, J.-. REPUBLIQUE DU SENEGAL DEPARTEMENT DE...
, J.-. REPUBLIQUE DU SENEGAL
DEPARTEMENT DE RECHERCHES
- - - - - - - - - - - -
SUR LES PRODUCTIONS
d
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
ET LA SANTE ANIMALES
ET DE L’HYDRAULIQUE
- - - - - - - - - - - -
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
/jGRfCOLES (I.S.R.A.)
-_---------_
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
CONVENTION AIEA,!ISRA No 1975 PORTANT SUR
L’UTILISATION DE LA TECHNIQUE ELISA DE DETECTION
DES ANTIGENES DANS L’FTUDE DE L’INCIDENCE
DE 14 TRYPANOSOMIASE ANIMALE EN ZONE D’ELEVAGE
DU DIAKORE (CROISEMENT ZEBU-NDAMA)
RAPPORT SUR LES TRAVAUX EFFECTUES AU COURS
DU TROISIEME TRIMESTRE DE LA SECONDE PHASE
(JUILLET - SEPTEMBRE 1990)
Par
A . DIAITE, C . V A S S I L I A D E S , M . S E Y E , A . MANE e t M m e T . NDIAYE
R E F . No 70/PARASfTO,
NOVEMBRE 1990
R E S U M E
----‘-Joo----
Les études pour la validation de la technique ELISA de détection
- d’antigènes circulants de Trypanosoma brucei, T. vivax et T. congolense
se sont poursuivies dans la zone de Sokone, de juillet à septembre 1990.
Les résultats obtenus confirment ceux du précédent trimestre
et montrent que cette technique, combinée avec les autres méthodes
de diagnostic, permettrait une évaluation plus juste de la fréquence
des trypanosomes pathogènes dans une zone donnée.
Par ailleurs, il est noté l’absence persistante de T. brucei chez
les animaux étudiés.
Enfin, une validation rapide de cette technique est souhaitée.
MOTS CLES
Trypanosomes - Diagnostic - ELI SA _- Anticorps monoclonaux.
.
INTRODUCTION
Les études pour la validation de la technique ELISA de détection
d’antigènes sériques trypanosomiens se sont poursuivies au cours du
troisième trimestre de 1990. Ces études portent sur des bovins de
Sokone,
zone infestée de glossines et située dans le Centre-Sud du
Sénégal.
Les échantillons sanguins à analyser sont récoltés une fois
par mois,
sur les mêmes animaux. Les autres détails du protocole
figurent dans les rapports antérieurs.
Ce rapport résume les résultats obtenus de juillet à septembre
1990 et rappelle quelquefois, des données du mois de juin (fin du
deuxième trimestre) pour se faire une idée de l’évolution des para-
mètres étudiés. En outre, avec la fin supposée, de I’dctivité des try-
panocides administrés aux bovins-cibles au début des travaux,
la présentation des résultats en fonction des traitements ne se justifie
plus. Les données sont désormais traitées globalement ou en fonction
du mois.
I - REfSULTATS DE MICROSCOPIE
1.1 - Trypanosomes
- Comme pour les analyses antérieures, il n’y a pas eu de
cas à Trypanosoma brucei, ni à T. vivax, aussi bien à l’examen
de I’interphase qu’à la lecture des frottis.
- Par contre, pour T. congolense, les résultats suivants
ont été obtenus :
.,. I . . .
- 2 -
. Juillet
: 1 cas sur 21 échantillons analysés,
soit 4,76
p 100
. Août
: 2 cas sur 22 analyses, soit 9,09 p 100
. Septembre : 5 cas sur 20, soit 25 100
p
Globalement, on obtient donc 8 cas sur 63 analyses, soit
12,69 p 100
1.2 - Parasites autres que les trypanosomes
C’est la Microfilariose à Setaria labiatopapillosa qui prédomine,
avec 2 cas en juillet, 3 en août et 3 en septembre. Viennent ensuite
de rares cas d’Anaplasmose à A. marginale et de Theileriose à T. mutans.
II - RESULTATS HEMATOLOGIQUES
Le tableau ci-dessous donne les résultats statistiques de
I’hématocrite.
Paramètes statistiques
Juillet
Août
Septembre
Nombre d’animaux
21
22
20
Amplitude de I’hématocrite
22 à 39
20 à 40
22 à 38
Variante
19,44
19, 14
15,39
1 ;t;;;;Eesà
128,621
; Ftervalle
2,Ol
de
130,22f
1,93
111)2/?
1,82
1
En comparant ces données avec le chiffre de 37,7 :t 1,2 p 100
calculé par FRIOT et CALVET comme valeur hématocrite moyenne
des bovins Zébu-Taurins du Sénégal, on note une forte anémie,
qui reste quasi-constante tout au long de la saison des pluies.
*.. / . . .
. .._...__ -.-- . .._-__. -. ,__
_ _.
-3-
III - RESULTATS SEROLOCIQUES
Les tableaux 1 à 3 donnent les résultats chiffrés des épreuves
ELISA. Le tableau 4 en fait la synthèse, en comparaison avec ceux
obtenus en juin, dernier mois du trimestre précédent.
Les observations suivantes s’en dégagent :
- la concordance déjà notée au deuxième trimestre entre les
résultats de microscopie et de sérologie concernant T. brucei se
confirme : aucun cas n’est relevé à l’examen des lames et tous
les échantillons sériques analysés sont séro-négatifs.
- p o u r T . v i v a x , sur les 63 analyses faites en trois mois,
on obtient : 6 séro-positifs, soit 9,52 p 100. L’examen de l’interphase
et des frottis est resté négatif. Parmi ces 6 cas de séro-positivité
à T. vivax, on note à nouveau le bovin No 87 qul n’a jamais
été négatif en sérologie.
- les cas de séro-positivité à T. congolense demeurent les
plus nombreux : 1 sur 21 analyses en juillet, 2 sur 22 en août
et 4 sur 20 en septembre. Au total donc, sur 63 analyses, 7 cas
à T. conqolense sont relevés, soit 11,ll p 100. Parmi ces 7 cas,
2 sont confirmés par les méthodes parasitologiques, les 5 autres
proviennent d’animaux aparasitémiques.
En outre, et concernant toujours T. congolense, le tableau 4
montre qu’en considérant les seules parasitémies patentes (M),
on
en serait, pour chacun des mois considérés, à la moitié ou
presque de la fréquence parasitaire trouvée : 1 sur 2 en juin
et juillet, 2 sur 4 en août et 3 sur 5 en septembre (en plus des
2 confirmations). Cela semble signifier que la technique de détection
d’antigènes, appliquée parallèlement à la lecture des lames, peut
doubler les chances de diagnostic des trypanosomes.
/
l . . . . .
-4-
CONCLUSION
On peut dire que les avantages de cette technique sérologique
se précisent de plus en plus : les résultats sont reproductibles ;
les données refletent bien la prépondérance (ou l’absence) respective
des différentes espèces de trypanosomes: la complémentarité avec
les autres techniques de diagnostic est satisfaisante. II reste à
souhaiter qu’elle soit rapidement validée pour pouvoir être utilisée
à une échelle plus grande.
-.-.....-_F
..--
.
-5-
RESULTATS SEROLQCIQUES
TABLEAU 1 : T R Y P A N O S O M A BRUCE1 ( T . b.)
Juin*
Juillet
Août
Septembre
--. -.
Norr,.:~ c d’analyses
21
21
22
20
n
0
0
0
0
Séro-positifs
0
‘5
0,oo
0,oo
0,oo
0,oo
n
2 1
2 1
22
20
S é r o - n é g a t i f s -
9,
100
100
100
100
TABLEAU 2 : T R Y P A N O S O M A V I V A X ( T . v.1
Juin*
Juillet
Août
Septembre
Nombre d’analyses
21
2 1
22
20
n
1
2
2
2
S é r o - p o s i t i f s -
90
4,76
9,52
9,09
10,oo
n
20
19
20
18
Sérv-négatifs
a
6
95,24
90,48
go,91
90,oo
TABLEAU 3 : TRYPANOSOMA CONGOLENSE (T.c.)
Juin*
Juillet
Août
Septembre
/
Nombre d’analyses
21
2 1
22
20
n
1
1
2
4
Séro-positifs
0
4,76
4,76
9,09
20,oo
n
20
20
20
16
Séro-négatifs
9,
95,24
95,24
go,91
80,OO
* : dernière analyse du deuxième trimestre
.
Z 0
Z 0
-
-
1- I
i-
-
5
t:
-
c:
c ç
- r-:
-
;
r-:
-
;
< _r;
- r-: ; - L . ; -
0’ -
.
. > -
. v
-
-
-
-1 I
a u
-
-
i
n >
-
tn
-
--
-
Yl
- r 3 m
-
-
-
-
u-l
-
vi
-
-
n
- 3 n
-
P F P
I
m
DEPARTEMENT DE RECHERCHES
- - - - - - - - - - - -
SUR LES PRODUCTIONS
d
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
ET LA SANTE ANIMALES
ET DE L’HYDRAULIQUE
- - - - - - - - - - - -
INSTITUT SENEGALAIS DE RECHERCHES
/jGRfCOLES (I.S.R.A.)
-_---------_
LABORATOIRE NATIONAL DE L’ELEVAGE
ET DE RECHERCHES VETERINAIRES
DAKAR-HANN
CONVENTION AIEA,!ISRA No 1975 PORTANT SUR
L’UTILISATION DE LA TECHNIQUE ELISA DE DETECTION
DES ANTIGENES DANS L’FTUDE DE L’INCIDENCE
DE 14 TRYPANOSOMIASE ANIMALE EN ZONE D’ELEVAGE
DU DIAKORE (CROISEMENT ZEBU-NDAMA)
RAPPORT SUR LES TRAVAUX EFFECTUES AU COURS
DU TROISIEME TRIMESTRE DE LA SECONDE PHASE
(JUILLET - SEPTEMBRE 1990)
Par
A . DIAITE, C . V A S S I L I A D E S , M . S E Y E , A . MANE e t M m e T . NDIAYE
R E F . No 70/PARASfTO,
NOVEMBRE 1990
R E S U M E
----‘-Joo----
Les études pour la validation de la technique ELISA de détection
- d’antigènes circulants de Trypanosoma brucei, T. vivax et T. congolense
se sont poursuivies dans la zone de Sokone, de juillet à septembre 1990.
Les résultats obtenus confirment ceux du précédent trimestre
et montrent que cette technique, combinée avec les autres méthodes
de diagnostic, permettrait une évaluation plus juste de la fréquence
des trypanosomes pathogènes dans une zone donnée.
Par ailleurs, il est noté l’absence persistante de T. brucei chez
les animaux étudiés.
Enfin, une validation rapide de cette technique est souhaitée.
MOTS CLES
Trypanosomes - Diagnostic - ELI SA _- Anticorps monoclonaux.
.
INTRODUCTION
Les études pour la validation de la technique ELISA de détection
d’antigènes sériques trypanosomiens se sont poursuivies au cours du
troisième trimestre de 1990. Ces études portent sur des bovins de
Sokone,
zone infestée de glossines et située dans le Centre-Sud du
Sénégal.
Les échantillons sanguins à analyser sont récoltés une fois
par mois,
sur les mêmes animaux. Les autres détails du protocole
figurent dans les rapports antérieurs.
Ce rapport résume les résultats obtenus de juillet à septembre
1990 et rappelle quelquefois, des données du mois de juin (fin du
deuxième trimestre) pour se faire une idée de l’évolution des para-
mètres étudiés. En outre, avec la fin supposée, de I’dctivité des try-
panocides administrés aux bovins-cibles au début des travaux,
la présentation des résultats en fonction des traitements ne se justifie
plus. Les données sont désormais traitées globalement ou en fonction
du mois.
I - REfSULTATS DE MICROSCOPIE
1.1 - Trypanosomes
- Comme pour les analyses antérieures, il n’y a pas eu de
cas à Trypanosoma brucei, ni à T. vivax, aussi bien à l’examen
de I’interphase qu’à la lecture des frottis.
- Par contre, pour T. congolense, les résultats suivants
ont été obtenus :
.,. I . . .
- 2 -
. Juillet
: 1 cas sur 21 échantillons analysés,
soit 4,76
p 100
. Août
: 2 cas sur 22 analyses, soit 9,09 p 100
. Septembre : 5 cas sur 20, soit 25 100
p
Globalement, on obtient donc 8 cas sur 63 analyses, soit
12,69 p 100
1.2 - Parasites autres que les trypanosomes
C’est la Microfilariose à Setaria labiatopapillosa qui prédomine,
avec 2 cas en juillet, 3 en août et 3 en septembre. Viennent ensuite
de rares cas d’Anaplasmose à A. marginale et de Theileriose à T. mutans.
II - RESULTATS HEMATOLOGIQUES
Le tableau ci-dessous donne les résultats statistiques de
I’hématocrite.
Paramètes statistiques
Juillet
Août
Septembre
Nombre d’animaux
21
22
20
Amplitude de I’hématocrite
22 à 39
20 à 40
22 à 38
Variante
19,44
19, 14
15,39
1 ;t;;;;Eesà
128,621
; Ftervalle
2,Ol
de
130,22f
1,93
111)2/?
1,82
1
En comparant ces données avec le chiffre de 37,7 :t 1,2 p 100
calculé par FRIOT et CALVET comme valeur hématocrite moyenne
des bovins Zébu-Taurins du Sénégal, on note une forte anémie,
qui reste quasi-constante tout au long de la saison des pluies.
*.. / . . .
. .._...__ -.-- . .._-__. -. ,__
_ _.
-3-
III - RESULTATS SEROLOCIQUES
Les tableaux 1 à 3 donnent les résultats chiffrés des épreuves
ELISA. Le tableau 4 en fait la synthèse, en comparaison avec ceux
obtenus en juin, dernier mois du trimestre précédent.
Les observations suivantes s’en dégagent :
- la concordance déjà notée au deuxième trimestre entre les
résultats de microscopie et de sérologie concernant T. brucei se
confirme : aucun cas n’est relevé à l’examen des lames et tous
les échantillons sériques analysés sont séro-négatifs.
- p o u r T . v i v a x , sur les 63 analyses faites en trois mois,
on obtient : 6 séro-positifs, soit 9,52 p 100. L’examen de l’interphase
et des frottis est resté négatif. Parmi ces 6 cas de séro-positivité
à T. vivax, on note à nouveau le bovin No 87 qul n’a jamais
été négatif en sérologie.
- les cas de séro-positivité à T. congolense demeurent les
plus nombreux : 1 sur 21 analyses en juillet, 2 sur 22 en août
et 4 sur 20 en septembre. Au total donc, sur 63 analyses, 7 cas
à T. conqolense sont relevés, soit 11,ll p 100. Parmi ces 7 cas,
2 sont confirmés par les méthodes parasitologiques, les 5 autres
proviennent d’animaux aparasitémiques.
En outre, et concernant toujours T. congolense, le tableau 4
montre qu’en considérant les seules parasitémies patentes (M),
on
en serait, pour chacun des mois considérés, à la moitié ou
presque de la fréquence parasitaire trouvée : 1 sur 2 en juin
et juillet, 2 sur 4 en août et 3 sur 5 en septembre (en plus des
2 confirmations). Cela semble signifier que la technique de détection
d’antigènes, appliquée parallèlement à la lecture des lames, peut
doubler les chances de diagnostic des trypanosomes.
/
l . . . . .
-4-
CONCLUSION
On peut dire que les avantages de cette technique sérologique
se précisent de plus en plus : les résultats sont reproductibles ;
les données refletent bien la prépondérance (ou l’absence) respective
des différentes espèces de trypanosomes: la complémentarité avec
les autres techniques de diagnostic est satisfaisante. II reste à
souhaiter qu’elle soit rapidement validée pour pouvoir être utilisée
à une échelle plus grande.
-.-.....-_F
..--
.
-5-
RESULTATS SEROLQCIQUES
TABLEAU 1 : T R Y P A N O S O M A BRUCE1 ( T . b.)
Juin*
Juillet
Août
Septembre
--. -.
Norr,.:~ c d’analyses
21
21
22
20
n
0
0
0
0
Séro-positifs
0
‘5
0,oo
0,oo
0,oo
0,oo
n
2 1
2 1
22
20
S é r o - n é g a t i f s -
9,
100
100
100
100
TABLEAU 2 : T R Y P A N O S O M A V I V A X ( T . v.1
Juin*
Juillet
Août
Septembre
Nombre d’analyses
21
2 1
22
20
n
1
2
2
2
S é r o - p o s i t i f s -
90
4,76
9,52
9,09
10,oo
n
20
19
20
18
Sérv-négatifs
a
6
95,24
90,48
go,91
90,oo
TABLEAU 3 : TRYPANOSOMA CONGOLENSE (T.c.)
Juin*
Juillet
Août
Septembre
/
Nombre d’analyses
21
2 1
22
20
n
1
1
2
4
Séro-positifs
0
4,76
4,76
9,09
20,oo
n
20
20
20
16
Séro-négatifs
9,
95,24
95,24
go,91
80,OO
* : dernière analyse du deuxième trimestre
.
Z 0
Z 0
-
-
1- I
i-
-
5
t:
-
c:
c ç
- r-:
-
;
r-:
-
;
< _r;
- r-: ; - L . ; -
0’ -
.
. > -
. v
-
-
-
-1 I
a u
-
-
i
n >
-
tn
-
--
-
Yl
- r 3 m
-
-
-
-
u-l
-
vi
-
-
n
- 3 n
-
P F P
I
m