INSTITUT D’ELEVAGE ET DE MÉDECINE VÉTÉRINAIRE DES...
INSTITUT D’ELEVAGE ET DE MÉDECINE
VÉTÉRINAIRE DES PAYS TROPICAUX
REVUE D’ÉLEVAGE
ET DE
MÉDECINE VÉTÉRINAIRE
DES PAYS TROPICAUX
2
Note sur la structure du virus
de la peste des petits ruminants
par P. BOURDIN et A. LAURENT-VAUTIER
Tome XX (nouvelle série)
No 3 - 1967
-= vIGoT FRÈRES, É DITEURS ~
l
23, rue de l’École-de-Médecine, PARIS-VI’
8 *
Rev. Elev. M-d. Vét. Pays trop., 1967, 20, 3 (383-386)
Note sur la structure du virus
de la peste des petits ruminants
P. BOURRIN ef A. LAURENT-VAUTIER
RÉSUMÉ
L’étude de la structure du virus PPR en coloration négative montre sa ressem-
blance avec le virus bovipestique et le virus morbilleux. II est formé d’une enve-
loppe hérissée de projections et d’un filament inierne à symétrie hélicoidale
représentant la nucléocapside. Cependant, la taille des particules est plus grande
que celle du virus bovipestique.
La Peste des Petits Ruminants (PPR) a été
contenant 0,s p. 100 d’hydrolysat de lactalbu-
décrite par MORNET, ORUE et Coll. (1956).
mine, 0,l p, 100 d’extrait de levure, 2 p. 100 de
Ces auteurs ont montré que l’agent en cause
sérum de veau et 1,5 p, 1.000 de bicarbonate de
était un virus pestique adapté aux petits rumi-
sodium. Après incubation à 400 C, le milieu est
nants. Ce virus a été cultivé sur cellules rénales
changé ies 3e et 7e jours. Le liquide virulent et
d’embryon de mouton par GILBERT et MON-
les cellules sont récoltés le 10e jour après trois
NIER (1962). L’effet cytopathogène observé
cycles successifs de congélation et décongéla-
diffère sensiblement de celui provoqué par le
tion. Le virus est ensuite concentré selon la
virus bovipestique quant à la date d’apparition
méthode décrite par WATERSON et Coll. (1961)
des lésions, leur morphologie et leur évolution.
pour le virus de la rougeole.
GILBERT et MONNIER ont confirmé la simili-
Le liquide virulent est centrifugé 10 minutes
tide antigénique du virus PPR et du virus de
à 1.500 t/mn pour éliminer les débris cellu-
la Peste Bovine.
laires. Le surnageant est ultracentrifugé 1 heure
La structure du virus pestique a été étudiée
à 100.000 g. Le culot repris dans 5 ml de PBS,
par PLOWRIGHT, CRUICKSHANK et WATER-
est clarifié à 1.500 t/mn pendant 10 minutes.
SON (1962), en microscopie électronique après
Le surnageant est ultracentrifugé 1 heure à
coloration négative selon la méthode de BREN-
100.000 g. Le culot est resuspendu dans 0,5 ml
NER et HORNE (1959). Ces auteurs ont montré
d’acétate d’ammonium à 1 p. 100. II est conservé
sa ressemblance avec le virus morbilleux décrit
à -700 C jusqu’au moment de l’examen.
par WATERSON et Coll. (1961). II a semblé
intéressant de faire une étude comparative de
E X A M E N D E S É C H A N T I L L O N S
la structure du virus PPR.
EN MICROSCOPIE ÉLECTRONIQUE (*)
Après décongélation, on mélange une goutte
MATÉRIEL ET MÉTHODE
de virus concentré à une goutte de phospho-
La souche G7F a été utilisée. Elle est consti-
tungstate de sodium à 2 p. 100 ajusté à pH 7,2.
tuée par le 7e passage à 400 C sur cellules ré-
nales d’embryon de mouton du virus PPR isolé
(*) Nous désirons remercier ici, M. BOISSON, Profes-
par GILBERT et MONNIER (1962).
seur à l’Université de Dakar et qui a bien voulu nous
Une bo?te de Roux dont le tapis cellulaire est
autoriser à travailler dans son laboratoire. Nous remer-
complet, est inoculée à raison de 10, DI,,CT
cions également les assistants de M. BOISSON qui ne nous
ont pas ménagé leur concours durant l’accomplissement
de virus pour 100 ml de milieu de Hanks,
de nos travaux.
3 8 3
R E V U E D’ÉI.EV.4GE
1
al
c
L
nE
r”
l
- - -
384
Photos 1 et 2. - Particules intactes dont on distingue la membrane et les projections. Grossis. : x 170.000.
Photos 3 et 4. - Particules de virus PPR altérées sous l’action de l’acide phosphotungstique, permettant de voir
la structure interne. Sur la photo n (’ 3, on observe un petit diverticule représentant une portion de membrane en
train de se séparer. Pr. : projections ; En. : enveloppe ; Nu. Cap. : nucléocapside. Grossis. : ;G. 170.000.
PhoTo rP 5 . - Par-licule tZrlut& ~monl~nml le LIament nucléo-capsidicn à s y m é t r i e hklicoidale. O n dist\\ngue l e
canal central et les unités morphologiques. On peut voir également un fragment d’enveloppe (flèche). Grossis. :
x 220.000.
Une microgoutte du mélange est déposée sur
capside est déroulée dans le milieu extérieur.
une grille recouverte d’un film de collodion
On note que cette nucléocapside est composée
.
carboné. Après séchage, la grille est examinée
d’un long filament emmêlé, dont le diamètre
avec un microscope électronique OPL à des
est de 180 A en moyenne. Ce filament comprend
grossissements de 30.000 à 40.000 diamètres.
un canal central autour duquel s’enroulent les
unités morphologiques selon une symétrie héli-
Résultats.
coïdale.
L’examen des grilles révèle la présence de
particules de forme plus ou moins arrondie
Discussion.
dont la taille varie entre 1.500 et 7.000 A, avec
Le virus PPR a la même structure que les
une prépondérance d’éléments mesurant autour
Paramyxovirus dont le type est le Para-lnfluenza
de 5.000 A. Les particules de faible taille sont
décrit par WATERSON et HURREL (1962). Sa
en nette minorité. Après examen d’un certain
structure est identique à celle de la Peste Bovine
nombre de grilles, il n’a pas été permis de retrou-
décrite par PLOWRIGHT et Coll. (1962).
ver de forme filamenteuse (photos 1 à 4).
Le schéma montre la structure d’un Para-
Les particules sont formées d’une enveloppe
myxovirus,
d’environ 100 Ai d’épaisseur à l’extérieur de
Cependant contrairement au virus de la
laquelle on note la présence d’un fin liseré
Peste Bovine dont le diamètre excède rarement
d’environ 100 x représentant les projections.
3.000 A, de nombreux virus PPR dépassent
Certaines particules
dont la membrane est
cette taille et atteignent 5.000 à 7.000 A.
rompue sous l’action de l’acide phosphotung-
stique montrent une structure interne plus ou
Institut d’Elevage et de Médecine
moins altérée. La photo no 4 permet de distin-
vétérinaire des Pays tropicaux.
guer des portions de la nucléocapside. La photo
Laboratoire national de I'Elevage
c
no 5 montre une particule virale dont la nucléo-
de Dakar-Hann.
P
SUMMARY
Note on the structure of the small ruminants pest virus
The structure of the virus of the pest of small ruminants shows, when stu-
died in negative coloration some similarity with Rinderpest an Measles virus. It
shows an enveloppe bristling with extensions and an interna1 filament with
helicoïdal symmetry which represents the nucleocapside. However the parti-
cles are bigger in size than those of Rinderpest virus.
RESUME N
Nota sobre la estructura del virus de la peste de 10s pequeiios rumiantes
La estructura del virus de la peste de 10s pequefios rumiantes estudiada
con coloraci6n negativa demuestra su parecer con la del virus bovipestico y del
virus morbilloso. Comprende un tegumento erizado por proyecciones y un
filamento interno de simetria helicoidal representando la nucleocapsida. Sin
embargo, el tamafio de las particulas es mas grande que el del virus bovipes-
tico.
BIBLIOGRAPHIE
BRENNER (S.) et HORNE (R.W.). - A nega-
GILBERT (Y.) et MONNIER (J.). -Adaptation
t i v e s t a i n i n g m e t h o d f o r h i g h r e s o l u t i o n
du virus de la PPR aux cultures cellulaires.
electron microscopy
o
f
viruses. Biochim.
Rev. Elev. Méd. vét. Pays trop. 1962, 4, 321-
Biophys. Acta, 1959, 34, 103-110.
335.
385
M O R N E T (P.), ORUE ( J . ) , G I L B E R T ( Y , ) ,
WATERSON ( A . P.) e t A L M E I D A (J. D.). -
THIERRY (G.) et MAMADOU (S.). - La
Taxonomie implicationsofMyxovirus. Nature
Peste des Petits Ruminants en Afrique occi-
(Lond.), 1966, 210, 1138-1140.
dentale française. Ses rapports avec la WATERSON (A. P.), CRUICKSHANK (J. G.),
=
Peste Bovine. Rev. Elev. Méd. vét. Pays trop.,
KANAREK (A. D.), LAURENCE (G. D.). -
1956, 9, 313-342.
The nature of measles virus, Virology, 1961,
PLOWRIGHT (W.), CRUICKSHANK (J. G.) et
15, 379-382.
WATERSON (A. P.). - The morphology WATERSON (A. P.), et HURRELL (J. M.W.). -
of rinderpest virus, Virology, 1962, 17, II 8-
The fine structure of the Para-lnfluenza
122.
viruses. Arch. Gesom, Virusforsch. 1962, 12,1,
138-142.
VÉTÉRINAIRE DES PAYS TROPICAUX
REVUE D’ÉLEVAGE
ET DE
MÉDECINE VÉTÉRINAIRE
DES PAYS TROPICAUX
2
Note sur la structure du virus
de la peste des petits ruminants
par P. BOURDIN et A. LAURENT-VAUTIER
Tome XX (nouvelle série)
No 3 - 1967
-= vIGoT FRÈRES, É DITEURS ~
l
23, rue de l’École-de-Médecine, PARIS-VI’
8 *
Rev. Elev. M-d. Vét. Pays trop., 1967, 20, 3 (383-386)
Note sur la structure du virus
de la peste des petits ruminants
P. BOURRIN ef A. LAURENT-VAUTIER
RÉSUMÉ
L’étude de la structure du virus PPR en coloration négative montre sa ressem-
blance avec le virus bovipestique et le virus morbilleux. II est formé d’une enve-
loppe hérissée de projections et d’un filament inierne à symétrie hélicoidale
représentant la nucléocapside. Cependant, la taille des particules est plus grande
que celle du virus bovipestique.
La Peste des Petits Ruminants (PPR) a été
contenant 0,s p. 100 d’hydrolysat de lactalbu-
décrite par MORNET, ORUE et Coll. (1956).
mine, 0,l p, 100 d’extrait de levure, 2 p. 100 de
Ces auteurs ont montré que l’agent en cause
sérum de veau et 1,5 p, 1.000 de bicarbonate de
était un virus pestique adapté aux petits rumi-
sodium. Après incubation à 400 C, le milieu est
nants. Ce virus a été cultivé sur cellules rénales
changé ies 3e et 7e jours. Le liquide virulent et
d’embryon de mouton par GILBERT et MON-
les cellules sont récoltés le 10e jour après trois
NIER (1962). L’effet cytopathogène observé
cycles successifs de congélation et décongéla-
diffère sensiblement de celui provoqué par le
tion. Le virus est ensuite concentré selon la
virus bovipestique quant à la date d’apparition
méthode décrite par WATERSON et Coll. (1961)
des lésions, leur morphologie et leur évolution.
pour le virus de la rougeole.
GILBERT et MONNIER ont confirmé la simili-
Le liquide virulent est centrifugé 10 minutes
tide antigénique du virus PPR et du virus de
à 1.500 t/mn pour éliminer les débris cellu-
la Peste Bovine.
laires. Le surnageant est ultracentrifugé 1 heure
La structure du virus pestique a été étudiée
à 100.000 g. Le culot repris dans 5 ml de PBS,
par PLOWRIGHT, CRUICKSHANK et WATER-
est clarifié à 1.500 t/mn pendant 10 minutes.
SON (1962), en microscopie électronique après
Le surnageant est ultracentrifugé 1 heure à
coloration négative selon la méthode de BREN-
100.000 g. Le culot est resuspendu dans 0,5 ml
NER et HORNE (1959). Ces auteurs ont montré
d’acétate d’ammonium à 1 p. 100. II est conservé
sa ressemblance avec le virus morbilleux décrit
à -700 C jusqu’au moment de l’examen.
par WATERSON et Coll. (1961). II a semblé
intéressant de faire une étude comparative de
E X A M E N D E S É C H A N T I L L O N S
la structure du virus PPR.
EN MICROSCOPIE ÉLECTRONIQUE (*)
Après décongélation, on mélange une goutte
MATÉRIEL ET MÉTHODE
de virus concentré à une goutte de phospho-
La souche G7F a été utilisée. Elle est consti-
tungstate de sodium à 2 p. 100 ajusté à pH 7,2.
tuée par le 7e passage à 400 C sur cellules ré-
nales d’embryon de mouton du virus PPR isolé
(*) Nous désirons remercier ici, M. BOISSON, Profes-
par GILBERT et MONNIER (1962).
seur à l’Université de Dakar et qui a bien voulu nous
Une bo?te de Roux dont le tapis cellulaire est
autoriser à travailler dans son laboratoire. Nous remer-
complet, est inoculée à raison de 10, DI,,CT
cions également les assistants de M. BOISSON qui ne nous
ont pas ménagé leur concours durant l’accomplissement
de virus pour 100 ml de milieu de Hanks,
de nos travaux.
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R E V U E D’ÉI.EV.4GE
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Photos 1 et 2. - Particules intactes dont on distingue la membrane et les projections. Grossis. : x 170.000.
Photos 3 et 4. - Particules de virus PPR altérées sous l’action de l’acide phosphotungstique, permettant de voir
la structure interne. Sur la photo n (’ 3, on observe un petit diverticule représentant une portion de membrane en
train de se séparer. Pr. : projections ; En. : enveloppe ; Nu. Cap. : nucléocapside. Grossis. : ;G. 170.000.
PhoTo rP 5 . - Par-licule tZrlut& ~monl~nml le LIament nucléo-capsidicn à s y m é t r i e hklicoidale. O n dist\\ngue l e
canal central et les unités morphologiques. On peut voir également un fragment d’enveloppe (flèche). Grossis. :
x 220.000.
Une microgoutte du mélange est déposée sur
capside est déroulée dans le milieu extérieur.
une grille recouverte d’un film de collodion
On note que cette nucléocapside est composée
.
carboné. Après séchage, la grille est examinée
d’un long filament emmêlé, dont le diamètre
avec un microscope électronique OPL à des
est de 180 A en moyenne. Ce filament comprend
grossissements de 30.000 à 40.000 diamètres.
un canal central autour duquel s’enroulent les
unités morphologiques selon une symétrie héli-
Résultats.
coïdale.
L’examen des grilles révèle la présence de
particules de forme plus ou moins arrondie
Discussion.
dont la taille varie entre 1.500 et 7.000 A, avec
Le virus PPR a la même structure que les
une prépondérance d’éléments mesurant autour
Paramyxovirus dont le type est le Para-lnfluenza
de 5.000 A. Les particules de faible taille sont
décrit par WATERSON et HURREL (1962). Sa
en nette minorité. Après examen d’un certain
structure est identique à celle de la Peste Bovine
nombre de grilles, il n’a pas été permis de retrou-
décrite par PLOWRIGHT et Coll. (1962).
ver de forme filamenteuse (photos 1 à 4).
Le schéma montre la structure d’un Para-
Les particules sont formées d’une enveloppe
myxovirus,
d’environ 100 Ai d’épaisseur à l’extérieur de
Cependant contrairement au virus de la
laquelle on note la présence d’un fin liseré
Peste Bovine dont le diamètre excède rarement
d’environ 100 x représentant les projections.
3.000 A, de nombreux virus PPR dépassent
Certaines particules
dont la membrane est
cette taille et atteignent 5.000 à 7.000 A.
rompue sous l’action de l’acide phosphotung-
stique montrent une structure interne plus ou
Institut d’Elevage et de Médecine
moins altérée. La photo no 4 permet de distin-
vétérinaire des Pays tropicaux.
guer des portions de la nucléocapside. La photo
Laboratoire national de I'Elevage
c
no 5 montre une particule virale dont la nucléo-
de Dakar-Hann.
P
SUMMARY
Note on the structure of the small ruminants pest virus
The structure of the virus of the pest of small ruminants shows, when stu-
died in negative coloration some similarity with Rinderpest an Measles virus. It
shows an enveloppe bristling with extensions and an interna1 filament with
helicoïdal symmetry which represents the nucleocapside. However the parti-
cles are bigger in size than those of Rinderpest virus.
RESUME N
Nota sobre la estructura del virus de la peste de 10s pequeiios rumiantes
La estructura del virus de la peste de 10s pequefios rumiantes estudiada
con coloraci6n negativa demuestra su parecer con la del virus bovipestico y del
virus morbilloso. Comprende un tegumento erizado por proyecciones y un
filamento interno de simetria helicoidal representando la nucleocapsida. Sin
embargo, el tamafio de las particulas es mas grande que el del virus bovipes-
tico.
BIBLIOGRAPHIE
BRENNER (S.) et HORNE (R.W.). - A nega-
GILBERT (Y.) et MONNIER (J.). -Adaptation
t i v e s t a i n i n g m e t h o d f o r h i g h r e s o l u t i o n
du virus de la PPR aux cultures cellulaires.
electron microscopy
o
f
viruses. Biochim.
Rev. Elev. Méd. vét. Pays trop. 1962, 4, 321-
Biophys. Acta, 1959, 34, 103-110.
335.
385
M O R N E T (P.), ORUE ( J . ) , G I L B E R T ( Y , ) ,
WATERSON ( A . P.) e t A L M E I D A (J. D.). -
THIERRY (G.) et MAMADOU (S.). - La
Taxonomie implicationsofMyxovirus. Nature
Peste des Petits Ruminants en Afrique occi-
(Lond.), 1966, 210, 1138-1140.
dentale française. Ses rapports avec la WATERSON (A. P.), CRUICKSHANK (J. G.),
=
Peste Bovine. Rev. Elev. Méd. vét. Pays trop.,
KANAREK (A. D.), LAURENCE (G. D.). -
1956, 9, 313-342.
The nature of measles virus, Virology, 1961,
PLOWRIGHT (W.), CRUICKSHANK (J. G.) et
15, 379-382.
WATERSON (A. P.). - The morphology WATERSON (A. P.), et HURRELL (J. M.W.). -
of rinderpest virus, Virology, 1962, 17, II 8-
The fine structure of the Para-lnfluenza
122.
viruses. Arch. Gesom, Virusforsch. 1962, 12,1,
138-142.