REPUBLIQUE DU SENEGAL w---y : MINISTERE DU...
REPUBLIQUE DU SENEGAL
w---y :
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
* INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
A G R I C C L E S ( I . S . R . A . )
i, s..
,{: :
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERiNAIRES
B.P. 2057
D A K A R - HANN
I.
IIXOTE TECHNIQUE
DIAGNOSTIC DWRI ENTATION DES PRINCIPALES
MALADIES BACTERIENNES REALISABLE
AU NIVEAU DES LABORATOIRES DE
POSTES VETERI NAI WES REGIIONAUX
Par
Ml. KONTE
R E F . No 77/BACTERIO.
Novembre 1988.
Le Direction de I’Elevage se propose de mettre en place, dans les
chefs-lieux de région, de petits laboratoires d’analyses médicales pour
des diagnostics de routine.
Cette note définit,dans le cadre de la collaboration Recherches/
Développement, leurs prérogatives en matière de pathologie bactérienne.
MAGNOSTIC D”ORIEHTATION DES PRINCIPALES
MALADIES BACTERIEWNES REALISABLE
AU NIVEAU DES LABORATOIRES DE
POSTES VETERINAIRES REGIONAUX
1. CHARBON BACTERIDIEN
l”) Diagnostic nécropsique : grande importance
- sang noir, épais, incoagulable
- rate hypertrophiée, foncée, boueuse
- urine noire, foncée, teintée de sang
- absence de rigidité cadavérique, congestion.
2O) Diagnostic de laboratoire
- Prélèvement : sang, pulpe splénique de cadavre frais
os long (si putréfaction), foie
- Bactérioscopie :
. réaliser un frottis de sang, de rate, de culot urinaire ou de
moelle osseuse
. coloration de Cram
. lecture au microscope : bacille à Gram positif, volumineux, rectiligne,
à bout taré, en éléments isolés ou en courte chaînette (2 à 5 articles),
capsulé : peut faire penser à Bacillus anthracis recherché.
- Recherche des antigènes charbonneux :
. Test de certitude chez les ruminants et le cheval : la séro-
précipitation ou réaction d’Ascoli : réalisable même à partir de
matières desséchées ou putréfiées.
. Si doute, envoi d’os long au LNERV pour confirmation.
l
. . . . . .
- 2
3O) Matériel
- Microscope optique et lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Encre de chine
- Sérum hyperimmun (sérum précipitant d’Ascoli)
- Matériel de froid
- Broyeur de verre
- Petit tube à essai stérile.
I 1. CHARBON SYMPTOMATIQUE
1”) Diagnostic nécropsique : suspicion
- Tumeur charbonneuse au sein des masses musculaires : lésions de myosite
hémorragique gangréneuse, à centre noir, infiltré de gaz nauséabond ;
- ganglions du territoire hypertrophiés et infiltrés de gaz.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : tumeur, sérosité de la tumeur, os long
- Bactérioscopie :
. réaliser un frottis de sérosité ou de moelle osseuse
. coloration de Gram
. lecture au microscope : bacille à Gram positif, sporulé à
spore centrale ou subterminale déformante : un tel bacille
peut être Clostridium chauvoei, un des agents incriminés
- Envoi
au LNERV d’os long pour confirmation.
. . . / . . .
- 3
3O) Matériel
- Microscope optique et lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Matériel de froid.
Ill. BOTULISME
l”) Diagnostic clinique : suspicion
Syndrome neuro-paralytique évoluant rapidement vers la mort (due à
une intoxination ou une toxi-infection d’origine alimentaire, d’où le caractère
collectif).
2O) Diagnostic nécropsique
Absence de lésions notables à l’autopsie.
3O) Laboratoire
- Prélèvements : aliment ou eau suspects, foie avant putréfaction,
contenu stomacal. . .
- Recherche de la toxine
Inoculer au cobaye le prélèvement (eau ou filtrat de broyage d’organe
ou d’aliments) en sous-sutanée (en présence de pénicilline), ou par voie
buccale ; une réaction positive se traduit par une paralysie en 24 à 48 h
des muscles de la nuque : tête posée sur le sol avec incapacité de la relever,
salivation abondante, ataxie et parésie locomotrice.. . mort en un à quatre
jours.
- Envoi au LNERV des prélèvement pour isolement et toxinotypie
(Clostridium botulinum incriminé).
. . . I . . .
- 4
4O) Matériel
- Matériel de prélèvement stérile
- Matériel d’inoculation stérile
- Cobaye
- Matériel de froid.
IV. DERMATOPHILOSE OU STREPTOTHRICOSE CUTANEE BOVINE
l”) Diagnostic clinique : important
Dermatite croûteuse évoluant seulement en hivernage.
(Faire un diagnostic différentiel avec d’autres affections cutanées).
2O) Laboratoire
- Prélèvements : croûtes cutanées
- Bactérioscopie
. Frottis à partir du produit de raclage de la surface interne de la
croûte ;
. coloration au bleu de méthylène, ou mieux, à la thionine phéniquée,
ou encore au Ciemsa chaud ou au Gram ;
. lecture au microscope : germe de morphologie particulière (Dermatophi-
lus congolensis, du groupe des Actinomycètes) : rangées accolées
d’éléments coccoïdes : fragments mycéliens à diamètre variable formés
d’éléments cocciformes disposés en double, triple, quadruple rangées ;
parfois le pseudomycélium semble avoir éclaté et les éléments cocciformes
s’être répandus en amas. Germe à Gram positif.
. . . l . . .
- 5
3O) Matériel
- Microscope et lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Bleu de méthylène (ou de toluidine)
- Thionine phéniquée
- Giemsa ou May-Crünwald-Giemsa
- Matériel de froid.
V. NOCARDIOSE OU FARCIN DU BOEUF
1”) Diagnostic clinique
Présence d’une lymphangite purulente : empâtement ganglionnaire s’accen-
tuant très lentement ; prédominance de l’atteinte des ganglions préscapu-
laires et précruraux ; ils s’indurent, deviennent irréguliers, polynodulaires
(grosseur de 2 poings, voire la taille d’une tête d’enfant). L’abcédation n’est
pas de règle, et est toujours tardive. De ces lésions peuvent partir des
cordes lymphatiques avec des nodules en chapelet atteignant parfois le pli
du genou et descendant sur la face interne du canon.
Evolution chronique, des mois, un an et plus ; l’état général des animaux
ne semble pas affecté, du moins au début.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : abcès ganglionnaires
- Bactérioscopie
. Frottis de pus
. Coloration de Ziehl (différencier avec l’alcool seulement et non avec
l’alcool et l’acide) ;
. Lecture au microscope : germe alcoolo-résistant sous forme de lacis de
filaments enchevêtrés, ramifiés, solidaire d’une gangue de cellules
nécrosées, donnant l’image d’un “buisson ardent” (rougeâtre sur fond
bleu) : doit faire penser à Mycobacterium farcinogenes (agent présumé).
- Envoi des prélèvements au LNEl?V pour confirmation.
/
. . . . . .
- 6
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Ziehl
- Matériel de froid.
VI. PARATUBERCULOSE DES RUMINANTS OU MALADIE DE JOHNE
1”) Diagnostic clinique : suspicion
Entérite hypertrophiante avec amaigrissement progressif : épaississement
de la muqueuse intestinale dessinant des “circonvolutions cérébroïdes”, hyper-
trophie des ganglions mésentériques succulents à la coupe.
Se traduit par une diarrhée chronique ou intermittente rebelle aux
traitements usuels.
2O) Laboratoire
- Prélevements
: anse intestinale, ganglions mésentériques, fécès,
produits de raclage rectale.
- Bactérioscopie
. Frottis à partir du produit de raclage de la muqueuse intestinale ou
rectale, et des sections ganglionnaires GU de fécès
. coloration de Ziehl
. lecture au microscope : bacille acide-alcoolo-résistant, court et mince,
en amas, avec des éléments isolés et dispersés, rouge sur fond bleu :
caractéristique de Mycobacterium paratuberculosis ou bacille de Johnc
- Envoi au LMERV pour confirmation par culture.
. . . I . . .
- 7
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Ziehl
- Matériel de froid.
VI 1. TUBERCULOSE
l”) Diagnostic clinique et nécropsique
Tubercules,
à sièges divers, pulmonaire principalement, avec retentisse-
ment ganglionnaire. Evolution lente et amaigrissement progressif.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : tubercules, ganglions, lait, jetage, poumons,
épanchement thoracique, fécès.
- Bactérioscopie
. Frottis à partir des prélèvements
. coloration de Ziehl
. lecture au microscope : bacille acide-alcoolo-résistant, mince, isolé,
rouge sur fond bleu : peut être le bacille de Koch dont il exite
3 espèces : le bacille humain : Mycobacterium tuberculosis, pouvant
contaminer les bovins, d’autres mammifères et les oiseaux de volière ;
le bacille bovin : Mycobacteri um bovi s , pouvant contaminer aussi
l’homme ainsi que d’autres mammifères et la poule ;
le bacille aviaire : Mycobacterium avium, pouvant contaminer l’homme
et les autres mammifères.
- Envoi au LNERV des prélèvements pour confirmation par culture.
. . . / . . .
- a
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Ziehl
- Matériel de froid.
VII 1. BRUCELLOSE
l”) Diagnostic clinique : suspicion
- Avortement
- Hygroma.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : sérum, liquide de ponction d’hygroma, lait,
sperme, cotylédons lésés. . .
- Bactérioscopie
. Frottis de cotylédons, de liquide d’hygroma, de sperme
. coloration de Gram
. coloration de Koster
. coloration de Stamp
. lecture au microscope : coccobacille ou petit bâtonnet, à Cram
négatif, habituellement isolé, rarement disposé par paire ou en
courte chaînette, acapsulé, aflagellé et non sporulé : peut être
Brucella.
- Sérologie
. Séro-agglutination rapide sur plaque : test au Rose Bengale ;
. épreuve de l’anneau ou ring-test.
- Si doute, envoi des prélèvements au LNERV.
. . . I . . .
- 9
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Kit-Koster
- Kit-Stamp
- Antigène ring-test
- Antigène Rose Bengale
- Matériel de froid.
IX. PASTEURELLOSES
Envoyer les prélèvements pour isolement et identification au LNERV :
os long et fragments de tissus pulmonaires.
X. PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
- Orientation : par séro-agglutination rapide sur lame avec un antigène
coloré (limites).
- Envoyer au LNERV : lymphe thoracique, poumon et sérum pour
confirmation.
Xl. AGALACTIE CONTAGIEUSE CAPRINE
Envoyer au LNERV le lait mammiteux pour analyse.
Xl 1. AUTRES PATHOLOGIES
Envoi au LNERV de prélèvements adéquats.
w---y :
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
* INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
A G R I C C L E S ( I . S . R . A . )
i, s..
,{: :
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERiNAIRES
B.P. 2057
D A K A R - HANN
I.
IIXOTE TECHNIQUE
DIAGNOSTIC DWRI ENTATION DES PRINCIPALES
MALADIES BACTERIENNES REALISABLE
AU NIVEAU DES LABORATOIRES DE
POSTES VETERI NAI WES REGIIONAUX
Par
Ml. KONTE
R E F . No 77/BACTERIO.
Novembre 1988.
Le Direction de I’Elevage se propose de mettre en place, dans les
chefs-lieux de région, de petits laboratoires d’analyses médicales pour
des diagnostics de routine.
Cette note définit,dans le cadre de la collaboration Recherches/
Développement, leurs prérogatives en matière de pathologie bactérienne.
MAGNOSTIC D”ORIEHTATION DES PRINCIPALES
MALADIES BACTERIEWNES REALISABLE
AU NIVEAU DES LABORATOIRES DE
POSTES VETERINAIRES REGIONAUX
1. CHARBON BACTERIDIEN
l”) Diagnostic nécropsique : grande importance
- sang noir, épais, incoagulable
- rate hypertrophiée, foncée, boueuse
- urine noire, foncée, teintée de sang
- absence de rigidité cadavérique, congestion.
2O) Diagnostic de laboratoire
- Prélèvement : sang, pulpe splénique de cadavre frais
os long (si putréfaction), foie
- Bactérioscopie :
. réaliser un frottis de sang, de rate, de culot urinaire ou de
moelle osseuse
. coloration de Cram
. lecture au microscope : bacille à Gram positif, volumineux, rectiligne,
à bout taré, en éléments isolés ou en courte chaînette (2 à 5 articles),
capsulé : peut faire penser à Bacillus anthracis recherché.
- Recherche des antigènes charbonneux :
. Test de certitude chez les ruminants et le cheval : la séro-
précipitation ou réaction d’Ascoli : réalisable même à partir de
matières desséchées ou putréfiées.
. Si doute, envoi d’os long au LNERV pour confirmation.
l
. . . . . .
- 2
3O) Matériel
- Microscope optique et lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Encre de chine
- Sérum hyperimmun (sérum précipitant d’Ascoli)
- Matériel de froid
- Broyeur de verre
- Petit tube à essai stérile.
I 1. CHARBON SYMPTOMATIQUE
1”) Diagnostic nécropsique : suspicion
- Tumeur charbonneuse au sein des masses musculaires : lésions de myosite
hémorragique gangréneuse, à centre noir, infiltré de gaz nauséabond ;
- ganglions du territoire hypertrophiés et infiltrés de gaz.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : tumeur, sérosité de la tumeur, os long
- Bactérioscopie :
. réaliser un frottis de sérosité ou de moelle osseuse
. coloration de Gram
. lecture au microscope : bacille à Gram positif, sporulé à
spore centrale ou subterminale déformante : un tel bacille
peut être Clostridium chauvoei, un des agents incriminés
- Envoi
au LNERV d’os long pour confirmation.
. . . / . . .
- 3
3O) Matériel
- Microscope optique et lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Matériel de froid.
Ill. BOTULISME
l”) Diagnostic clinique : suspicion
Syndrome neuro-paralytique évoluant rapidement vers la mort (due à
une intoxination ou une toxi-infection d’origine alimentaire, d’où le caractère
collectif).
2O) Diagnostic nécropsique
Absence de lésions notables à l’autopsie.
3O) Laboratoire
- Prélèvements : aliment ou eau suspects, foie avant putréfaction,
contenu stomacal. . .
- Recherche de la toxine
Inoculer au cobaye le prélèvement (eau ou filtrat de broyage d’organe
ou d’aliments) en sous-sutanée (en présence de pénicilline), ou par voie
buccale ; une réaction positive se traduit par une paralysie en 24 à 48 h
des muscles de la nuque : tête posée sur le sol avec incapacité de la relever,
salivation abondante, ataxie et parésie locomotrice.. . mort en un à quatre
jours.
- Envoi au LNERV des prélèvement pour isolement et toxinotypie
(Clostridium botulinum incriminé).
. . . I . . .
- 4
4O) Matériel
- Matériel de prélèvement stérile
- Matériel d’inoculation stérile
- Cobaye
- Matériel de froid.
IV. DERMATOPHILOSE OU STREPTOTHRICOSE CUTANEE BOVINE
l”) Diagnostic clinique : important
Dermatite croûteuse évoluant seulement en hivernage.
(Faire un diagnostic différentiel avec d’autres affections cutanées).
2O) Laboratoire
- Prélèvements : croûtes cutanées
- Bactérioscopie
. Frottis à partir du produit de raclage de la surface interne de la
croûte ;
. coloration au bleu de méthylène, ou mieux, à la thionine phéniquée,
ou encore au Ciemsa chaud ou au Gram ;
. lecture au microscope : germe de morphologie particulière (Dermatophi-
lus congolensis, du groupe des Actinomycètes) : rangées accolées
d’éléments coccoïdes : fragments mycéliens à diamètre variable formés
d’éléments cocciformes disposés en double, triple, quadruple rangées ;
parfois le pseudomycélium semble avoir éclaté et les éléments cocciformes
s’être répandus en amas. Germe à Gram positif.
. . . l . . .
- 5
3O) Matériel
- Microscope et lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Bleu de méthylène (ou de toluidine)
- Thionine phéniquée
- Giemsa ou May-Crünwald-Giemsa
- Matériel de froid.
V. NOCARDIOSE OU FARCIN DU BOEUF
1”) Diagnostic clinique
Présence d’une lymphangite purulente : empâtement ganglionnaire s’accen-
tuant très lentement ; prédominance de l’atteinte des ganglions préscapu-
laires et précruraux ; ils s’indurent, deviennent irréguliers, polynodulaires
(grosseur de 2 poings, voire la taille d’une tête d’enfant). L’abcédation n’est
pas de règle, et est toujours tardive. De ces lésions peuvent partir des
cordes lymphatiques avec des nodules en chapelet atteignant parfois le pli
du genou et descendant sur la face interne du canon.
Evolution chronique, des mois, un an et plus ; l’état général des animaux
ne semble pas affecté, du moins au début.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : abcès ganglionnaires
- Bactérioscopie
. Frottis de pus
. Coloration de Ziehl (différencier avec l’alcool seulement et non avec
l’alcool et l’acide) ;
. Lecture au microscope : germe alcoolo-résistant sous forme de lacis de
filaments enchevêtrés, ramifiés, solidaire d’une gangue de cellules
nécrosées, donnant l’image d’un “buisson ardent” (rougeâtre sur fond
bleu) : doit faire penser à Mycobacterium farcinogenes (agent présumé).
- Envoi des prélèvements au LNEl?V pour confirmation.
/
. . . . . .
- 6
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Ziehl
- Matériel de froid.
VI. PARATUBERCULOSE DES RUMINANTS OU MALADIE DE JOHNE
1”) Diagnostic clinique : suspicion
Entérite hypertrophiante avec amaigrissement progressif : épaississement
de la muqueuse intestinale dessinant des “circonvolutions cérébroïdes”, hyper-
trophie des ganglions mésentériques succulents à la coupe.
Se traduit par une diarrhée chronique ou intermittente rebelle aux
traitements usuels.
2O) Laboratoire
- Prélevements
: anse intestinale, ganglions mésentériques, fécès,
produits de raclage rectale.
- Bactérioscopie
. Frottis à partir du produit de raclage de la muqueuse intestinale ou
rectale, et des sections ganglionnaires GU de fécès
. coloration de Ziehl
. lecture au microscope : bacille acide-alcoolo-résistant, court et mince,
en amas, avec des éléments isolés et dispersés, rouge sur fond bleu :
caractéristique de Mycobacterium paratuberculosis ou bacille de Johnc
- Envoi au LMERV pour confirmation par culture.
. . . I . . .
- 7
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Ziehl
- Matériel de froid.
VI 1. TUBERCULOSE
l”) Diagnostic clinique et nécropsique
Tubercules,
à sièges divers, pulmonaire principalement, avec retentisse-
ment ganglionnaire. Evolution lente et amaigrissement progressif.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : tubercules, ganglions, lait, jetage, poumons,
épanchement thoracique, fécès.
- Bactérioscopie
. Frottis à partir des prélèvements
. coloration de Ziehl
. lecture au microscope : bacille acide-alcoolo-résistant, mince, isolé,
rouge sur fond bleu : peut être le bacille de Koch dont il exite
3 espèces : le bacille humain : Mycobacterium tuberculosis, pouvant
contaminer les bovins, d’autres mammifères et les oiseaux de volière ;
le bacille bovin : Mycobacteri um bovi s , pouvant contaminer aussi
l’homme ainsi que d’autres mammifères et la poule ;
le bacille aviaire : Mycobacterium avium, pouvant contaminer l’homme
et les autres mammifères.
- Envoi au LNERV des prélèvements pour confirmation par culture.
. . . / . . .
- a
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Ziehl
- Matériel de froid.
VII 1. BRUCELLOSE
l”) Diagnostic clinique : suspicion
- Avortement
- Hygroma.
2O) Laboratoire
- Prélèvements : sérum, liquide de ponction d’hygroma, lait,
sperme, cotylédons lésés. . .
- Bactérioscopie
. Frottis de cotylédons, de liquide d’hygroma, de sperme
. coloration de Gram
. coloration de Koster
. coloration de Stamp
. lecture au microscope : coccobacille ou petit bâtonnet, à Cram
négatif, habituellement isolé, rarement disposé par paire ou en
courte chaînette, acapsulé, aflagellé et non sporulé : peut être
Brucella.
- Sérologie
. Séro-agglutination rapide sur plaque : test au Rose Bengale ;
. épreuve de l’anneau ou ring-test.
- Si doute, envoi des prélèvements au LNERV.
. . . I . . .
- 9
3O) Matériel
- Microscope avec lames
- Matériel de prélèvement stérile
- Kit-Gram
- Kit-Koster
- Kit-Stamp
- Antigène ring-test
- Antigène Rose Bengale
- Matériel de froid.
IX. PASTEURELLOSES
Envoyer les prélèvements pour isolement et identification au LNERV :
os long et fragments de tissus pulmonaires.
X. PERIPNEUMONIE CONTAGIEUSE BOVINE
- Orientation : par séro-agglutination rapide sur lame avec un antigène
coloré (limites).
- Envoyer au LNERV : lymphe thoracique, poumon et sérum pour
confirmation.
Xl. AGALACTIE CONTAGIEUSE CAPRINE
Envoyer au LNERV le lait mammiteux pour analyse.
Xl 1. AUTRES PATHOLOGIES
Envoi au LNERV de prélèvements adéquats.