I’historique des PPLO, à la définition
et à la systématique du groupe, ainsi que le pouvoir pathogène et
le rôle des Mycoplasmes dans les contaminations de laboratoire ont été
développés.
!
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
( P . P . C . B . )
L
DAKAR, 20-24 NOVEMBRE 1989
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
I - HISTORIQUE
- 1898
0 NOCARD et ROUX isolent l’agent de la PPCB :
.
Asterococcus mycoides ---> Mycoplasma mycoides
- 1900
: DUJARDIN- BEAUMETZ.:CuIture sur milieu solide : aspect carac-
téristique des colonies
- 1906
: CELLI e t B L A S I : filtrabilité de l’agent de I’AC/PR, cultivé en
1 9 2 3 p a r B R I D R E e t D O N A T I E N
- 1936
: LAIDLAW et ELFORD isolent les premiers mycoplasmes saprophytes
(Acholeplasma)
- 1938
: DIENES et EDSALL isolent la première souche de mycoplasme de
l’homme.
- 1944
: E A T O N e t coll
isolent l’agent de la PAP : M. pneumoniae
- Découverte nombreuses espèces associées à syndromes divers chez l’homme
et animaux.
- Contamination des cultures cellulaires, surtout de lignée continue par des
mycoplasmes
- A p a r t i r d e 1 9 6 8 :
mycoplasmoses des végétaux
- Récemment caractérisation ou proposition nouveaux genres : Ureaplasma,
Spiroplasma, Anaeroplasma, Thermoplasma
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPIASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
( P . P . C . B . )
DAKAR, 20-24 NOVEMBRE 1989
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
II - DEFINITION
Les mycoplasmes sont les plus petits micro-organismes vivant à l’état libre,
doués de pouvoir de synthèse à partir d’un petit nombre de matériaux pré-existants.
Le Comité International de Bactériologie Systématique les définit par les carac-
téristiques suivantes :
- micro-organismes procaryotes limités par une simple membrane plasmique ;
sans paroi et incapable d’en synthétiser les précurseurs (acides muramique et
diaminopimélique).
- croissance sur milieux artificiels liquides ou solides (acellulaires) avec des
colonies typiques incrustées par leur centre dans la gélose.
- Piéomorphisme très marqué (formes coccoïdes, en anneau, en massue, en
chaînette, en hélice, etc.. . ) dû à l’absence de paroi rigide.
- taille très petite, de l’ordre de 300 nm ; filtration à travers les membranes
dont la porosité moyenne est de 450 nm
- Stérol-dépendance, sauf pour le genre Acholep lasma
- Résistance à la pénicilline, sensibilité aux antibiotiques intervenant dans la
synthèse des protéines
- Inhibition de leur croissance par les immun-sérums spécifiques d’espèce.
- Stabilité des mycoplasmes, pas de “sortie” à partir d’une bactérie, pas de
9-etour”vers une forme bactérienne originelle.
Le terme de “mycoplasme”
(créé par NOWACK en 1929) rend compte du poly-
morphisme et de l’aspect pseudo-mycélien de ces micro-organismes.
,
’
‘i
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
Ill - SYSTEMATIQUE
A) - MICROORGANISMES DE CLASSIFICATION CERTAINE
Classe des Schizomycètes
Classe des Mollicutes
Classe des Microtato biotes
(- Bactéries)
(- Rickettsies
1
- Chlamydies
- Ordre des Mycoplasmatales
- virus)
I
L
F
&
L
- Famille des Mycoplasma taceae I-amille des Acholeplasma- Famille des Spi roplasmataceae
taceae
. Stérol-dépendantes
. Non stérol-dépendantes
. Structure hélicoïdale pendant
une partie de leur croissance
?
. Cénome d’environ 5 x lO*
. Cénome d’envrion
daltons
10 x 10g daltons
‘ Stérol-dépendantes
.
NADH oxydase localisée dans
. NADH oxydase IocaliséE
. Génome d’envron 10 x 10’
le cytoplasme
à la membrane
daltons
l
J
--> genre Mycoplasma : plus
--> genre Acholeplasma
. NADH oxydase localisée dans
de 50 espèces, définies ;
7 espèces actuellement
le cytoplasme
n’hydrolyse pas l’urée
définies
--> G e n r e ---> Spiroplasma
--> genre Ureaplasma : 1 seule
espèce avec des sérotypes ;
hydrolyse l’urée.
B) - GENRES EN POSITION TAXONOMIQUE INCERTAINE.
-
- Thermoplasma : (1 espèce)
- Anaeroplasma : (2 espèces)
Cl - SYNOMYMIE
- Ancienne dénomination du groupe : P.P.O. ; P.P.L.O.
- Désignations génériques anciennes abandonnées : Asterococcus,
Mycromyces, Anulomyces, Asteromyces, Borrelomyces
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
b
(P.P.C.B.)
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
IV - CARACTERISTIQUES COMPAREES
A) - Avec les autres procaryotes
- Ont en commun :
. contiennent ADN et ARN
. division par fission binaire
.
multiplication sur milieux artificiels
. sensibilité à certains antibiotiques
. parfois porteurs de virus.
- En diffèrent par :
.
Absence de paroi ---> pléomorphisme
. résistance aux antibiotiques du groupe des 8, lactamines (Pénicilline)
. taille d’environ 300 nm ---> filtration à travers membrane de porosité
450 nm
. besoin absolu de cholesterol
B) - Avec les virus
- Ont en commun
. petite taille
. filtrabilité : membrane de porosité 220 nm
. inhibition par les anticorps correspondants
Cl - Avec les formes L
- Ont en commun
. absence de paroi : --> pléomorphisme et filtrabilité
e morphologie des colonies
. résistance à la pénicilline
. les formes L sont non stérol-dépendantes (comme les Acholeplasma)
- En diffèrent essentiellement par le fait que les formes L de type B ou
A peuvent reverser vers la bactérie d’origine dès que l’agent inducteur disparart.
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
b- -
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
V- POUVOIR PATHOGENE DES MYCOPLASMES
A) - PHYTOPATHOLOCIE
Toutes les infections végétales connues ont un vecteur arthropode
(citadelle, cochenille,
Maladies de types : “jaunisse”, “nanisme”, “dépérissement”, “monstruosité”.
Genres en cause : Spiroplasma - Thermoplasma
B) - INFECTION D’INVERTEBRES
Des Spiroplasmes infectent des arthropodes : abeilles, punaise, tique,
drosophile.
a - INFECTION DES VERTEBRES
-Genre Acholeplasma
A. oculi et A. equifetale semblent posséder un pouvoir pathogène.
Certains Acholéplasmes sont pathogènes pour les oiseaux
- Genre Ureaplasma
Pouvoir pathogène contreversé, mais semble réel chez les Ruminants
(Pneumonie, mammite) .
- Genre Spiroplasma
La cataracte des souriceaux nouveau-nés est due à un spiroplasme
transmis par une tique : Haemaphysalis leporispalustris
- Genre Anaeroplasma
A. abactoclasticum et A. bactoclasticum, rigoureusement anaérobies,
sont isolés du rumen des bovins et des ovins.
- Genre Mycoplasma
Contient toutes les espèces pathogènes pour l’homme et les animaux
domestiques. Chez ces derniers, les mycoplasmoses peuvent se classer cliniquement
en :
. Mycoplasmoses primaires
--i mycoplasmes à pouvoir pathogène réel (naturel et expérimental)
--> contagieuses et cliniquement graves
--> à évolution enzootique ou épizootique
--> exemples : P.P.C.B.
agalactie contagieuse des P. R.
. Mycoplasmoses secondaires
--> mycoplasmes à pouvoir pathogène douteux sur le plan expérimentatl
--> peu contagieuses de façon directe, à caractère sporadique
-- > apparaissent simultanément ou secondairement à une autre infection,
à une déficience du terrain, à un stress
-- > exemple : infection à M. arginini
M. bovirhinis
M. bovis, etc...
, Infections occultes ou inapparentes
-->“trouvailles”
microbiologiques à traduction clinique exceptionnelle
--> mycoplasmes très répandus constituant la flore “normale” des
muqueuses (rhinopharynx, tractus génital)
--> exemples : infections à A. laidlawii
M. bovigenitalium
Ureaplasma, etc.. .
A signaler les difficultés de reproduction de la maladie naturelle, sur le
plan expérimental.
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
b
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
VI - ROLE DES MYCOPLASMES DANS LES CONTAMINATIONS DE LABORATOIRE
- Contamination dans les laboratoires de culture de tissus in vitro (Virologie)
- Détection souvent difficile : absence trouble du milieu ou d’effet cytopathique
- Conséquences : des cellules poussent mal ; on ne peut isoler des virus.
A - ORIGINES DES CONTAMINATIONS
- Sérums ajoutés aux milieux de culture
- Les manipulations de laboratoire
- Les animaux de laboratoires
- Les prélèvements effectués pour le diagnostic
B- MANIFESTATIONS DE LA CONTAMINATION
- 50 % des cellules de lignée sont contaminées par les mycoplasmes ; contamina-
tions occultes pour la plupart indirectement mises en évidence par :
. microscopie électronique
. ultracentrifugation
. Sérologie
. Impossibilité d’obtenir des hybridomes, etc..
- Effet cytopathogènes ressemblant à ceux des virus
. sur hématie --> hémolyse, hémoabsorption, hémogglutination
. aspect géneral de la monocouche, morphologie des cellules ..*..
- Effets sur la multiplication des virus
. inhibition --> pas de plages, titre faible.. .
. stimulation de la croissance virale
C- DETECTION DES CONTAMINATIONS
- Méthode d’isolement
.
- Coloration par le DAPI
- Tests biochimiques
D- TRAITUHENT DES CELLULES CONTAMINEES - Mesures de preventions
- par des antibiotiques actifs (tétracyclines, macrolides )
- passage en “souris nude”
- par un sérum hyperimmun spécifique ; . . .
RECOMMANDATIONS
- s’assurer de l’absence de contamination des cellules
- manipuler stérilement
- contrôler les lignées cellulaires
B I B L I O G R A P H I
----____________------------ E
_- BONISSOL (C.) - Mycoplasmes et cultures cellulaires.
Cours de virologie systématique.
Institut Pasteur Paris 1983.
- CHANTAL (J;) .- La péripneumonie contagieuse bovine. Cours magistral.
E. I.S.M.V. Dakar, 1976.
- HUDSON (J.R.) - La péripneumonie contagieuse des bovidés.
F.A.O. Rome, 1972.
- l.E.M.V.T.KIRAD : Mycoplasmes et mycoplasmoses des ruminants.
Document technique du service de Pathologie infectieuse.
Juin 1985.
- LE MINOR (L.) et VERON (M.) : Bactériologie médicale.
Edition Flammarion Médecine - Sciences.
- 0.I.E” - Les mycoplasmoses des ruminants.
In :
-
Revue scientifique et technique de I’O.I.E., 1987, 6 (3)
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AGRICOLES (I.S.R.A.)
- - - - - - - - - - -
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
B.P, 2057
DAKAR-HANN
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
- - - - - - - - - - - -
HISTORIQUE - DEFINITION - SYSTEMATIQUE
POUVOIR PATHOGENE - CONTAMINATIONS DE LABORATOIRE
Par M. KONTE
R E F . No 006/P,INF.
JANVIER 1990
REPUBLIQUE DU SENEGAL
------___-_-
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
--------_---
DEPARTEMENT DE RECHERCHES SUR LES
PRODUCTIONS ET LA SANTE ANIMALES
- - - - - - - - - - - -
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A.)
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GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
------------
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES ET
LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
Dakar, 20-24 novembre 1989
Par M. KONTE
R E S U M E
---.- ._._._._._._
. . . . . . . .
Dans le cadre d’un séminaire de formation organisé pour des
1
Vétérinaires chargés de la production de vaccins, des généralités
sur les Mycoplasmes ayant trait à I’historique des PPLO, à la définition
et à la systématique du groupe, ainsi que le pouvoir pathogène et
le rôle des Mycoplasmes dans les contaminations de laboratoire ont été
développés.
!
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
( P . P . C . B . )
L
DAKAR, 20-24 NOVEMBRE 1989
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
I - HISTORIQUE
- 1898
0 NOCARD et ROUX isolent l’agent de la PPCB :
.
Asterococcus mycoides ---> Mycoplasma mycoides
- 1900
: DUJARDIN- BEAUMETZ.:CuIture sur milieu solide : aspect carac-
téristique des colonies
- 1906
: CELLI e t B L A S I : filtrabilité de l’agent de I’AC/PR, cultivé en
1 9 2 3 p a r B R I D R E e t D O N A T I E N
- 1936
: LAIDLAW et ELFORD isolent les premiers mycoplasmes saprophytes
(Acholeplasma)
- 1938
: DIENES et EDSALL isolent la première souche de mycoplasme de
l’homme.
- 1944
: E A T O N e t coll
isolent l’agent de la PAP : M. pneumoniae
- Découverte nombreuses espèces associées à syndromes divers chez l’homme
et animaux.
- Contamination des cultures cellulaires, surtout de lignée continue par des
mycoplasmes
- A p a r t i r d e 1 9 6 8 :
mycoplasmoses des végétaux
- Récemment caractérisation ou proposition nouveaux genres : Ureaplasma,
Spiroplasma, Anaeroplasma, Thermoplasma
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPIASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
( P . P . C . B . )
DAKAR, 20-24 NOVEMBRE 1989
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
II - DEFINITION
Les mycoplasmes sont les plus petits micro-organismes vivant à l’état libre,
doués de pouvoir de synthèse à partir d’un petit nombre de matériaux pré-existants.
Le Comité International de Bactériologie Systématique les définit par les carac-
téristiques suivantes :
- micro-organismes procaryotes limités par une simple membrane plasmique ;
sans paroi et incapable d’en synthétiser les précurseurs (acides muramique et
diaminopimélique).
- croissance sur milieux artificiels liquides ou solides (acellulaires) avec des
colonies typiques incrustées par leur centre dans la gélose.
- Piéomorphisme très marqué (formes coccoïdes, en anneau, en massue, en
chaînette, en hélice, etc.. . ) dû à l’absence de paroi rigide.
- taille très petite, de l’ordre de 300 nm ; filtration à travers les membranes
dont la porosité moyenne est de 450 nm
- Stérol-dépendance, sauf pour le genre Acholep lasma
- Résistance à la pénicilline, sensibilité aux antibiotiques intervenant dans la
synthèse des protéines
- Inhibition de leur croissance par les immun-sérums spécifiques d’espèce.
- Stabilité des mycoplasmes, pas de “sortie” à partir d’une bactérie, pas de
9-etour”vers une forme bactérienne originelle.
Le terme de “mycoplasme”
(créé par NOWACK en 1929) rend compte du poly-
morphisme et de l’aspect pseudo-mycélien de ces micro-organismes.
,
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ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
Ill - SYSTEMATIQUE
A) - MICROORGANISMES DE CLASSIFICATION CERTAINE
Classe des Schizomycètes
Classe des Mollicutes
Classe des Microtato biotes
(- Bactéries)
(- Rickettsies
1
- Chlamydies
- Ordre des Mycoplasmatales
- virus)
I
L
F
&
L
- Famille des Mycoplasma taceae I-amille des Acholeplasma- Famille des Spi roplasmataceae
taceae
. Stérol-dépendantes
. Non stérol-dépendantes
. Structure hélicoïdale pendant
une partie de leur croissance
?
. Cénome d’environ 5 x lO*
. Cénome d’envrion
daltons
10 x 10g daltons
‘ Stérol-dépendantes
.
NADH oxydase localisée dans
. NADH oxydase IocaliséE
. Génome d’envron 10 x 10’
le cytoplasme
à la membrane
daltons
l
J
--> genre Mycoplasma : plus
--> genre Acholeplasma
. NADH oxydase localisée dans
de 50 espèces, définies ;
7 espèces actuellement
le cytoplasme
n’hydrolyse pas l’urée
définies
--> G e n r e ---> Spiroplasma
--> genre Ureaplasma : 1 seule
espèce avec des sérotypes ;
hydrolyse l’urée.
B) - GENRES EN POSITION TAXONOMIQUE INCERTAINE.
-
- Thermoplasma : (1 espèce)
- Anaeroplasma : (2 espèces)
Cl - SYNOMYMIE
- Ancienne dénomination du groupe : P.P.O. ; P.P.L.O.
- Désignations génériques anciennes abandonnées : Asterococcus,
Mycromyces, Anulomyces, Asteromyces, Borrelomyces
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
b
(P.P.C.B.)
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
IV - CARACTERISTIQUES COMPAREES
A) - Avec les autres procaryotes
- Ont en commun :
. contiennent ADN et ARN
. division par fission binaire
.
multiplication sur milieux artificiels
. sensibilité à certains antibiotiques
. parfois porteurs de virus.
- En diffèrent par :
.
Absence de paroi ---> pléomorphisme
. résistance aux antibiotiques du groupe des 8, lactamines (Pénicilline)
. taille d’environ 300 nm ---> filtration à travers membrane de porosité
450 nm
. besoin absolu de cholesterol
B) - Avec les virus
- Ont en commun
. petite taille
. filtrabilité : membrane de porosité 220 nm
. inhibition par les anticorps correspondants
Cl - Avec les formes L
- Ont en commun
. absence de paroi : --> pléomorphisme et filtrabilité
e morphologie des colonies
. résistance à la pénicilline
. les formes L sont non stérol-dépendantes (comme les Acholeplasma)
- En diffèrent essentiellement par le fait que les formes L de type B ou
A peuvent reverser vers la bactérie d’origine dès que l’agent inducteur disparart.
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ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
b- -
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
V- POUVOIR PATHOGENE DES MYCOPLASMES
A) - PHYTOPATHOLOCIE
Toutes les infections végétales connues ont un vecteur arthropode
(citadelle, cochenille,
Maladies de types : “jaunisse”, “nanisme”, “dépérissement”, “monstruosité”.
Genres en cause : Spiroplasma - Thermoplasma
B) - INFECTION D’INVERTEBRES
Des Spiroplasmes infectent des arthropodes : abeilles, punaise, tique,
drosophile.
a - INFECTION DES VERTEBRES
-Genre Acholeplasma
A. oculi et A. equifetale semblent posséder un pouvoir pathogène.
Certains Acholéplasmes sont pathogènes pour les oiseaux
- Genre Ureaplasma
Pouvoir pathogène contreversé, mais semble réel chez les Ruminants
(Pneumonie, mammite) .
- Genre Spiroplasma
La cataracte des souriceaux nouveau-nés est due à un spiroplasme
transmis par une tique : Haemaphysalis leporispalustris
- Genre Anaeroplasma
A. abactoclasticum et A. bactoclasticum, rigoureusement anaérobies,
sont isolés du rumen des bovins et des ovins.
- Genre Mycoplasma
Contient toutes les espèces pathogènes pour l’homme et les animaux
domestiques. Chez ces derniers, les mycoplasmoses peuvent se classer cliniquement
en :
. Mycoplasmoses primaires
--i mycoplasmes à pouvoir pathogène réel (naturel et expérimental)
--> contagieuses et cliniquement graves
--> à évolution enzootique ou épizootique
--> exemples : P.P.C.B.
agalactie contagieuse des P. R.
. Mycoplasmoses secondaires
--> mycoplasmes à pouvoir pathogène douteux sur le plan expérimentatl
--> peu contagieuses de façon directe, à caractère sporadique
-- > apparaissent simultanément ou secondairement à une autre infection,
à une déficience du terrain, à un stress
-- > exemple : infection à M. arginini
M. bovirhinis
M. bovis, etc...
, Infections occultes ou inapparentes
-->“trouvailles”
microbiologiques à traduction clinique exceptionnelle
--> mycoplasmes très répandus constituant la flore “normale” des
muqueuses (rhinopharynx, tractus génital)
--> exemples : infections à A. laidlawii
M. bovigenitalium
Ureaplasma, etc.. .
A signaler les difficultés de reproduction de la maladie naturelle, sur le
plan expérimental.
SEMINAIRE FAO SUR LES MYCOPLASMES
ET LA PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
(P.P.C.B.)
b
GENERALITES SUR LES MYCOPLASMES
VI - ROLE DES MYCOPLASMES DANS LES CONTAMINATIONS DE LABORATOIRE
- Contamination dans les laboratoires de culture de tissus in vitro (Virologie)
- Détection souvent difficile : absence trouble du milieu ou d’effet cytopathique
- Conséquences : des cellules poussent mal ; on ne peut isoler des virus.
A - ORIGINES DES CONTAMINATIONS
- Sérums ajoutés aux milieux de culture
- Les manipulations de laboratoire
- Les animaux de laboratoires
- Les prélèvements effectués pour le diagnostic
B- MANIFESTATIONS DE LA CONTAMINATION
- 50 % des cellules de lignée sont contaminées par les mycoplasmes ; contamina-
tions occultes pour la plupart indirectement mises en évidence par :
. microscopie électronique
. ultracentrifugation
. Sérologie
. Impossibilité d’obtenir des hybridomes, etc..
- Effet cytopathogènes ressemblant à ceux des virus
. sur hématie --> hémolyse, hémoabsorption, hémogglutination
. aspect géneral de la monocouche, morphologie des cellules ..*..
- Effets sur la multiplication des virus
. inhibition --> pas de plages, titre faible.. .
. stimulation de la croissance virale
C- DETECTION DES CONTAMINATIONS
- Méthode d’isolement
.
- Coloration par le DAPI
- Tests biochimiques
D- TRAITUHENT DES CELLULES CONTAMINEES - Mesures de preventions
- par des antibiotiques actifs (tétracyclines, macrolides )
- passage en “souris nude”
- par un sérum hyperimmun spécifique ; . . .
RECOMMANDATIONS
- s’assurer de l’absence de contamination des cellules
- manipuler stérilement
- contrôler les lignées cellulaires
B I B L I O G R A P H I
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_- BONISSOL (C.) - Mycoplasmes et cultures cellulaires.
Cours de virologie systématique.
Institut Pasteur Paris 1983.
- CHANTAL (J;) .- La péripneumonie contagieuse bovine. Cours magistral.
E. I.S.M.V. Dakar, 1976.
- HUDSON (J.R.) - La péripneumonie contagieuse des bovidés.
F.A.O. Rome, 1972.
- l.E.M.V.T.KIRAD : Mycoplasmes et mycoplasmoses des ruminants.
Document technique du service de Pathologie infectieuse.
Juin 1985.
- LE MINOR (L.) et VERON (M.) : Bactériologie médicale.
Edition Flammarion Médecine - Sciences.
- 0.I.E” - Les mycoplasmoses des ruminants.
In :
-
Revue scientifique et technique de I’O.I.E., 1987, 6 (3)