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A.
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R E P U B L I Q U E D U S E N E G A L
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M I N I S T E R E D U D E V E L O P P E M E N T R U R A L
E T D E L’HYDRAULIQUE
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I N S T I T U T S E N E G A L A I S D E R E C H E R C H E S
A G R I C O L E S (I.S. R . A . )
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LABORA TOIRE N A TIONAL D E L ’ E L E V A G E
E T D E R E C H E R C H E S V E T E R I N A I R E S
B . P . 2 0 5 7
D A K A R - H A N N
C O N V E N T I O N AIEAIISRA NO4975 P O R T A N T S U R
L ’ U T I L I S A T I O N D E L A T E C H N I Q U E ELISA D E
D E T E C T I O N D E S A N T I G E N E S D A N S L ’ E T U D E
D E L ’ I N C I D E N C E D E L A T R Y P A N O S O M I A S E
A N I M A L E E N Z O N E D ’ E L E V A G E D U D I A K O R E
[ C R O I S E M E N T Z E B U - N D A M A )
R A P P O R T S U R L E S T R A V A U X E F F E C T U E S A U C O U R S
D U D E U X I E M E T R I M E S T R E D E L A S E C O N D E P H A S E
( A V R I L - J U I N 7 9 9 0 )
P a r
A . D I A I T E , G . VASSILIADES, M . S E Y E ,
A . MANE e t T h . NDIAYE DIEYE
R E F . N067/PARASl T O .
O C T O B R E 7990.
R E S U M E
- - - - - - - - - - - - -
Les travaux de validation de la technique ELISA de détection
d’antigènes sériques de Trypanosoma brucei brucei, T. congolense et
T. vivax se sont poursuivis sur des bovins de lu zone de Sokone
(Centre-Sud du Sénégal ; infestée de glossinesl.
Les résultats obtenus au cours du deuxième trimestre de 1990
(avril-juin) indiquent :
- une bonne complémentarité entre cette technique sérologique et
les méthodes habituelles de visualisation des trypanosomes par examen
microscopique de prélèvements sanguins ;
- une durée de protection de 3 a 4 mois conférée aux bovins par
l’administration chimiopréven tive de Trypamidium ;
-, une nette corrélation entre la fin de l’action prophylactique
de ce médicament, la réapparition de parasitémies et d’antigénémies et
l’installation d’une forte anémie.
Enfin, il demeure probable que dans cette zone existent des souches
de trypanosomes chimiorésis tan tes.
MOTS CLES
TRYPANOSOMES .. DIAGNOSTIC - ELISA - ANTICORPS MONOCLONAUX.
INTRODUCTION
La deuxième phase des recherches en vue de la validation de la
technique EL/SA de détection d’antigènes sériques trypanosomiens, entamée
_ en décembre 1989, s’est poursuivie pendant le deuxième trimestre de 1990,
à raison d’une visite par mois des bovins-cibles basés à Sokone (Centre-Sud
du Sénégal),
Le protocole de terrain et les analyses en laboratoire du premier
trimestre restant inchangés, nous ne les reprenons pas ici. Cependant,
pour une meilleure lecture des résultuts de sérologie, nous reproduisons
le tableau du premier trimestre relatif aux traitements trypanocides effectués
au début de cette deuxième phase,
Ce rapport résume les résultats hématologiques, protozoologiques,
croprologiques et sérologiques obtenus d’avril à juin 1990. Les données
recueillies de décembre 1989 à mars 1990 ont fait l’objet du rapport
No 291PARASI TO., avril 1990: Elles seront quelquefois rappelées à titre
de comparaison.
I - TRAITEMENTS TRYPANOCIDES
Les bovins-cibles ont tous été traités au Bérénil en décembre 1989
et, 15 à 45 jours plus tard, au Trypamidium, pour apprécier l’effet de ces
trypanocides sur I’antigénémie et pour déceler éventuellement des souches
de trypansosomes chimie-résis tan tes.
Le tableau ci-dessous donne les dé tails de ces traitements
--
--
I
IN? 97 à 1’OO)t
3,s m g l k g
75 /ours après bérénil
* II n’y.a pas de prélèvement post-thérapeutique sur ce lot par .suite
du désistement de l’éleveur-propriétaire.
-2-
II - R E S U L T A T S
2. 7 - Hématocrite
Le tableau suivant donne les résultats du deuxième trimestre
(avril-juin) qui sont comparés à ceux obtenus avant les traitements try-
panocides,
ainsi qu’à ceux du mois de février qui représentent la dernière
mesure de ce paramètre pour le premier trimestre (I’hématocrite n’a pu être
releve en mars).
MOYENNE % DE L'HEMATOCRITE -r INTERVALLE DE CONFIANCE A 5 P. 100
Avant trai-
2 mois après
4 mois après
5 mois après
T6 mois après
tement
traitement
traitement
traitement
traitement
(déc. 89)
(fév. 90)
(avr. 90)
(mai 90)
(juin 90)
35,39 11 2,41 36,89 f. 3,43
37,08 t 2,58
33,81 + 2,31
30,60 I2,64
Jusqu’au quatrième mois qui suit le traitement, I’hématocrite est stable
et assez bon comparé à la norme raciale de 37,7 t 7,2 p 700. On note
aussi, par rapport à la moyenne d’avant traitement, une remontée légère
mais constante pour la même période. II s’en est suivi, à partir du cin-
quième mois, une baisse significative à hautement significative de la moyenne.
La fin de l’action du médicament combinée à l’avancée de la saison sèche
(rareté des pâturages) sont
des explications probables de cette forte
anémie.
2.2 - Trypanosomes
Les examens de sang (interphase sur le terrain, frottis au labo-
ratoire) sont restés négatifs à Trypanosoma de janvier à mai, Au mois
de juin, le bovin No 109 s’est montre fortement positif à T. congolense (4+).
Aucun autre cas n’a été relevé.
. . . / . . .
-3-
2.3 - Autres hémoparasitoses
On note de rares cas de Filariose à Setaria labiatopapillosa, de
Theileriose à T. mutans et d’Anaplasmose 0 A. marginale.
2.4 - Coproloqie
Les selles prélevées en juin montrent quelques cas d’infestation
massive par des Strongles. Guant aux bovins No 89-90 et 706, qui étaient
porteurs de Douves a Fasciola en février, ils sont devenus négatifs en
juin. Une bonne vigilance semble devoir entourer ces deux parasitoses
ches les bovins de cette zone (Action anémiante).
2.5 - Serologie
Le:; tableaux 7 à 5 résument les résultats sérologiques du deuxième
trimestre et rappellent à titre de comparaison, ceux obtenus avant les
traitemen ts et ceux de trois mois après administration du trypamidium.
Les observations suivantes peuvent être retenues de ces tableaux :
- Pour Trypanosoma brucei, la concordance est totale entre les
résultats de microscopie et ceux obtenus en ELISA au cours de ce
deuxième trimestre : examens et épreuves in variablemen t négatifs .
- La parasitémie à T. congolense décelé chez le bovin No 109, cinq
mois après traitement n’a pas été confirmée en sérologie (d.o. = 0,008).
Sans doute s’agit-il d’une saturation des sites antigéniques puisque la
parasitémie était très forte (4+), ce qui a dû engendrer une importante
production d’anticorps .
En outre, et concernant toujours T. congolense, la séro-positivité
réapparaît 6 mois après le traitement au trypamidium.
.
.
/
.
.a.
-Y-
- II n’y u pas eu de cas & T. vivax décelé au microscope. En
sérologie, par contre, on note deux faits intéressants :
a) - tous les prélèvements de sérum effectués sur le bovin NO 87
ont été séro-positifs à T. vivax depuis le début de cette deuxième phase.
Cet animal avait toutefois échappé aux prélèvements de 3 mois après trai-
tement, ce qui nous avait donné 700 p 100 de séro-négatifs.
b) - hormis le cas particulier de ce bovin, la séro-positivité à
T. vivax réapparaît au quatrième mois suivant le traitement, et elle per-
siste aux cinquième et sixième mois. Situation normale puisqu’il est
admis que le trypamidium, administré au bovin à la dose de 0,5 mglkg en
I.M., lui confère une protection d’environ 14 semaines, soit un peu plus
de 3 mois.
CONCLUSION
Les conclusions que nous avons avancées dans les rapports anté-
rieurs se confirment : une complémen tarité certaine est notée entre la
technique de WOO et I’ELISAIDétection d’antigènes : des parasitémies
illisibles parce que trop faibles peuvent être suppléées par une séro-
positivité sans équivoque ; de même, une séro-négativité consécutive à
une
saturation in vivo des sites antigèniques peut correspondre à une
parasitémie facilement décelable.
S’agissant de l’existence éventuelle, dans cette zone, de souches
de trypanosomes chimie-résis tan tes, le cas du bovin N” 87 semble autoriser
une réponse affirmative : ni le bérénil à 70,s mglkg, ni le trypumidium
à 0,s mglkg n’ont pu venir à bout de la séro-positivité de cet animal,
con trairement à tous les autres animaux suivis.
Les travaux se poursuivront au cours du troisième trimestre de 7990,
avec un retour au protocole classique : traitement cas par cas des animaux
parasitémiques et des séro -positifs.
-5-
T A B L E A U 1 : PLAQUES A T. BRUCE1
-
Avant
3 mois après
4 mois après 5 mois après ci mois après
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
1 raitemen t
3 5
2 1
2 2
2 2
15
-
Séro-
n
5
0
0
0
0
positifs
!
%
74,28
0,oo
0,oo
0,oo
0,oo
Séro-
n
3 0
2 1
2 2
2 2
15
-~-
négatifs
%
85,72
1 0 0
100
100
1 0 0
*
-
-
-
-
- - - - -
TABLEAU 2 : PLAQUES A T. VIVAX
Avant
3 mois après 4 mois a p r è s
5 mois après
6 mois après
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
Nombre
d’analyses *
3 5
2 7
2 2
2 2
1 5
Séro-
n
-----L 8 0 2 3 1
p o s i t i f s -
075
22,85
0,oo
9,09
13,64
6,67
Séro-
n
2 7
2 1
2 0
19
1 4
n é g a t i f s -
0
a
77,15
1 0 0
I
90,91
1
86,36
1
93,33
*
: Le nombre d’analyses effectuées 3 mois après traitement était
de 15 dans le rapport du premier trimestre, au lieu de 2 1.
C’est que le lot traité au tr.ypamidium 45 jours après bér@nil
n ’ a v a i t p a s e n c o r e a t t e i n t l a p é r i o d e d e 3 m o i s a p r è s t r a i t e m e n t .
-6-
TABLEAU 3 : PLAQUES A T. CONGOLENSE
I
l
Avant
3 mois après 4 mois après
5 mois après 6 mois après
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
22
7 5
I
I
Séro-
n
7 2
0
0
positifs
%
34,28
0,oo
0,oo
Séro-
n
2 3
2 7
22
négatifs
%
65,82
700
700
*
.. Le nombre d’analyses effectuees 3 mois après traitement était
de 15 dans le rapport du premier trimestre, au lieu de 27.
C’est que le lot traité au trypamidium 45 jours après bérénil
n’avait pas encore atteint la période de 3 mois après traitement.
-7-
TABLEAU 4 : RESULTA TS DE MICROSCOPIE ET DE SEROLOGIE
M = Trypanosomes décelés au microscope
S = Séro- positif
@ = Non examiné (échappé ou mort )
* = Bovins No 9 7 à 100 non prélevés après les
traitements (désistement du propriétaire)
I Décembre 89 j Mars 90 I Avril 90 I
M ai 90 1
Juin 90
- -----
I
A v a n t (7)
3 mois après 1 4 mois après
S nlnic après 6 mois après
NO
T rai.-
-7
No*
temen ts
traitement
T r y p a m i d i u m
TrYpamidium T r y p a m i d i u m T r y p a m i d i u m
T,b T.v T.c T.b T.v. T.c T.b T.v T.c T.b T.v T.c T.b T.v T.c
LOT TRAITE AU TRYPAMIDIUM 45 JOURS APRES BERENIL 70,5 mglkg
Décembre 90
Avril 90
I
Mai 90
I
Juin 90
Juillet 90
I
(1) : En prenant en compte le lot No 97 à 100, le total des analyses
avant traitement est de 35, parmi lesquels 5 séro-positives à
T.b, 8 à T. v et 12 à T.c (voir tableaux No 1 à 3)
12) : Le bovin No 87, déclaré mort dans le rapport du premier trimestre,
s’était plutôt échuppé avant le prélevement du mois de mars.
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D E L ’ I N C I D E N C E D E L A T R Y P A N O S O M I A S E
A N I M A L E E N Z O N E D ’ E L E V A G E D U D I A K O R E
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R E F . N067/PARASl T O .
O C T O B R E 7990.
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Les travaux de validation de la technique ELISA de détection
d’antigènes sériques de Trypanosoma brucei brucei, T. congolense et
T. vivax se sont poursuivis sur des bovins de lu zone de Sokone
(Centre-Sud du Sénégal ; infestée de glossinesl.
Les résultats obtenus au cours du deuxième trimestre de 1990
(avril-juin) indiquent :
- une bonne complémentarité entre cette technique sérologique et
les méthodes habituelles de visualisation des trypanosomes par examen
microscopique de prélèvements sanguins ;
- une durée de protection de 3 a 4 mois conférée aux bovins par
l’administration chimiopréven tive de Trypamidium ;
-, une nette corrélation entre la fin de l’action prophylactique
de ce médicament, la réapparition de parasitémies et d’antigénémies et
l’installation d’une forte anémie.
Enfin, il demeure probable que dans cette zone existent des souches
de trypanosomes chimiorésis tan tes.
MOTS CLES
TRYPANOSOMES .. DIAGNOSTIC - ELISA - ANTICORPS MONOCLONAUX.
INTRODUCTION
La deuxième phase des recherches en vue de la validation de la
technique EL/SA de détection d’antigènes sériques trypanosomiens, entamée
_ en décembre 1989, s’est poursuivie pendant le deuxième trimestre de 1990,
à raison d’une visite par mois des bovins-cibles basés à Sokone (Centre-Sud
du Sénégal),
Le protocole de terrain et les analyses en laboratoire du premier
trimestre restant inchangés, nous ne les reprenons pas ici. Cependant,
pour une meilleure lecture des résultuts de sérologie, nous reproduisons
le tableau du premier trimestre relatif aux traitements trypanocides effectués
au début de cette deuxième phase,
Ce rapport résume les résultats hématologiques, protozoologiques,
croprologiques et sérologiques obtenus d’avril à juin 1990. Les données
recueillies de décembre 1989 à mars 1990 ont fait l’objet du rapport
No 291PARASI TO., avril 1990: Elles seront quelquefois rappelées à titre
de comparaison.
I - TRAITEMENTS TRYPANOCIDES
Les bovins-cibles ont tous été traités au Bérénil en décembre 1989
et, 15 à 45 jours plus tard, au Trypamidium, pour apprécier l’effet de ces
trypanocides sur I’antigénémie et pour déceler éventuellement des souches
de trypansosomes chimie-résis tan tes.
Le tableau ci-dessous donne les dé tails de ces traitements
--
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I
IN? 97 à 1’OO)t
3,s m g l k g
75 /ours après bérénil
* II n’y.a pas de prélèvement post-thérapeutique sur ce lot par .suite
du désistement de l’éleveur-propriétaire.
-2-
II - R E S U L T A T S
2. 7 - Hématocrite
Le tableau suivant donne les résultats du deuxième trimestre
(avril-juin) qui sont comparés à ceux obtenus avant les traitements try-
panocides,
ainsi qu’à ceux du mois de février qui représentent la dernière
mesure de ce paramètre pour le premier trimestre (I’hématocrite n’a pu être
releve en mars).
MOYENNE % DE L'HEMATOCRITE -r INTERVALLE DE CONFIANCE A 5 P. 100
Avant trai-
2 mois après
4 mois après
5 mois après
T6 mois après
tement
traitement
traitement
traitement
traitement
(déc. 89)
(fév. 90)
(avr. 90)
(mai 90)
(juin 90)
35,39 11 2,41 36,89 f. 3,43
37,08 t 2,58
33,81 + 2,31
30,60 I2,64
Jusqu’au quatrième mois qui suit le traitement, I’hématocrite est stable
et assez bon comparé à la norme raciale de 37,7 t 7,2 p 700. On note
aussi, par rapport à la moyenne d’avant traitement, une remontée légère
mais constante pour la même période. II s’en est suivi, à partir du cin-
quième mois, une baisse significative à hautement significative de la moyenne.
La fin de l’action du médicament combinée à l’avancée de la saison sèche
(rareté des pâturages) sont
des explications probables de cette forte
anémie.
2.2 - Trypanosomes
Les examens de sang (interphase sur le terrain, frottis au labo-
ratoire) sont restés négatifs à Trypanosoma de janvier à mai, Au mois
de juin, le bovin No 109 s’est montre fortement positif à T. congolense (4+).
Aucun autre cas n’a été relevé.
. . . / . . .
-3-
2.3 - Autres hémoparasitoses
On note de rares cas de Filariose à Setaria labiatopapillosa, de
Theileriose à T. mutans et d’Anaplasmose 0 A. marginale.
2.4 - Coproloqie
Les selles prélevées en juin montrent quelques cas d’infestation
massive par des Strongles. Guant aux bovins No 89-90 et 706, qui étaient
porteurs de Douves a Fasciola en février, ils sont devenus négatifs en
juin. Une bonne vigilance semble devoir entourer ces deux parasitoses
ches les bovins de cette zone (Action anémiante).
2.5 - Serologie
Le:; tableaux 7 à 5 résument les résultats sérologiques du deuxième
trimestre et rappellent à titre de comparaison, ceux obtenus avant les
traitemen ts et ceux de trois mois après administration du trypamidium.
Les observations suivantes peuvent être retenues de ces tableaux :
- Pour Trypanosoma brucei, la concordance est totale entre les
résultats de microscopie et ceux obtenus en ELISA au cours de ce
deuxième trimestre : examens et épreuves in variablemen t négatifs .
- La parasitémie à T. congolense décelé chez le bovin No 109, cinq
mois après traitement n’a pas été confirmée en sérologie (d.o. = 0,008).
Sans doute s’agit-il d’une saturation des sites antigéniques puisque la
parasitémie était très forte (4+), ce qui a dû engendrer une importante
production d’anticorps .
En outre, et concernant toujours T. congolense, la séro-positivité
réapparaît 6 mois après le traitement au trypamidium.
.
.
/
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.a.
-Y-
- II n’y u pas eu de cas & T. vivax décelé au microscope. En
sérologie, par contre, on note deux faits intéressants :
a) - tous les prélèvements de sérum effectués sur le bovin NO 87
ont été séro-positifs à T. vivax depuis le début de cette deuxième phase.
Cet animal avait toutefois échappé aux prélèvements de 3 mois après trai-
tement, ce qui nous avait donné 700 p 100 de séro-négatifs.
b) - hormis le cas particulier de ce bovin, la séro-positivité à
T. vivax réapparaît au quatrième mois suivant le traitement, et elle per-
siste aux cinquième et sixième mois. Situation normale puisqu’il est
admis que le trypamidium, administré au bovin à la dose de 0,5 mglkg en
I.M., lui confère une protection d’environ 14 semaines, soit un peu plus
de 3 mois.
CONCLUSION
Les conclusions que nous avons avancées dans les rapports anté-
rieurs se confirment : une complémen tarité certaine est notée entre la
technique de WOO et I’ELISAIDétection d’antigènes : des parasitémies
illisibles parce que trop faibles peuvent être suppléées par une séro-
positivité sans équivoque ; de même, une séro-négativité consécutive à
une
saturation in vivo des sites antigèniques peut correspondre à une
parasitémie facilement décelable.
S’agissant de l’existence éventuelle, dans cette zone, de souches
de trypanosomes chimie-résis tan tes, le cas du bovin N” 87 semble autoriser
une réponse affirmative : ni le bérénil à 70,s mglkg, ni le trypumidium
à 0,s mglkg n’ont pu venir à bout de la séro-positivité de cet animal,
con trairement à tous les autres animaux suivis.
Les travaux se poursuivront au cours du troisième trimestre de 7990,
avec un retour au protocole classique : traitement cas par cas des animaux
parasitémiques et des séro -positifs.
-5-
T A B L E A U 1 : PLAQUES A T. BRUCE1
-
Avant
3 mois après
4 mois après 5 mois après ci mois après
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
1 raitemen t
3 5
2 1
2 2
2 2
15
-
Séro-
n
5
0
0
0
0
positifs
!
%
74,28
0,oo
0,oo
0,oo
0,oo
Séro-
n
3 0
2 1
2 2
2 2
15
-~-
négatifs
%
85,72
1 0 0
100
100
1 0 0
*
-
-
-
-
- - - - -
TABLEAU 2 : PLAQUES A T. VIVAX
Avant
3 mois après 4 mois a p r è s
5 mois après
6 mois après
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
Nombre
d’analyses *
3 5
2 7
2 2
2 2
1 5
Séro-
n
-----L 8 0 2 3 1
p o s i t i f s -
075
22,85
0,oo
9,09
13,64
6,67
Séro-
n
2 7
2 1
2 0
19
1 4
n é g a t i f s -
0
a
77,15
1 0 0
I
90,91
1
86,36
1
93,33
*
: Le nombre d’analyses effectuées 3 mois après traitement était
de 15 dans le rapport du premier trimestre, au lieu de 2 1.
C’est que le lot traité au tr.ypamidium 45 jours après bér@nil
n ’ a v a i t p a s e n c o r e a t t e i n t l a p é r i o d e d e 3 m o i s a p r è s t r a i t e m e n t .
-6-
TABLEAU 3 : PLAQUES A T. CONGOLENSE
I
l
Avant
3 mois après 4 mois après
5 mois après 6 mois après
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
Traitement
22
7 5
I
I
Séro-
n
7 2
0
0
positifs
%
34,28
0,oo
0,oo
Séro-
n
2 3
2 7
22
négatifs
%
65,82
700
700
*
.. Le nombre d’analyses effectuees 3 mois après traitement était
de 15 dans le rapport du premier trimestre, au lieu de 27.
C’est que le lot traité au trypamidium 45 jours après bérénil
n’avait pas encore atteint la période de 3 mois après traitement.
-7-
TABLEAU 4 : RESULTA TS DE MICROSCOPIE ET DE SEROLOGIE
M = Trypanosomes décelés au microscope
S = Séro- positif
@ = Non examiné (échappé ou mort )
* = Bovins No 9 7 à 100 non prélevés après les
traitements (désistement du propriétaire)
I Décembre 89 j Mars 90 I Avril 90 I
M ai 90 1
Juin 90
- -----
I
A v a n t (7)
3 mois après 1 4 mois après
S nlnic après 6 mois après
NO
T rai.-
-7
No*
temen ts
traitement
T r y p a m i d i u m
TrYpamidium T r y p a m i d i u m T r y p a m i d i u m
T,b T.v T.c T.b T.v. T.c T.b T.v T.c T.b T.v T.c T.b T.v T.c
LOT TRAITE AU TRYPAMIDIUM 45 JOURS APRES BERENIL 70,5 mglkg
Décembre 90
Avril 90
I
Mai 90
I
Juin 90
Juillet 90
I
(1) : En prenant en compte le lot No 97 à 100, le total des analyses
avant traitement est de 35, parmi lesquels 5 séro-positives à
T.b, 8 à T. v et 12 à T.c (voir tableaux No 1 à 3)
12) : Le bovin No 87, déclaré mort dans le rapport du premier trimestre,
s’était plutôt échuppé avant le prélevement du mois de mars.