I NST 1 TUT SENEGAL/+ I S DE RECHERCHES AGRICOLES...
I NST 1 TUT SENEGAL/+ I S DE RECHERCHES
AGRICOLES (I.S.R.A. 1
m--L._<l----I.._.--..,C._:--_,-
LABORATO I RE NAT l ONAL DE L’ELEVAGE
5 ?sL
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
-
-
MICROFLORE BACTERIENNE NORMALE VAGINALE
ET PREPUTI F\\LE CHEZ LES WV INS AU SENEGAL
P a r M . K@MTE’-
R E F . 08/MICROBlOLOGIE
J A N V I E R 198U
MICROFLORE BACTERIENNE NORMALE VAGINALE
ET PREPUTIALE CHEZ LES BOVINS AU SENEGAL
Par M. KONTE *
,.
Cette etude a p9u.r but de définir te profil gén&ai~ qua
:
itatif de la microflore
des segments genitaux externes de la vache et du taureau .cIin quement normaux# -dans
ses rapports avec le pH et dans son évolution dans le temps.
Elle revêt un triple intér&t,'dogmatique, physiologique et pathologique (4).
En effet, la connaissance systématique de la composition qualitative réalise
une dimensi 0 n géneraie et fondamentale en pathologie comparée.
Par ai Ileurs, la présence ou l'absence d'une flore autochtone, vaginale et'
préputiale, doit être étudlée sous l'angle physiologique du, caractere symbiot ique ou
parasitaire , nécessaire ou non, de ses residents.
Enfin, la recherche des causes microbiennes de la steril té, ou autres mani-
festations pathologiques de la reproduction chez la vache, réc ame, en patho-
gynécologie,
la définition qualitative et quantitative de la f ore autochtone par
rapport à la flot-a essentiellement pathogeno.
Ce travail a intéresse les animaux pubères et impub&-es, mâles et femelles,
tous normaux, appartenant aux races locales (Taurins Ndama et Zébus Gobra) et aux
races importées (Taurins Montbiiliards et Zébus Pakistanals).
'i
l- MATERIEL, METHODES ET.TECHNIQUES
1°) - &s animaux
I
L'étude menée constitue la première approche d'un programme de recherche 2
réhliser au service de Bactericlogie,
* Pour tout détails, voir : Ecologie bactérienne des parties distales du trac-tus
'génital cher les bovins au Sénégal - M6moire'de confirmation de' M. KONTE,, Docteur
Vetérinaire - REF. N" 112/MI~CROBIO - NOVEMBRE 1985 - LNERV - B.'P. 2057 DAKAR-HANN.
- 2 -
_;-. ,‘<
. .
Nous avons cholsf, pour asseoir une methodologie définitive, de travailler dars
les stations, oü I'6levage est de type am<~Iiore,
semi-intensif. Cette situation
offre l'avantag a de disposer des memes animaux pendant une p&iode suffisamment Ion-
gua pour permettre une répétition des analyses dans le temps. Par ailleurs, compte
tenu de l'ampleur du travail de laboratoire qu'un seul animal peut occasionner pour
un&* i'dehtific&ti&ï syst&matique des genres bacteriéns;
nous avons r6dui.t l'effectif
exp&-imenYoI"et r'é,tenu“ié'chiffr;e'de
20 suJ&s Fit- station; rcportis comme suit :
5 femelles pubères, 5 femelles impube'ros,
5 mâl'es adultes, '5' mâl,es 'impuberes, ceci
pour les stations, & Kol,da.et Dahra (Centre.:& Recherches Zootechniquas) car.l'opé-
:
..'
rat!on n'a concert6 que les adultes peur la station de Sangalkam.
I
*.,.,
i ,; .-, :
Ces animaux sont vi,s,i,tes en,deu,x pet-iodes, fevrier-mars et août-septembre.
._
.
ZO) - MatQriel et techniques de p&levement
-.-
. . '/
.'
a) - Pr6levement de mucus vaginal
-
-
-
Ii est ri-alis& par 6couvillonn~ge du fornix et de I'exocol 2 l'aide
d'un sp6culum vaginal et d'une Icngue pince 3 forcipressure droite.
L'écouvii Ion, modele "Culturett" de la firme "Scientific proclucts", se cOmpûS6
d'une tige t3n plastique de 15 cm de I:ongg portant, ,f'ixé à un bout, du ca-ton card$ e'-
coulissant dans -un tube ,stéri,,le dont le fond contient 0,5 ml d'un milieu de transport
(Modified S-t.uart*s Bncteria.l.~transport Medjum). La tige dc l'écouvillon est fix@e au
fond d'un tube court seryant de bouchon au tube protecteur. Lc! pince à forcipressurt:
prolonge l'écouvillon pour atteindre le fornix, distant d'environ GO cm, 2 travers
le spéculum vaginal mesurant 30 cm de long et 3 cm de d.iamètre.
:.,
b) -- Prelèvement du liquide de rinçage du_prépuce.
- - - - - -
._--e-.--- -
'>
Il n6cessite une seringue en verre, '& 50 j 100Aml et & I'@aij bld!+
;.
tlllbé stériles. On procède par irrigatii)n
et siphonnage de la cavite preputiale.
Le prelèvement est conservé dans un tube à essai de diametre 22 mm également stérile
j
bouche au coton carde.
.,
:<
L'ensemble du,matérieI de prélèvemen,t ne doit subir aucune dGsinfect\\cn.chimi-
que préjudiciable à, la vitalité. de la flore reizhorchée, mais être soumis à un autocla-
vage classique.
. . . . . .
/
-3-
cl - M e s u r e d u p H
E l l e e s t effectuee à l’aide d e papier: fndlcateur sens i ble à 0,2 uni-
tés (Modèle Oxyphen-S#itzerland)
de 6,4 à 7,U, in s.itu, pour le mi.1 ieu vaginal, dans
le tube de recoite pour le liquide de rinçage du prepuce.
3O) - Bactérioloqie-
3) - Recherche de germes anaérobies et aéro-anakobies facultatifs
(F~AF 1 : ensemencement de mili,eux de culture divers (bouillon VF gluco.6 à 1 8,gélose
profonde VF à 6 p. 1000, gé lose VL-sang) ; bactér ioscop le après coloration de Gram
(2,3).
.
b) - Recherche non spécifique de germes aérobies et AAF
Culture en boui,I.ion nutritif, sur gélose nutritive, gélose-sérum,
gélose molle profonde VF, bactkioscople après coloration de Gram ; tests biochimi-
ques d’identification sur plaques API.
cl - Recherche de Brucella
Mi I ieux de culture : brucella-agar m o d i f i é + PE3C (Polymyxine - Baci-
tracine - Cycloheximide),
milieu trypticase-soja (Blo-Mérieux), gélose molle profon-
de VF, bactérioscopie apriis coloration de Gram ; spécification réalisée au Labora-
toire de Pathologie de la Reproduction à Nouzilly en France.
d) - Recherche de Mycoplasmes
I-
MI I ieu sélectif sol ide : Heart Infusion Broth Difco (H.I.B.1 * a 9ar
+ extrait de levure fraiche à 25 5% + sérum de cheval d6complément6 +.p&nicilllne
(L-S-FI 1, pour isolement direct p clonage en mi I ieu l iquide (HIB + L-S-P ou boui l Ion
tryptose-pénici f l ine + S-L) ; bactérioscopie par examan d’un état-frais (1).
e) - %c!.,:rc1.,3 de germes ac i 0-a Icoo lo-rés i stants IAAR 1
M i l i e u s é l e c t i f d’isolement d e s Mycobactéries (,Loewenstein-.Jensen) ;
bactérioscopie après coloration de Ziehl pour déflnir ,ie groupe.
. . ./ . . . .’
f) - Recherche de Lactobacilles
I
Milieu sélectif d'isclament, bouillon et gelose MRS ; coloration de
.Gram,;,. speci:fication sur plaques.API.:
r.
/ :
,
.A
:
‘,
:,'
- Recherches de Corynébact&ries
9)
V-
"._
Milieux de culture favorables : milieu de LOEFFLER et s$rum COFigUl& i
coloration de Gram ; identification sur plaques API.
..h.):. .i' .Recherehes.~'8de
Li ster ia, -:.,
."
.
'Ensemencement de bouillon trypi-6% mai'nfcnu ?I 4% 'pendant 10 jours
comme pro&& d'enrichissement, G$lose-mobilite ;' bac'teriwscopi e sur 4tat-fais 6-t
après coloration de Gram ; identification sur plaques API.
,
i) - Recherche de StreptocoquesV..
i
Ensemencement milleu s6lecti-f pour Strsptocoquas (IPP), gélose au
sang de mouton ; bacterloscopis après coIorati6n'ds Gram ; sérogroupage par "Slidex
. .
Strepto-Kit " (tiio-Mérieux).
i,
j) -- Recherche de Staphylocoques
-
-
\\
Milieu selectif d'isolsmcnt (milieu de'CHAPMAN1, bouillon pour
,:
staphyiocoacjulase,
plasma de lapin lyophilis6, bouillon nutritif ; coloration de
Gram ; Épreuve de la coagulaSe.
.'
I I
- RESULTATS
1°) - profil général de la microflore vaginale et prépu-tiale
-
-
-
-
<.
(voir tableau r!es pourcentages d'animaux porteurs).:
- Il existe une'microflcre bact6rienne chez tous.les animaux visites dor-
nant lieu à'un profil gékral.
- Cette microfiore est h6térogène et variabl e en nombre dres@ces
.<
>
l . /
. . . .
-5-
MICROFLORE VAGINALE ET PREPUTIALE :
POURCENTAGE D'ANIMAUX PORT-EURS
Germes
% en saison
% en saison
sèche et frarche
des pluies
- Gram négatifs
11,40
fi,85
. E. coli
1G
1,66
. P.:mirabIfIs
2 5
1,66
. Providencia sp.
3,33
0
. Enterobacter cloacae
1 0
1,66
. Pseudomonas aerugînosa
1,66
,56,66
Alteromonks putrefasciens
13,33
I
0
l
. Alcaligenes foecalls
3,33
0
. CDC groupe ,VE,
6,6S
0
. Nelsseria sp.
23,33
0
- Gram positifs
36,90
28,33
. C. pyogenes
60
61,66
. C. renaie
0
5
Lactobaciilus casei
18,33
28,33
l
. Bacilius sp.
76,66
43,33
. Streptocoques D
81,66
31,66
Diplococcus sp.
11,66
3,33
l
. Staphyiccoques NP
10
1
25
- A-A-R
- Clcstridium sp.
29,09
20
-
- Mycoplasma sp.
45,45
38
--
E. coli = Escherichia coli
P. mirabilis = Proteus mirabilis
CDC groupe VE, = Bactéries proches du genre Chromobacterium
C. pyogenes = Corynebacterium pyogenes
A-A-R = Acide-alcoolo-résistants
-6-
mais surtout en quantitB au niveau des troupeaux.<
-1 La microflore 5 Gram positi f domine toujours celle 2 Gram négatif,
chez toutes les races, au cours de toutes les saisons et pour tous les âges rctenuc.
'- Parmi les constjtuants 3 Gram positif, les cocci sont isolQs en majo-
rité (Streptocoques et aussi Staphylocoques non'pathogenes) ;' cependant,, les taacii-,
les sont auksi fréquemment mis en évidence (surtout Bacillussp.et Corynebacterium:.
-
-
-
-
11 faut noter la presence non'negligeable d?anaerobies stricts du genre Clostridium.
--..
:
.,: <__< ,.
- Les constituants dd la.f!ore U Gram n6gatif sont surtout-roprEsent&
par les F'seudomonas, $II certaine periode (hivernage). Les Enterobactérics sont beau-
coup plus rares (E.
-,
coli
proteus mirabilis, Providencia spp, Enterobacter>. Geau-
coup d'autres germes ne sont isolés qu'en saison sèche et.f.raÎche.
(Alteromonas,
Alcaligenes, CDC qrou@a VE, (Bactéries proches du genre Chromubacterium), Nsisseria,.
-
- Des germes acide-alcoolti-résistants sont mis en évidence en hivernage
chez les bovins senégalais uniquement.
- Aucun Brucella ni aucun Listeria, n'ont ét& observk.,,
'.
.’ .
201 - Variation de la flore en f..2nction de la saison
- - -
~-_--
Certains germes sont des résidents permanents, seulement variables en
nombre (cas'& tous les germes 2 Gram positif isoles), d'autres sont absents 2
Ul-iC
certaine pet-iode (seu,lement
les Gram négatif, comme les genres Providencia
-----SP
Alteromonas, Alcaliye,nes, CDC.groui;e VEI, Nsisseri.a, isolés seulement en saison
-
seche, février-mars).
.Les Pseudcmonas ne sont mis en évidence qu'en saison des pluies
( a o û t - s e p t e m b r e ) .
3O) - Variation de la flore en fonction du'pH
-
-
Les valeurs du pH varient trt3rs peu et restent localisées dans la zone
d'acidité, entre 5,3 et 5,9 avec tendance a la neutraÏit6, toutes races et tous
sexes ccnfondus. On note qu'à.un pH très acide,,correspond soit la présence de
:
.
/
. . . l . .
-7-
Streptocoques, so i t une augmentation globale de la microflore résidente.
l / I - DISCUSSION
- La micro f i ore bactérienne implantée dans le vagin et .le sac preputial
apparaît de type fécal avec une forte raprescntation des Enterocoques, mais aussi
des C0rynébacter i es, des Bacillus et Lactobacillus, alnst que des Colibacilles et
-
-
-
-
. .
des Neisseris. EI le résulterait d’une pollution d’origine anale.
- Elle ne semble affecter la santi: @ni-tale des sujets que de façon sporadique
et circonstancielle, souvent localement.
s- Les variations de cette flore n’obcireit à aucune règle et leur diversite
renforcerait l’hypothèse d’une pollution fecale. Dès lors, le r6le symb,iotique et
protecteur reste discutable. Le rôle infectant, apte à déterminer des accidents
abortifs est à retenir pour des germes spkif iques tels Brucella et Mycobacterium.
- II n?y a u r a i t p a s d e v a r i a t i o n d e p r o f i l q u a n t à l a microfiore residente
de l’adulte (mâle et femelle) comparse à celle des jeunes (impubires mais sevrés,
dans notre cas) ; tcut au plus, une IOgk-e differençe quantitative prévaudrait.
* ._
- Les relations de la flore vaginale et préputiale avec le pH se font dans le
sens d’une ac dification du milieu, par I?action de germes lactiques et acidogènes.
Il y a a i n s i , variation du pH en fonction de la flore.
- La sa son, en ce qu’elfe influe sur la tempkature ambiante et les conditions
d’&limentation, et donc sur la résistance des animaux aux diverses agressions
(microbiennes notamment.), favorise I1implantation de tel ou tel germe.
CONCLUS ION
La microflore bactérlenne normale vag.inale et préputiale a ét6 Ctudiée afin
de déterminer le statut infectieux de ses divers composants.
L e p r o f i l génQral d e c e t t e f l o r e r e v ê t u n e a l l u r e fecale ; i l p o u r r a i t r6sulter
d’une contamination d’origine anale. Cependant, des germes isolés tels Pseudcmonas,
Corynebacter ium, Streptococcus, Mycop lasma, sont potentiellement pathogènes.
l . ./
. . .
-8-
L9espèce animale à laquelle appartient l'hôte semble moins d6terminante Four
le profil de la flore que la race, si ce n90st simplement les conditions de mil Fou
(physique et chimique) réalis&es au niveau de 190rgane cible.
Au cours du temps, on note une variation peu importants du prcfil sur le plan
qualitatif (on exemple, les ?seudomonas né sJnt retrouves qu'en hiverniiqc alors qu&
la majorite des Gram nesatif ne le sont qu9en saison skhe.), mais significative
'quantitativement.
Le pH est peu affect& par la flore, mais sa valeur t-es-i-c locaiisk dans la zone:
d9acidité,~pl,us ou moins &lev&e en fonction du profil et' de l'abondance des germes.
“.’
,,
.
.
,.
.
._
<
.
.
.
.
:
.!
R E S U M E
L'auteur procède à un inventaire bacthrio logique syst&mat iquc dos segments
gén it-aux externes, vestibule-vaginal et préput ial, des bovins locaux, mâles et
femelles, cliniquement normaux.
II s'efforce de ddfinir la nature des relations existant entre le profil g6n&-
ral de la microflore, .le pH et 15s facteurs d'environnement afin de de-terminer le
caractère parasitaire ou symbiotique, nécessaire ou ncn,de ces résidents.
BIBLICGRAPHIE
t - AL-AUBAIDI (J.M.1, FABRICANT (J.) - Cor. Vet. 58, 4, 555, 1968.
2 L- BERG (J.N.1 - Ann. J. Ve-k. Rcs., 1979, 40 : 876-881
-
3 - BERKHOFF (G.A.1 - Ve-t. Microbiol., 1978, 2 : 237-252.
-
4- JOUBERT (L.1, KHALIL (0.1, BERTRANS (M,.) et DESCHANEL (J.E.1 - Bull. Soc. Sci,
Vs-t. et Méd, comparée, LYON, 1971, 73
-
AGRICOLES (I.S.R.A. 1
m--L._<l----I.._.--..,C._:--_,-
LABORATO I RE NAT l ONAL DE L’ELEVAGE
5 ?sL
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
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MICROFLORE BACTERIENNE NORMALE VAGINALE
ET PREPUTI F\\LE CHEZ LES WV INS AU SENEGAL
P a r M . K@MTE’-
R E F . 08/MICROBlOLOGIE
J A N V I E R 198U
MICROFLORE BACTERIENNE NORMALE VAGINALE
ET PREPUTIALE CHEZ LES BOVINS AU SENEGAL
Par M. KONTE *
,.
Cette etude a p9u.r but de définir te profil gén&ai~ qua
:
itatif de la microflore
des segments genitaux externes de la vache et du taureau .cIin quement normaux# -dans
ses rapports avec le pH et dans son évolution dans le temps.
Elle revêt un triple intér&t,'dogmatique, physiologique et pathologique (4).
En effet, la connaissance systématique de la composition qualitative réalise
une dimensi 0 n géneraie et fondamentale en pathologie comparée.
Par ai Ileurs, la présence ou l'absence d'une flore autochtone, vaginale et'
préputiale, doit être étudlée sous l'angle physiologique du, caractere symbiot ique ou
parasitaire , nécessaire ou non, de ses residents.
Enfin, la recherche des causes microbiennes de la steril té, ou autres mani-
festations pathologiques de la reproduction chez la vache, réc ame, en patho-
gynécologie,
la définition qualitative et quantitative de la f ore autochtone par
rapport à la flot-a essentiellement pathogeno.
Ce travail a intéresse les animaux pubères et impub&-es, mâles et femelles,
tous normaux, appartenant aux races locales (Taurins Ndama et Zébus Gobra) et aux
races importées (Taurins Montbiiliards et Zébus Pakistanals).
'i
l- MATERIEL, METHODES ET.TECHNIQUES
1°) - &s animaux
I
L'étude menée constitue la première approche d'un programme de recherche 2
réhliser au service de Bactericlogie,
* Pour tout détails, voir : Ecologie bactérienne des parties distales du trac-tus
'génital cher les bovins au Sénégal - M6moire'de confirmation de' M. KONTE,, Docteur
Vetérinaire - REF. N" 112/MI~CROBIO - NOVEMBRE 1985 - LNERV - B.'P. 2057 DAKAR-HANN.
- 2 -
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Nous avons cholsf, pour asseoir une methodologie définitive, de travailler dars
les stations, oü I'6levage est de type am<~Iiore,
semi-intensif. Cette situation
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gua pour permettre une répétition des analyses dans le temps. Par ailleurs, compte
tenu de l'ampleur du travail de laboratoire qu'un seul animal peut occasionner pour
un&* i'dehtific&ti&ï syst&matique des genres bacteriéns;
nous avons r6dui.t l'effectif
exp&-imenYoI"et r'é,tenu“ié'chiffr;e'de
20 suJ&s Fit- station; rcportis comme suit :
5 femelles pubères, 5 femelles impube'ros,
5 mâl'es adultes, '5' mâl,es 'impuberes, ceci
pour les stations, & Kol,da.et Dahra (Centre.:& Recherches Zootechniquas) car.l'opé-
:
..'
rat!on n'a concert6 que les adultes peur la station de Sangalkam.
I
*.,.,
i ,; .-, :
Ces animaux sont vi,s,i,tes en,deu,x pet-iodes, fevrier-mars et août-septembre.
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.
ZO) - MatQriel et techniques de p&levement
-.-
. . '/
.'
a) - Pr6levement de mucus vaginal
-
-
-
Ii est ri-alis& par 6couvillonn~ge du fornix et de I'exocol 2 l'aide
d'un sp6culum vaginal et d'une Icngue pince 3 forcipressure droite.
L'écouvii Ion, modele "Culturett" de la firme "Scientific proclucts", se cOmpûS6
d'une tige t3n plastique de 15 cm de I:ongg portant, ,f'ixé à un bout, du ca-ton card$ e'-
coulissant dans -un tube ,stéri,,le dont le fond contient 0,5 ml d'un milieu de transport
(Modified S-t.uart*s Bncteria.l.~transport Medjum). La tige dc l'écouvillon est fix@e au
fond d'un tube court seryant de bouchon au tube protecteur. Lc! pince à forcipressurt:
prolonge l'écouvillon pour atteindre le fornix, distant d'environ GO cm, 2 travers
le spéculum vaginal mesurant 30 cm de long et 3 cm de d.iamètre.
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b) -- Prelèvement du liquide de rinçage du_prépuce.
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Il n6cessite une seringue en verre, '& 50 j 100Aml et & I'@aij bld!+
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et siphonnage de la cavite preputiale.
Le prelèvement est conservé dans un tube à essai de diametre 22 mm également stérile
j
bouche au coton carde.
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L'ensemble du,matérieI de prélèvemen,t ne doit subir aucune dGsinfect\\cn.chimi-
que préjudiciable à, la vitalité. de la flore reizhorchée, mais être soumis à un autocla-
vage classique.
. . . . . .
/
-3-
cl - M e s u r e d u p H
E l l e e s t effectuee à l’aide d e papier: fndlcateur sens i ble à 0,2 uni-
tés (Modèle Oxyphen-S#itzerland)
de 6,4 à 7,U, in s.itu, pour le mi.1 ieu vaginal, dans
le tube de recoite pour le liquide de rinçage du prepuce.
3O) - Bactérioloqie-
3) - Recherche de germes anaérobies et aéro-anakobies facultatifs
(F~AF 1 : ensemencement de mili,eux de culture divers (bouillon VF gluco.6 à 1 8,gélose
profonde VF à 6 p. 1000, gé lose VL-sang) ; bactér ioscop le après coloration de Gram
(2,3).
.
b) - Recherche non spécifique de germes aérobies et AAF
Culture en boui,I.ion nutritif, sur gélose nutritive, gélose-sérum,
gélose molle profonde VF, bactkioscople après coloration de Gram ; tests biochimi-
ques d’identification sur plaques API.
cl - Recherche de Brucella
Mi I ieux de culture : brucella-agar m o d i f i é + PE3C (Polymyxine - Baci-
tracine - Cycloheximide),
milieu trypticase-soja (Blo-Mérieux), gélose molle profon-
de VF, bactérioscopie apriis coloration de Gram ; spécification réalisée au Labora-
toire de Pathologie de la Reproduction à Nouzilly en France.
d) - Recherche de Mycoplasmes
I-
MI I ieu sélectif sol ide : Heart Infusion Broth Difco (H.I.B.1 * a 9ar
+ extrait de levure fraiche à 25 5% + sérum de cheval d6complément6 +.p&nicilllne
(L-S-FI 1, pour isolement direct p clonage en mi I ieu l iquide (HIB + L-S-P ou boui l Ion
tryptose-pénici f l ine + S-L) ; bactérioscopie par examan d’un état-frais (1).
e) - %c!.,:rc1.,3 de germes ac i 0-a Icoo lo-rés i stants IAAR 1
M i l i e u s é l e c t i f d’isolement d e s Mycobactéries (,Loewenstein-.Jensen) ;
bactérioscopie après coloration de Ziehl pour déflnir ,ie groupe.
. . ./ . . . .’
f) - Recherche de Lactobacilles
I
Milieu sélectif d'isclament, bouillon et gelose MRS ; coloration de
.Gram,;,. speci:fication sur plaques.API.:
r.
/ :
,
.A
:
‘,
:,'
- Recherches de Corynébact&ries
9)
V-
"._
Milieux de culture favorables : milieu de LOEFFLER et s$rum COFigUl& i
coloration de Gram ; identification sur plaques API.
..h.):. .i' .Recherehes.~'8de
Li ster ia, -:.,
."
.
'Ensemencement de bouillon trypi-6% mai'nfcnu ?I 4% 'pendant 10 jours
comme pro&& d'enrichissement, G$lose-mobilite ;' bac'teriwscopi e sur 4tat-fais 6-t
après coloration de Gram ; identification sur plaques API.
,
i) - Recherche de StreptocoquesV..
i
Ensemencement milleu s6lecti-f pour Strsptocoquas (IPP), gélose au
sang de mouton ; bacterloscopis après coIorati6n'ds Gram ; sérogroupage par "Slidex
. .
Strepto-Kit " (tiio-Mérieux).
i,
j) -- Recherche de Staphylocoques
-
-
\\
Milieu selectif d'isolsmcnt (milieu de'CHAPMAN1, bouillon pour
,:
staphyiocoacjulase,
plasma de lapin lyophilis6, bouillon nutritif ; coloration de
Gram ; Épreuve de la coagulaSe.
.'
I I
- RESULTATS
1°) - profil général de la microflore vaginale et prépu-tiale
-
-
-
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<.
(voir tableau r!es pourcentages d'animaux porteurs).:
- Il existe une'microflcre bact6rienne chez tous.les animaux visites dor-
nant lieu à'un profil gékral.
- Cette microfiore est h6térogène et variabl e en nombre dres@ces
.<
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. . . .
-5-
MICROFLORE VAGINALE ET PREPUTIALE :
POURCENTAGE D'ANIMAUX PORT-EURS
Germes
% en saison
% en saison
sèche et frarche
des pluies
- Gram négatifs
11,40
fi,85
. E. coli
1G
1,66
. P.:mirabIfIs
2 5
1,66
. Providencia sp.
3,33
0
. Enterobacter cloacae
1 0
1,66
. Pseudomonas aerugînosa
1,66
,56,66
Alteromonks putrefasciens
13,33
I
0
l
. Alcaligenes foecalls
3,33
0
. CDC groupe ,VE,
6,6S
0
. Nelsseria sp.
23,33
0
- Gram positifs
36,90
28,33
. C. pyogenes
60
61,66
. C. renaie
0
5
Lactobaciilus casei
18,33
28,33
l
. Bacilius sp.
76,66
43,33
. Streptocoques D
81,66
31,66
Diplococcus sp.
11,66
3,33
l
. Staphyiccoques NP
10
1
25
- A-A-R
- Clcstridium sp.
29,09
20
-
- Mycoplasma sp.
45,45
38
--
E. coli = Escherichia coli
P. mirabilis = Proteus mirabilis
CDC groupe VE, = Bactéries proches du genre Chromobacterium
C. pyogenes = Corynebacterium pyogenes
A-A-R = Acide-alcoolo-résistants
-6-
mais surtout en quantitB au niveau des troupeaux.<
-1 La microflore 5 Gram positi f domine toujours celle 2 Gram négatif,
chez toutes les races, au cours de toutes les saisons et pour tous les âges rctenuc.
'- Parmi les constjtuants 3 Gram positif, les cocci sont isolQs en majo-
rité (Streptocoques et aussi Staphylocoques non'pathogenes) ;' cependant,, les taacii-,
les sont auksi fréquemment mis en évidence (surtout Bacillussp.et Corynebacterium:.
-
-
-
-
11 faut noter la presence non'negligeable d?anaerobies stricts du genre Clostridium.
--..
:
.,: <__< ,.
- Les constituants dd la.f!ore U Gram n6gatif sont surtout-roprEsent&
par les F'seudomonas, $II certaine periode (hivernage). Les Enterobactérics sont beau-
coup plus rares (E.
-,
coli
proteus mirabilis, Providencia spp, Enterobacter>. Geau-
coup d'autres germes ne sont isolés qu'en saison sèche et.f.raÎche.
(Alteromonas,
Alcaligenes, CDC qrou@a VE, (Bactéries proches du genre Chromubacterium), Nsisseria,.
-
- Des germes acide-alcoolti-résistants sont mis en évidence en hivernage
chez les bovins senégalais uniquement.
- Aucun Brucella ni aucun Listeria, n'ont ét& observk.,,
'.
.’ .
201 - Variation de la flore en f..2nction de la saison
- - -
~-_--
Certains germes sont des résidents permanents, seulement variables en
nombre (cas'& tous les germes 2 Gram positif isoles), d'autres sont absents 2
Ul-iC
certaine pet-iode (seu,lement
les Gram négatif, comme les genres Providencia
-----SP
Alteromonas, Alcaliye,nes, CDC.groui;e VEI, Nsisseri.a, isolés seulement en saison
-
seche, février-mars).
.Les Pseudcmonas ne sont mis en évidence qu'en saison des pluies
( a o û t - s e p t e m b r e ) .
3O) - Variation de la flore en fonction du'pH
-
-
Les valeurs du pH varient trt3rs peu et restent localisées dans la zone
d'acidité, entre 5,3 et 5,9 avec tendance a la neutraÏit6, toutes races et tous
sexes ccnfondus. On note qu'à.un pH très acide,,correspond soit la présence de
:
.
/
. . . l . .
-7-
Streptocoques, so i t une augmentation globale de la microflore résidente.
l / I - DISCUSSION
- La micro f i ore bactérienne implantée dans le vagin et .le sac preputial
apparaît de type fécal avec une forte raprescntation des Enterocoques, mais aussi
des C0rynébacter i es, des Bacillus et Lactobacillus, alnst que des Colibacilles et
-
-
-
-
. .
des Neisseris. EI le résulterait d’une pollution d’origine anale.
- Elle ne semble affecter la santi: @ni-tale des sujets que de façon sporadique
et circonstancielle, souvent localement.
s- Les variations de cette flore n’obcireit à aucune règle et leur diversite
renforcerait l’hypothèse d’une pollution fecale. Dès lors, le r6le symb,iotique et
protecteur reste discutable. Le rôle infectant, apte à déterminer des accidents
abortifs est à retenir pour des germes spkif iques tels Brucella et Mycobacterium.
- II n?y a u r a i t p a s d e v a r i a t i o n d e p r o f i l q u a n t à l a microfiore residente
de l’adulte (mâle et femelle) comparse à celle des jeunes (impubires mais sevrés,
dans notre cas) ; tcut au plus, une IOgk-e differençe quantitative prévaudrait.
* ._
- Les relations de la flore vaginale et préputiale avec le pH se font dans le
sens d’une ac dification du milieu, par I?action de germes lactiques et acidogènes.
Il y a a i n s i , variation du pH en fonction de la flore.
- La sa son, en ce qu’elfe influe sur la tempkature ambiante et les conditions
d’&limentation, et donc sur la résistance des animaux aux diverses agressions
(microbiennes notamment.), favorise I1implantation de tel ou tel germe.
CONCLUS ION
La microflore bactérlenne normale vag.inale et préputiale a ét6 Ctudiée afin
de déterminer le statut infectieux de ses divers composants.
L e p r o f i l génQral d e c e t t e f l o r e r e v ê t u n e a l l u r e fecale ; i l p o u r r a i t r6sulter
d’une contamination d’origine anale. Cependant, des germes isolés tels Pseudcmonas,
Corynebacter ium, Streptococcus, Mycop lasma, sont potentiellement pathogènes.
l . ./
. . .
-8-
L9espèce animale à laquelle appartient l'hôte semble moins d6terminante Four
le profil de la flore que la race, si ce n90st simplement les conditions de mil Fou
(physique et chimique) réalis&es au niveau de 190rgane cible.
Au cours du temps, on note une variation peu importants du prcfil sur le plan
qualitatif (on exemple, les ?seudomonas né sJnt retrouves qu'en hiverniiqc alors qu&
la majorite des Gram nesatif ne le sont qu9en saison skhe.), mais significative
'quantitativement.
Le pH est peu affect& par la flore, mais sa valeur t-es-i-c locaiisk dans la zone:
d9acidité,~pl,us ou moins &lev&e en fonction du profil et' de l'abondance des germes.
“.’
,,
.
.
,.
.
._
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.
.
.
.
:
.!
R E S U M E
L'auteur procède à un inventaire bacthrio logique syst&mat iquc dos segments
gén it-aux externes, vestibule-vaginal et préput ial, des bovins locaux, mâles et
femelles, cliniquement normaux.
II s'efforce de ddfinir la nature des relations existant entre le profil g6n&-
ral de la microflore, .le pH et 15s facteurs d'environnement afin de de-terminer le
caractère parasitaire ou symbiotique, nécessaire ou ncn,de ces résidents.
BIBLICGRAPHIE
t - AL-AUBAIDI (J.M.1, FABRICANT (J.) - Cor. Vet. 58, 4, 555, 1968.
2 L- BERG (J.N.1 - Ann. J. Ve-k. Rcs., 1979, 40 : 876-881
-
3 - BERKHOFF (G.A.1 - Ve-t. Microbiol., 1978, 2 : 237-252.
-
4- JOUBERT (L.1, KHALIL (0.1, BERTRANS (M,.) et DESCHANEL (J.E.1 - Bull. Soc. Sci,
Vs-t. et Méd, comparée, LYON, 1971, 73
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