. . VALEUR DE L'IM&lUJ!~ITE COIWEREE PAR ...
.
.
VALEUR DE L'IM&lUJ!~ITE COIWEREE PAR DEUX VACCINS
ii ¡°¡¯
tr
LYOPHILISES PREPARES A LPAIDE DES SOUCHES KH?J ET Tl
par M.P.DOUTRE
f
. *
A la suite des recommandations de la Conf¨¦rence des Experts de la
p¨¦ripneumonie bovine tenue 8 Khartoum en f¨¦vrier 1967 et des possibilit¨¦s
de mise au point de campagnes inter--¨¦tats de vaccination contre cette maladie,
le service de bact¨¦riologie du Laboratoire national de I'Elevage et de Recher-
ches v¨¦t¨¦rinaires du S¨¦n¨¦gal a men¨¦ au cours des ann¨¦es 1967 et 1968 deux
exp¨¦riences destin¨¦es ?i appr¨¦cier la valeur de lPimmunit~ que conf¨¦raient
deux vaccins lyophilis¨¦s pr¨¦par¨¦s ¨¤ partir des souches KHsJ (86¨¨me passage)
et Tl (44¨¨me passage). Les bovins utilis¨¦s aupartenaient a la race XDama,
race bovine africaine , particuli¨¨rement sensible ¨¤ la p¨¦ripneumonie. LPespace
disponible ne permettant pas de mener en m&ae temps les deux tests, ces der-
a
niers se sont d¨¦roul¨¦s de la fa ?on suivante :
4
3
- l'exp¨¦rience contact yKR3J a eu lieu d¨¨s la fin de la saison des pluies 1967,
- celle effectu¨¦e avec des animaux vaccin¨¦s avec T13 d¨¨s la fin de l'hivernage
1968.
Ces p¨¦riodes ont ¨¦t& choisies de fa ?on ¨¤ faciliter lvalimentation
en vert des bovins maintenus en stabulation &roite.
/ VALEUR DE LvIMMUNITE CONFEREE PAR LA SOUCHE KH3J /
A - VACCIN UTILISE
5
Il r¨¦sulte de la lyophilisation dPun m¨¦lange a volume ¨¦gal dlunc
culture de Mycoplasma mycoides souche KH3J et de mist dessicans (*)v
La composition du milieu de culture rdsulte des travaux effectu¨¦s au
Laboratoire de Fort-=Lamy (milieu F 66, rapport pr¨¦sent6 ¨¤ la 3¨¨me R¨¦union des
Experts sur la p¨¦ripneumonie bovine FAO/OIE/OAU, tenue ¨¤ Khartoum en f¨¦vrier
1967) et de ceux des chercheurs australiens du CSIRO,
Quelques modifications ont ¨¦t¨¦ apport&s, elles portent sur la
suppression de _1 'acide palmitique uratiquemment insoluble m¨ºme dans une SO-~
lution de soude 0,l M et sur la pr¨¦paration et la quantit¨¦ d'extrait frais
de levure ajout¨¦.
- mac¨¦ration de coeur : on provoque la makration pendant une heure de 500 g
de hachis de coeur de boeuf degraisse dans un litre d'eau ¨¤ 50¡ãC, puis on
porte ¨¤ ¨¦bullition. Filtration ¨¤ chaud sur papier filtre. On ajoute par
litre : 10 g de tryptose (Difco), 2 g de glucose et 2,5 g de phosphate
disodique. On chauffe ¨¤ 80¡ãC, filtration ¨¤ chaud.
- addition de :
. glyc¨¦rol . ..¡°c..~.rJ*..**.e.o~..*.*..**
0,3 gllitre
0 acide ol¨¦ique....OI......O...........
15 mg
0 extrait frais de levuremO.OOC.DO.OO.e. 100 ml
. s¨¦rum de cheval d¨¦compl¨¦ment¨¦,....,.., 100 ml
0 p ?nicilline .,...**,~*...~~..d~0~"~..~.
1.000.000 unit¨¦s
Le pH est amen¨¦ 2 8,l avec une solution de soude 10 M. Lgacide
oldique est m&lang6 a 5 ml de soude 0,l Mg le gel fort& est dissous par
agitation magnGtique.
5
.
/
.
6e
*
?:
(+) Actuellement, seul le lait ¨¦cr¨¦m¨¦ sec est utilis¨¦ comme support de lyo-
philisation dans la pr6paration des vaccins lyophilis¨¦s contre la p¨¦ri-
pneumonie bovine.
w
3
- extrait de levure : l'extrait de levure prgpar¨¦ extemporan¨¦ment pr¨¦sente
des qualit¨¦s supgrieures aux produits correspondants que l'on trouve dans
le commerce o La technique de pr¨¦paration retenue est la suivante :
(1.E.M.V.T. .- laboratoire de microbiologie)
0 mettre en suspension homog¨¨ne 1 kg,de levure fra ?che de bo¨¹lan-
gerie dans un litre dveau distill¨¦e en pr¨¦sence de 8 ml de
chloroforme
. laisser au bain-marie 24 heures ¨¤ 5O'C en agitant de temps en
temps, centrifuger et recueillir un premier surnageant que lgon
conserve au froid
. reprendre les culots dans un litre d'eau distill6e et les soumettre
& quatre cycles gel-d¨¦gel
. centrifuger ¨¤ nouveau et recueillir le deuxi¨¨me surnageant
. melanger les deux surnageants
. filtrer sur filtre Seitz EKS 1, conservation a -2O'C.
Pour la pr¨¦paration du vaccin, on utilise une culture de 72 heures.
Au cours des derni¨¨res 24 heures, les ballons sont port¨¦s sur agitateur magn¨¦.-
tique.
La r¨¦partition se fait sous un volume de 5 ml par flacon type p¨¦ni-
cilline de 20 ml.
Au moment de l'emploi, le contenu de chaque flacon est reconstitu¨¦
avec 20 ml dgeau distill6e st6rile froide (20 doses vaccinales). Dans ces
conditions, le titrage des vaccins par la m¨¦thode des dilutions donne un
minimum de 109 unit& viables par ml. Ce titre est ¨¦gal ou sup¨¦rieur ¨¤ celui
des meilleurs lots de vaccin-culture mesur¨¦ au moment de leur conditionnement.
B =* TEST D'INMUNITE
a/-, Principe de la m¨¦thode
Les animaux vacci&s ont et6 ¨¦prouv6s en utilisant la methode de
mise en contact etroit d¨¦crite par les auteurs australiens. Cette technique
consiste ¨¤ mettre en pr¨¦sence,¨¤ans une enceinte close ¨¤e volume restreint,
un lot d'animaux vaccin&, un lot dPanimau.x temoins non vaccin¨¦s et un lot
de bovins infect¨¦s exp6rimentalement par voie endobronchique. Pour que lvex-
p¨¦rience soit concluante, dans lfabsolu, il convient qu'en fin d'exp&iencc
les bovins intub¨¦s et les t¨¦moins non vaccin& succombent de p¨¦ripneumonie
alors que les animaux vaccines r¨¦sistent,
4
bj- B ?timent
En tenant compte des dimensions relatives du b ?timent construit
par les chercheurs australiens du CSIRO, une ¨ªStable a ¨¦t¨¦ sp¨¦cialement am¨¦-
nag¨¦e ¨¤ Sangalkam pour rgaliser les 6preuves d?immunit¨¦ par la m¨¦thode de
contact,
Dimensions : longueur..... 10 m
largew.,.... 5 m
hauteur,..... 3 m,
Pour assurer l'alimentation des animaux, deux mangeoires de 5 m de
long sont plac¨¦es de chaque c ?tS. Le foin stock¨¦ sur le faux-plafond en planches
est directement amen¨¦ dans les mangeoires gr ?ce ¨¤ des trappes <amenag¨¦es ¨¤.
cet effet.
L'a¨¦ration est assu&e par 7 ouvertures de 1 m x 0,50 m situ¨¦es
¨¤ 2,35 m du sol.
A l'ext¨¦rieur, WI parc de 120 m2 pourvu d'un abreuvoir permet de
recevoir les animaux chaque matin pendant environ une demi-heure. Une fois
par semaine, lors des prises de sang, ce temps est prolong de deux ¨¤ trois
heures.
c/- Protocole exp¨¦rimental
Tous les bovins utilis¨¦s appartiennent 5 la race NDama.
Au jour Jo9 11 bovins sont vaccin& par voie sous-cutanee, & la
c ?te, avec 1 ml de vaccin KH3J lyophilis¨¦ reconstitu¨¦ avec de l'eau distill¨¦e
sterile rafr&hie (If* des animaux : 0001 I.~ 0002 == 0003 .. 0883 Ca 1505 p., 0885 -
1519 La 0871. .., 0887 - 0900 '.* 0896).
Le titre du vaccin est compris entre 10' et 1010 unit& viables
par ml (titrage par la methode des dilutions pasteuriennes).
Au jaur JQ + 14, 11 bovins sont inocul¨¦s par voie endobronchique
(NO de s animaux : Gd77 = 0872 aa 0889 I-p 0874 - 0875 -= 0882 =. 0881 -- 0873 -=
0894 - 0892 - o899L
Inoculum : apr¨¨s anesth¨¦sie au chloral intraveineux, chaque animal
re ?oit une injection intra-trach¨¦ale administrge ¨¤ la sonde, suivant la tech-
nique classique, de 20 ml d'un mglange ¨¤ parties ¨¦gales de :
. broyat de l¨¦sions pulmonaires p¨¦ripneumoniques,
D lymphe p6ripneumonique,
. bouillon coeur s¨¦rum (milieu F 66 modifi¨¦),
5
Les lEsions pulmonaires et la lmphe p¨¦ripneumonique sont r&olt6es
15 jours auparavant sur un malade au dernier stade de la maladie, sacrifik
sur le terrain, sur notre demande (Nioro-dw:Rip),
et conserv¨¦es jusqupau
moment de l'emploi ¨¤ -2O'C.
Un isolement de.M.mycoides ¨¤ partir des l¨¦sions pulmonaires et de
la lymphe est effectug au moment de la pr¨¦paration de l'inoculum pour confir-
mer la qualit du mat¨¦riel utilis6.
3 ¡®= Mise en contact ¨¦troit des trois lots d'animaux (vaccin&s
"7""r-=~----Y""~-rr,-~~~,~~~-=~,-~~~~.
,,,,,,,,,,,.,,,,,,,,,,,.,,;.,,~
temolns non vaccines Intubes
,~~~~~=-~~~~.J-.--,-"-"*-,9,,,,,,,,
Au jour JC + 28, les animaux vaccines et les animaux infectants
sont group¨¦s dans l'&able am¨¦na&e ¨¤ cet effet, en presence de llbovins
t&oins.(M" des t¨¦moins : 1536 - 1501. - 898 $= 1576 - 893 - 1542 =. 884 1%a 1523 -
890 - 1530 (3 895).
d/- Evolution des animaux
Les observations s'arr¨ºtent au jour JC + 100.
1 - Evolution des animaux infectants
-">---L;I~-r-u~I---~~~--~~~,-~~~~.,~~~~~-~,~
La r¨¦action ¨¤ l'infection intrav,trach6ale a ¨¦t¨¦ suivie sur les
plans thermique 3 clinique et s¨¦rologique (d6viation du compl¨¦ment),
Evolution thermique
Les temp&atures du @me au 36¨¨me jour ont 6t¨¦ reproduites d¡®ans
le tableau 1 :
Sur 11 animaux intub¨¦s :
- 7 ont pr¨¦sent6 une ¨¦l¨¦vation thermique significative (temp¨¦rature sup&ieure
¨¤ 40Oc (no0899 -a 0892 r- 0873 -a 0882 -1 0874 C=l 0889 .- 0877)o
Parmi ces animaux, on peut distinguer 5 bovins ayant manifest¨¦ une r¨¦action
pr¨¦coce (6, 7, 8) g¨¨me jour) (no0899 -' 0892 .-- 0873 s9 0882 - 0877) et deux
une r¨¦action tardive (18¨¨me jour).
Sur ces 7 bovins, 6 sont morts en cours d'expkience en offrant ¨¤ lgautopsie
des l¨¦sions caract¨¦ristiques, le 7¨¨me (0877) a ¨¦tt sacrifi¨¦ en fin dOcxp&-
rience; des l¨¦sions p¨¦ripneumoniques pulmonaires, Xycoplasma mycoides a
¨º-t¨¦ isoll,
- 4 n'ont pas manifest¨¦ dP¨¦l¨¦vation de temp¨¦rature ccract&istique
(tJOO894 -
0881 - 0875 == 0872)~ Trois de ces bovins sont morts en cours d'exp¨¦rience
(no0875 va 0881 - 0872), seuls les no0872 et 0881 pr¨¦sentent des l¨¦sions
p¨¦ripneumoniques,
Le bovin 0894 sacrifi¨¦ en fin d'exp¨¦rience nFoffre
aucune Gsion.
En conclusion, sur 11 bovins intubes, 9 ont contra& la p¨¦ripneu-
monie et 2 animaux nIont pas r6agi 2 l'intubation (no0875 r= 0804), On peut
?galement supposer que cette op¨¦ration ait Etd mal ex¨¦cutk, ce qui est peu
probable.
-.
Tableau 1 - Evolution de la temp¨¦rature chez les animaux infectants
---T-l-I
Nombre de jours
'
apr¨¨s d¨¦but de
JO+18 Jo+ly/JO+20~Jo+21~Jo+22
,~~+26 ~~+27 Jo+28 JO+29 3 +32 J +35 J +42 J +& J 950
l'exp¨¦rience
1
l
??Ombre de jours
12
13
14 1.5
4
9
10
11
apr¨¨s intubation
1415 l6 l7 la
1
1 39,2/ 38,71 3961 3921 398 40,2i 4091 3?,7 40,2 40~3 40,2 40,2
l
0892
39,2
3997
3938 j 40,5
40,7
40,9/ 4027
40,5
40 ,I 40,7
40,L +
l¨¦sions
-
-
0894
38,7
38,5
38,21 3a,6
3a91
38,4
38,6
3a,3
383
38,3
30,5 38,6 3
9
j 38.2/ 36~1 3~41
1 38,51 39,2l 39361 40 t 40
39,7
40,5
4057
40
40,2f 40,5 40,3
38251 * [
lesions
I
I
I
f 3921 38,51 3%,5/ 39,1/ 3992
39,4
39,4
3936
3923
39,a 39,4
3%,61 39 1 + f l¨¦sions
39,3
--
l
1
!
I
38,Zl 38,2j 38,8[ 40,5/ 3939
40,9
40,a 40~3
4039
4OJ 41,l 41-z
40,8i 3
9
j 33,11 39931
I
0875
1 3%,5/ 3894 3%,5 3835) 3832 38,3 39,31 38,% 3932 3999 3937 3995 3g,81 + 1 <ibsence Iksion
38,5
3%,4
38,5
38,5
38,2 38,3 39,3 38,8 3932 39.;9
0874
-i-
39,7
39,5 41 1 40,21 39,9/+ l¨¦sions
38,1! 39
39,21 38,7
38,2
39,3
38
383%
3896
39
38,7 382 3F!4u,6j
0889
I
l
37d 373% 3% 1 37,y 37,7 3%,5 38,2 37,7
0872
I
I
37,%
3732
37,7 37,9
3K7 3735 78,4 37,8
I
3737
38
39,2
39,2/ 3%,7
40,l
40
40,6
40,2
40
40,5 40
0877
39,l 38,2
-t
38 38
/
La mort d'un animal est indiqu¨¦e par le signe +
Remarque : Chez tous les animaux morts de peripneumonie, les 16sions
pulmonaires sont des plus typiques (h¨¦patisation englobant parfois la tota-
lit¨¦ dPun poumon avec scl¨¦rose intersticielle), Toutefois, jamais n'apparazt
l'¨¦panchement pleur¨¦tique important que l'on observe si souvent dans la mala-
die naturelle,
Evolution s¨¦rologique
La d¨¦viation du compl¨¦ment a ¨¦t¨¦ effectu¨¦e par la m¨¦thode de
Kolmer avec fixation d7une nuit ¨¤ 4'C.
Le r¨¦sultat des diffgrents titrages a ¨¦t¨¦ reproduit dans le ta-
bleau 2. Seules les r¨¦actions ++++ sont mentionn¨¦es,
Sur 11 animaux intub¨¦s, 9 ont r¨¦agi s¨¦rologiquement. Les no0872
et 0894 sont n¨¦gatifs, toutefois le 0872 succombe en pr¨¦sentant des l¨¦sions
de p¨¦ripneumonie (po ssibilit¨¦ d'une hypoga3nmaglobulin6mie).
.-
Le 0894, sacrif%
en fin d'exp¨¦rience, est indemne de p¨¦ripneumonie. Four cet animal, il est
possible d'envisager soit quoi1 n'ait pas r¨¦agi ¨¤ Ilinfection intra--trachGale,
soit que lrop¨¦ration ait ¨¦t¨¦ mal effectu¨¦e (sonde introduite dans l'oesophage),
Pour le nOo875, mort avec absence de l&ion pulmonaire, sans jamais avoir pr&
sent6 de pouss¨¦e thermique, 1"errour de manipulation est ¨¤ ¨¦carter, car 14 jours
aprk l'intubation, cet animal fixe le compl¨ºment au 11320.
Pour ce bovin, tout semble s'¨ºtre passe comme si l'intubation avait
¨¦t¨¦ effectu¨¦e avec une culture en bouillon d'une souche virulente de M.myc~i;~
des. Dans ce cas, on observe une mont¨¦e r¨¦guli¨¨re dPanticorps sans trace de
l¨¦sion pulmonaire ? lPautopsie. La r¨¦action s¨¦rologique semble seulement re--
fl¨¦ter la phagocytose de substances ¨¦trang¨¨res introduites dans l'appareil
pulmonaire.
Evolution clinique
La presque totalit¨¦ des animaux ¨¤ s¨¦rologie positive pr¨¦sente de la
toux le matin au moment de l'abreuvement. Le phenom?ne est apparu chez les
premiers bovins, 10 jours apr¨¨s l'intubation.
Evolution thermique et s¨¦rologique
Pour les bovins t6moins, la courbe de temp¨¦rature se superpose 5
lP¨¦l¨¦vation des taux des anticorps fixant le compl¨¦ment. Aussi, seule lq¨¦vo-
lution s¨¦rologique des animaux t¨¦moins figure-t-elle dans le tableau 3.
.
0. /.
.
8
.
Pi . Ii+ l-i
ml
5
CU
c
.
9
Tableau 3 y= Evolution shologique des ani ?na,ux t¨¦moins
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmcr)
!
Nombre de jours
apr¨¨s d¨¦but
JO+42
JO+59
JO+71
JO+75
~0+82
JO@9
JO+95
exp¨¦rience
Nombre de jours
~apr¨¨s mise en
1.4
31
43
47
54
61
67
contact
1536
.:a
.Y
1/20
lb30
L+B
1501
ca
L.f.B
0898
'
m
abshce
l
L.PA3.j
1576
Le"
1/10
1/160
1/320
1/320
1/640
LAI?
0893
I-2
abs&ce
L.P.9
1542
.a
I...,
1/160
1/640
L3.B
0884
..A
a.bsCnce
L.P,B
1523
L?I
Y
1/320
1/640
1/640
1/640
1/640
+
L,P,B,
0890
l/lO
l/lO
1/160
+
L.P.B
1530
u5
115
1/40
1/320
+
L.POB
0895
+
absence
L.P.B
1 0
Sur 11 animaux t¨ºmoins :
y 7 sont morts naturellement en offrant ¨¤ lvautopsie des l¨ºsions peripnew
moniques d'oii M.rqycoides est isol¨¦. Sur ces 7 bovins, un seul (1.501) n'a
pas pr¨ºsent¨º une mont¨¦e appr¨¦ciable des anticorps fixant le compl¨¦ment
(mort excessivement rapide 33 jours apr¨¨s la mise en contact ou hypogammaL-
globulin¨ºmie). Les 6 autres traduisent s¨¦rologiquement l'infection entre
35 et 40 jours apr¨ºs la mise en contact avec les bovins infectants.
- 4 sont morts naturellement, tr¨¨s rapidement, sans pr¨¦senter la moindre
l¨¦sion n¨¦cropsique d ?e ¨¤ la p¨¦ripneumonie. La disparition de ces animaux
est cons¨¦cutive aux conditions particuli¨¨rement s¨¦v¨¨res du stress qu'impose
le confinement. Ces accidents proviennent du fait qu'¨¤ l'achat les animaux
ne sont pas homog¨¨nes et que les sujets plus petits, plus faibles, ne
peuvent s"alimenter convenablement. Ecart¨¦s des mangeoires, ils se couchent
et succombent apr¨¨s avoir ¨ºt¨¦ pi¨¦tin¨¦s,
.
Evolution s¨ºrologique apr¨¨s la vaccination
La vaccination avec KH J n'entra ?ne aucune montee post-vaccinale
des anticorps fixant le compl¨ºme t.
a
.
Evolution s¨¦rologique apr¨¨s la mise en contact
Les r¨¦sultats figurent dans le tableau 4.
r
*
4
.
1
.*
¡®
.4
.
Tableau 4 CR Evolution s¨¦rologique des animaux vaccin¨¦s apr¨¨s la mise en contact
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
Sombre de jours apr¨¨S
Jo+59' Jo+71
Jo+-?+ ~~+82
d¨¦but exphience
5*+28
Jo+42
I
5,+89
J,+95
I
I
l
1
Hombre de jours apr¨¨s
mise en contact
0
14
31
1
113
IL7
r-1.
labs ncel
0871
8
L. .B
-
1519
--
-.
abs % nce
L. .B
0885
1/40
abs nce
i
I
..a
"l" L g B
.A.
0883
s?.
abs nce
ci.2
L. i3 .B
0887
l/lC
115
u5
l/lO
l/lO
abs nce
%
L. .B
-
0002
.z*
=Ca
1
1/20
L.8.B
0001
x
115
1/5
l/lO
l/lO
l/lO
l/lO
l/lO
sacrifi¨¦
L.P.B.
0900
c.m
1/20
-
1/10
l/lO
l/lO
1/20
l/lO
sacrifi6
aucune L.P,B,
1505
1/10
-
us
1-/5
l/lO
1/20
1/40
sacrifi¨¦
aucune L.P.B,
0003
FS
1/5
1/5
l/lO
l/lO
l/lO
sacrifi6
aucune L.P.3,
0896
7..
sacrifi¨¦
l/lfSO
1/80
1/160
1/80
l/%O
1/80
1/160
aucune L.P.B.
visible
-
1 2
Sur 11 bovins vaccin¨¦s en vue de realiser l'exp¨¦rience :
1 meurt le jour de la mise en contact (nO0871) sans pr¨¦senter la moindre
atteinte de pkipneumonie,
5 succombent naturellement dans des temps variables, 4 n'offrent aucune
l¨¦sion pkipneumonique
(1519, 0885, 0883, 0887); par contre, le no0002
pr¨¦sente, 34 jours apr¨¨s la mise en contact, un s¨¦questre p¨¦ripneumonique
d'o¨´ M,mycoides est isol¨¦.
5 sont sacrif& en fin d'exp¨¦rience : sur ces 5 bovins, 4 &v¨¨lent a
l'autopsie des poumons indemnes de p¨¦ripneumonic (n'0900, 1505, 0003, 0896);
le s¨¦rum du bovin 0896 fixe le compl¨¦ment 8 un taux Qev¨¦ (1/160), sans
qu'aucune l¨¦sion ne puisse ¨ºtre d¨¦cel¨¦e, Par contre, le no0001 montre deux
s¨¦questres p&ipneumoniques
dPoU M.mycoides est isol¨¦ par culture,
En conclusion, la vaccination avec le vaccin KH3J lyophilis~ a donc
. .
apparemment favorise la cr¨¦ation de deux bovins porteurs chroniques sur
11 animaux vaccin¨¦s un mois avant la mise en contact avec les sujets infec-
tants.
CONCLUSIONS
L'exp&ience contact destinee a
' *
apprecier la valeur de lgimmunit¨¦
conf¨¦r¨¦e par un vaccin lyophilise pr¨¦pare & partir de la souche KH3J un mois
apr¨¨s la vaccination montre :
l/,-, quvunc immunite certaine s'est d¨¦velopp& chez les sujets vaccin¨¦s,
7 temoins morts de p&ipneumonie pr¨¦sentent des l¨¦sions volumineuses
des $~US caract¨¦ristiques, Aucun vaccin6 n'offre des ldsions d'une telle
importance.
2/- que cette immunit¨¦ est loin d'¨ºtre totale, 2 bovins pr¨¦sentent ¨¤ l'autop=-
sie effectu¨¦e, soit apr¨¨s la mort naturelle, soit apr¨¨s abattage, des
s¨¦questres de la grosseur d'une pomme d'o¨´ M.mycoides est isolee par
culture. Au contact d'animaux infectants, d&x animaux porteurs chroni-
ques ont ainsi ¨¦tG cr¨¦¨¦s.
3/- que seules des vaccinations r¨¦p&$es au moins tous les 5 mois, pendant
plusieurs ann¨¦es, sur la quasi totalit¨¦ du troupeau peuvent entra ?ner
une r¨¦gression de la maladie.
13
/ VALEUR DE LsIMMU!?ITE CONFEREE PAR LA SOUCHE T, /
A- VACCIN UTILISE
Il r¨¦sulte de la lyoph ?lisation dvun m¨¦lange & volume ¨¦gal d'une
culture de Mycoplasma mycoides, souche Tl, et de mist dessicans, Le milieu
utilis6 pour la culture est celui d&r ?t pr¨¦c¨¦demment (F 66 modifi¨¦),
Le vaccin reconstitu6 au moment de l'emploi titre un peu plus
de 10g unit¨¦s viables par dose vaccinale (1 ml),
B- TEST DPIMMJNITE
.
a/- B ?timent
Afin de pouvoir mener lvexp¨ºrimentation sur un nombre plus ¨¦lev¨¦
d'animaux, la superficie du b ?timent ainsi que le nombre des mangeoires ont
¨¦t¨¦ doubl¨¦s :
longueur,.,., 10 m
largeur...... 10 m
Hauteur...... 3 m.
b/- Protocole exp&?imental
Tous les bovins utilis¨¦s appartiennent comme pr¨¦c¨¦demment 2 la
race NDama. Achet¨¦s au S¨¦n¨¦gal Oriental, ils sont garantis par le vendeur
comme non-vaccin¨¦s.
Le but de l'exp¨¦rience consiste ¨¤ appr¨¦cier la valeur de l'irnmu-
nit¨º que pr¨¦sentent des animaux vaccin¨¦s avec le vaccin Tl lyophilis¨º 3 mois,
7 mois et 12 mois apr¨¨s la vaccination. 50 bovins ont donc ¨¦t¨¦ vaccin¨¦s et
conserv¨¦s ¨¤ !a ferme de Sangalkam. Ils ont ¨¦t¨¦ r¨¦partis en trois lots utili-
sables respectivement 3, 7 et 12 mois apr¨¨s la vaccination. Seule la premi¨¨re
phase de l'exp¨¦rience (valeur de l'immunit¨¦ 3 mois apr¨¨s la vaccination)
fait l'objet de la description et des conclusions qui suivent :
c
.
Les 15 bovins vaccines utilis¨¦s lors de l'exp¨¦rience contact
groupent 7 animaux qui n'ont pas prdsent¨¦ de r¨¦action locale post-vaccinale
au point dPinoculation (n025, 24, 9, 42, 83, 10, 79) et 8 bovins qui offri-
rent une r¨¦action locale ne d¨¦passant pas la taille de la main (ntl B, 80,
go, 11, 82, 2, 18 B, 93).
L'&olution s¨¦rologique post-vaccinale de ces 15 animaux figure
dans le tableau 5 (deviation du compl¨¦ment Kolmer).
*. / . .
14
Tableau 5 - S¨¦rologie post-vaccinale des animaux vaccin¨¦s
avec T1 avant la mise en contact
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
No des animaux
Vaccination J +l?
JO
0 +
Jo+20
JO+28
JO+41
R¨¦action locale au
point d'inoculation
25
1/5
1/40
1/160
1/80
24
ca
u5
1/40
1/40
1/20
I>
9
sa
I
-7
42
l/lO
1/10
Il20
1/10
a3
il
CI
_I
10
-2
1110
l/lO
-
'=
I
79
.x
1/5
1120
l/lO
1/5
11 B
e.'
1/5
1/10
1/10
1/5
++f (taille d e la
main)
a0
D
l/lO
aia0
1/160
1/320
+-t-k
l
90
l/lO
1/40
1/160
1/160
+++
11
-3
l/lO
1140
1180
1/20
-l-4-+
a2
"3
1110
i/40
l/lO
l/lO ++
l
2
i-
1/5
1/5
1/5
.-:,
++
18 B
I
l/lO 1 1/20
l/lO
+++
93
-s
115
1110
1/5
-=
+++
. ./ . .
15
Sur 15 animaux vaccin¨¦s, 13 ont montr¨¦ une r¨¦action s¨¦rologique
posi+vaccinalc dqintensit¨¦ variable selon les sujets, proportionnelle ¨¤
l'importance de la r¨¦action locale, Toutefois, le no25 qui riva pr¨¦sent¨¦ aucune
r¨¦action locale, fixe le compl6ment au 1/160, 28 jours apr¨¨s la vaccination.
2 ~1 Intubation des animaux destin& & devenir infectants
Y_. lIus.al dMO .m,.m 1.11S.7.C *Lil..?l*-Tr > s.r9L:,..~nlO"L- . ..III.IIP_U___NI..__.~--~~~~,~~~~~~~~,-,
L'inoculation intra-trach¨¦ale de la suspension infectante est
effectu¨¦e comme pr¨¦c¨¦demment.
Deux lots d'animaux ont ¨¦t¨¦ successivement rendus infectants, En
effet, la mortalit¨¦ tr¨¨s rapide des animaux du premier lot a fait craindre
la possibilit¨¦ d'une mauvaise contamination des t¨¦moins et des vaccin¨¦s. Un
second lot de bovins infectants a donc ¨¦t¨¦ pr¨¦par¨¦. Ces animaux ont ¨¦t¨º
introduits 21 jours apr¨¨s le d¨¦but de la mise en contact, il ne restait alors
plus que trois bovins infectants survivants du premier lot.
(13, 88, 3 2 , 4 4 , 3 6 , 2 9 , 14
No des bovins infectants du ler lot (15 bovins) (26, 5 6 , 23, 57, 15, 1 8 , 7 6 ,
(95
No d e s bovins infectants du 2Gme lot (12 bovins) (702, 709, 710, 721, 722, 724,
(715, 34, 717, 716, 711, 718
Trois mois apr¨¨s la vaccination, 15 bovins vaccin¨¦s ont ¨¦t¨¦ group¨¦s
avec 1 5 bovins infectants
(ler lot) en pr¨¦sence de 15 t¨¦moins (n0759 43, 38,
40, 2 2 , 31, 50, 3, 63 B, 41, 5 B, 4, 91, 20, 74). Le deuxi¨¨me lot de bovins
infectants a ¨¦t6 introduit dans l'¨¦table exp¨¦rimentale 21 jours apr¨¨s le d¨¦but
de la mise en contact.
c/- Evolution des animaux
Les observations s"arr¨ºtent 94 jours apr¨¨s le d¨¦but de la mise en
contact.
1 ca Evolution des animaux infectants
wm.L:r ~__-:_/..~-'_.-~r~Y.~~~~-~.~~~~~,~~~~.,,~~,
.li t.:z
Seule lv¨¦volution s¨ºrologique est rapport¨¦e dans les tableaux qui
suivent. Le devenir des anticorps fixant le compl¨¦ment a ¨ºt¨¦ suivi par la
m¨¦thode de Kolmer. La recherche de l'antig¨¨ne circulant a ¨¦t¨¦ effectu¨¦e par
pr¨ºcipito-diffusion en bo ?te de P¨¦tri (g¨ºlosc noble ¨¤ 1 p.100 dissoute dans
un tampon v¨¦ronal ¨¤ pH 7,3 - 7,4, merthiolat¨¦ ¨¤ 0,04 p.100).
Les r¨¦sultats obtenus figurent dans les tableaux 6, 7, 8 et 9
(ler et P¨¨me lot d'animaux infectants). En mati¨¨re de dhiation du compl¨¦ment,
seules les r¨¦actions ++++ ont ¨¦-te retenues,
.
/
.
0.
L
.
.¡±
<¡±
Tableau 6 .- Evolution s¨¦rologique des animaux intub¨¦s du premier lot
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
1
I
I
I
1
1
I
I
Nombre de jours aprh 7
-rl
l?intubation
13 21
28 j 35 1 41 1 49 ) 56 ) 63 1 70 ] 77 / 84 1 91 1
No des animaux
I
I
13
1/160
1/80
1/40
1/40
1/40
1/x0 l/ao 1/5 1/5 m Sacrifi¨¦.Absence'
1/10 1/320 1/320
l¨¦sion p&.-ipn.
/
/
L+B
1
1/20 1/160 1/320
88
I
!
I
t--
L,P,B
3 2
1/40
t
44
L.P,B
I
-
1/320 +
I
I
I
36
1/5 1/80 1/320 1/640 1/320
1/80
1/80
1/80
1,'40
1,'20
1/20
1/20
1/201~;~~~~i;~+&s~ce *
-
L.P.B
29
1/80
+
-
14
1/5
1/40 L*y*B
v-
26
'L.P.B
1/80
+
-
56
1/40 f LeP*B
+
23
L.P.B
J-/40
+
57
L.P.B
1/320 +
15
1,'5 1/80 1/160 L,P.B
+
18
L.P.B
1/80 +
I
I
I
I
76
cs.
x/80 1/160 2&,20 1/160 l/lG;O
1/80
1/40
1/40
1/40
1/20
1,'20
1/20(S:crifi¨¦-
Gros
iSecpeStre p¨¦rip.
f
I
I
35
I
1/10 1/160 Ln+PaB
L.P.B.
+ : mort avec l¨¦sions p¨¦ripneumoniques
R
f
--
I
1
L
D
6
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--
--
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-
I
P
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1
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5
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i
i
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--
i
i-
9
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-
-
-
-
1
-
/-
I
3
17
<
.
I
:*
¡®T
Tableau 8 II Evolution s¨¦-ologique des animaux intub¨¦s du deuxi¨¨me lot
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
I
16
24
31
38
45
52
l/lO
l
1/160 , L.P.B* 1
1
a
+
I
j 1/80 f 1/80
L.P.3.j
I
I
/
+
I
I
710
m
1/20
L.P.B.
lb30
+
721
115
1/20
1/80
1/320
1/160
1/160
L.P.B.
+
I
<
8
L
!
1/20
1/80
1/160
L.P.B,
.
+
1/40
1/160
11'80
1/40
1/10
I/l0
1
1/40
L.P.B.
715
1/5
l/lO
1/20
t
+
,
1
i
1
34
L.P,B.
m.,
1/20
1/x0
+
l
717
L.P.B.
l
I
r,
1/20
1/40
+
1
1.
716
I FD ( 115 1 l/5
1/40
L.P.B.
+
711
CI
1/20
1/80
+ 1
I
I
7-18
1
7.. 1 1/5 1 1/40
L.P.B.
1/160
+
L.P.B.
+
: mort avec l¨¦sions p¨¦ripneumoniques
M CO
2
l------
I
Ii PI Pi
f
-
--
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+
l--.-l-
-
-
l-7 Pl. P; -
1
*
+
.
-
l-i D-I- 4 - I
6
+
1¡± a k
19
20
Sur 27 bovins infect¨¦s par voie endobronchique, 23 ont succomb6
en pr¨¦sentant ¨¤ l'autopsie des lissions p¨¦ripneumoniques et 4 ont ¨¦t¨¦ sacrifi¨¦s
en fin d'exp¨¦rience, Le maximum des mortalit¨¦s d ?es ¨¤ la maladie exp¨¦rimen-
tale se situe vers le 20¨¨me jour qui suit l'intubation, Chez les survivants,
la pr¨¦sence de s¨¦questres encapsul¨¦s a ¨¦t¨¦ constatee chez 2 sujets (76 et
724). Le poumon ¨¦tait totalement indemne chez les deux autres (13 et 36).
Le 36 fixait le complemcnt & un taux ¨¦lev¨¦9 de plus l'antig¨¨ne circulant a
¨¦t¨¦ d¨¦cel¨¦ entre le 35¨¨me et le 75¨¨me jour. Ces deux animaux s¨¦rologiquement
n¨¦gatifs au d¨¦part pr~sentnient une immunit¨¦ certaine. Dans ce cas, l'¨¦volw
tion s&ologique ne semble traduire que la r¨¦action de l'organisme ¨¤ l'intro=
duction d'une substance altig¨¨nique ¨¦trang¨¨re en quantit ? importante.
L'¨¦volution s&ologique fait l'objet des tableaux 10 et 11. (D¨¦-
tiation du compl¨¦ment, recherche de l'antigene circulant).
Sur 15 t¨¦moins, 11 sont morts de p¨¦ripneumonie bovine entre le
35smc et 63eme jour qui suivirent la mise en contact, Les 4 survivants ont
¨¦t¨¦ sacrifi¨¦s au 95¨¨me jour, 3 (43, 38 et 40) montraient des s¨¦questres
cncapsul¨¦s, 1 (38) une lgsion ¨¦volutive englobant la totalit¨¦ d'un lobe
pulmonaire.
3 c- Evolution des animaux vaccin¨¦s
cm."3¡®sa-u~~ry.
*-u, ~~j,~l~D~<~~.."~~.Il-.~~l~~.~.~,~.~~
L'¨¦volution s¨¦rologique (d¨¦viation du compl¨¦ment)fait l'objet du
tableau 12,
Sur 15 animaux vaccin¨¦s, 3 (n'9, 42, 93) ont succomb¨¦ en cours d'ex-
p¨¦rience sans que lvexamen post-mortem ne r¨¦v¨¨le la moindre l¨¦sion pulmonaire.
La mort de ces animaux peut s9expl.iquer par le fait que, dans les conditions
difficiles impos¨¦es par le confinement, des diff¨¦rences de taille et de vita==
lit¨¦ emp¨ºchent certains sujets d'atteindre les mangeoires et de s'alimenter
normalement. La cachexie s'installe et la mort survient par ¨¦puisement.
Les 12 bovins vaccin¨¦s survivants ont ¨¦-te sacrifi¨¦s 95 jours apr¨¨s
la mise en contact avec les animaux infectants. Aucun de ces individus ne
prdsentait la moindre atteinte pulmonaire et M.mycoides n'a pu ¨ºtre isol¨¦
d'aucun ganglion trach¨¦e-bronchiquc.
Sur le plan s¨¦rologique, la presque totalitG des animaux vaccin¨¦s
a pr¨¦sent¨¦ une mont¨¦e d'anticorps fixant le compl¨¦ment au cours du contact
avec les animaux infect¨¦s exp¨¦rimentalement et les t¨¦moins en cours d'infec-
tion. Cette ¨¦volution traduit l'existence d'un stimulus antig¨¦nique certain
qui ne vas pas, g&ce ¨¤ l'immunit¨¦ existante, jusqu'au d¨¦veloppement de
l¨¦sion pulmonaire,
0. /.
.
.
M CO
!
1
Il
l
I-
M
-
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I
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0
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I
-
8
I
2 g - i c+ 9
-
2 21
.
.
I
.
,
.
.
Tableau 11 - Evolution shologique des animaux t¨¦moins apr¨¨s la mise en contact
(Antig¨¨ne circulant d¨¦cel¨¦ par pr¨¦cipita-diffusion en bo ?te de P¨¦tri)
Nombre de jours apr¨¨s
la mise en contact
35
42 i 49 i 56
' 63 ' 70
77
U" des animaux
75
Mort
43
-.*
!
38
I
I +
- I
It
-Mort t+t-i-?
1 - 1 + l + 1 Mort 1
!
!
i
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50
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-t l Mort I
Mort
1
z7
I
1 M o r t
l
I
I + l + I + l + 1 +
I Mort I
+
+
Mort
74
l
Mort
+ : apparition de l'antig¨¨ne circulant
,
Fa
.
.
Tableau 12 a Evolution s¨¦rolog;ique des animaux vac&-&s apr¨¨s la
mise en contact (D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
Nombre de jours
apr¨¨s la mise
0
7
14
21
27
35
42
49
56
63
70
77
95
en contact
Na des animaux
25
c"
l/lO l/lO l/lO
l/lO
1/20
l/lO
l/lo
_
II
_
-
Sacrifi¨¦.Pou-
mon indemne
24
1/5
1/5
1/5
l
-
,Y+
Sacrifi¨¦.pou-
mon indemne
n
ZB
l
Mort sans
7
l¨¦sion P.B]
I
t
4 2
115
u5
1/5 :
-
-
Mort sans
I
l¨¦sion P.B
fi-
l
l
i
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1/5
1/5 wo
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,^
I^
. .
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1/40
1/20
l/lO
1/5
1/5 l/lO "'~~~~,~"~
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1/5
115
J-/5
l/lO
-
-
1/5 Sacrifi¨¦.Pou-
-
mon indemne
79
1
-
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l/lO
l/lO
l/lO
-
-
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l
1
1/5 l/lO mon indemne
11 B
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u5
u5
115
115
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-a
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1/5
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_
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-
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1/51 1/20
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l/lO i l/lO
1/5
1/5
_ 1 -
,_
_ _ SacrifiC,Pou-
i
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11
1/5
1/5
115
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-
Sacrifi6,Pou-
82
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mon indemne
1
-
I
_ 1
u5
-
us 1/5 S&rifi¨¦.Pou-
mon indemne
2
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-2
1/5
-
-
Sacrifi¨¦.Pouz
18
-
- mon indemne
*A
B
I
1
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I
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1/5
1/40
1/40
1/80
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93
I
I
I
l-
1
1
[Mort sans I
1
l
1
t
I-
I
l
!
l
l
(l¨¦sion P.B(
1
i
I
I
w
24
CONCLUSION
A la suite doune exp¨¦rience contact r¨¦alis¨¦e 3 mois apr¨¨s la vacci-
nation avec 14 bovins vaccin¨¦s ¨¤ l'aide dsun vaccin lyophilis¨¦ pr¨¦par¨¦ avec
la souche Tl (41¨¨me passage), 3 bovins ont succomb¨¦ pour des raisons ¨¦trang&
res ¨¤ la p6ripneumonie bovine, les 12 survivants, sacrifigs 95 jours apr¨¨s
le d¨¦but de la mise en contact, ont pr¨¦sent& ¨¤ 19autopsie un appareil pulrno-
l
naire indemne de toute atteinte p¨¦ripneumonique. Ce r¨¦sultat a ¨¦t6 observ¨¦
¨¤ la fois chez des anirraux qui avaient offert une r¨¦action locale post-vacci-
nale au point d9inoculation et chez des individus o¨´ aucune r¨¦action locale
n'avait ¨¦t¨¦ enregistr¨¦e.
Cette exp¨¦rience souligne la valeur de l'immunit¨¦ d¨¦velopp¨¦e ¨¤ la
suite de la vaccination ¨¤ l'aide de la souche Tl (j+k?me passage)*
c
25
BIBLIOGRAPHIE
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conference of the JP/lT/phase IV Rinderpest Campaign == Na ?robi
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bovine au Laboratoire de Recherches v¨¦tkrinaires de Farcha,
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perts FAO/OIE/OAU sur la p¨¦ripneumonie bovine, 12-=15 f¨¦vrier 1967.
.
VALEUR DE L'IM&lUJ!~ITE COIWEREE PAR DEUX VACCINS
ii ¡°¡¯
tr
LYOPHILISES PREPARES A LPAIDE DES SOUCHES KH?J ET Tl
par M.P.DOUTRE
f
. *
A la suite des recommandations de la Conf¨¦rence des Experts de la
p¨¦ripneumonie bovine tenue 8 Khartoum en f¨¦vrier 1967 et des possibilit¨¦s
de mise au point de campagnes inter--¨¦tats de vaccination contre cette maladie,
le service de bact¨¦riologie du Laboratoire national de I'Elevage et de Recher-
ches v¨¦t¨¦rinaires du S¨¦n¨¦gal a men¨¦ au cours des ann¨¦es 1967 et 1968 deux
exp¨¦riences destin¨¦es ?i appr¨¦cier la valeur de lPimmunit~ que conf¨¦raient
deux vaccins lyophilis¨¦s pr¨¦par¨¦s ¨¤ partir des souches KHsJ (86¨¨me passage)
et Tl (44¨¨me passage). Les bovins utilis¨¦s aupartenaient a la race XDama,
race bovine africaine , particuli¨¨rement sensible ¨¤ la p¨¦ripneumonie. LPespace
disponible ne permettant pas de mener en m&ae temps les deux tests, ces der-
a
niers se sont d¨¦roul¨¦s de la fa ?on suivante :
4
3
- l'exp¨¦rience contact yKR3J a eu lieu d¨¨s la fin de la saison des pluies 1967,
- celle effectu¨¦e avec des animaux vaccin¨¦s avec T13 d¨¨s la fin de l'hivernage
1968.
Ces p¨¦riodes ont ¨¦t& choisies de fa ?on ¨¤ faciliter lvalimentation
en vert des bovins maintenus en stabulation &roite.
/ VALEUR DE LvIMMUNITE CONFEREE PAR LA SOUCHE KH3J /
A - VACCIN UTILISE
5
Il r¨¦sulte de la lyophilisation dPun m¨¦lange a volume ¨¦gal dlunc
culture de Mycoplasma mycoides souche KH3J et de mist dessicans (*)v
La composition du milieu de culture rdsulte des travaux effectu¨¦s au
Laboratoire de Fort-=Lamy (milieu F 66, rapport pr¨¦sent6 ¨¤ la 3¨¨me R¨¦union des
Experts sur la p¨¦ripneumonie bovine FAO/OIE/OAU, tenue ¨¤ Khartoum en f¨¦vrier
1967) et de ceux des chercheurs australiens du CSIRO,
Quelques modifications ont ¨¦t¨¦ apport&s, elles portent sur la
suppression de _1 'acide palmitique uratiquemment insoluble m¨ºme dans une SO-~
lution de soude 0,l M et sur la pr¨¦paration et la quantit¨¦ d'extrait frais
de levure ajout¨¦.
- mac¨¦ration de coeur : on provoque la makration pendant une heure de 500 g
de hachis de coeur de boeuf degraisse dans un litre d'eau ¨¤ 50¡ãC, puis on
porte ¨¤ ¨¦bullition. Filtration ¨¤ chaud sur papier filtre. On ajoute par
litre : 10 g de tryptose (Difco), 2 g de glucose et 2,5 g de phosphate
disodique. On chauffe ¨¤ 80¡ãC, filtration ¨¤ chaud.
- addition de :
. glyc¨¦rol . ..¡°c..~.rJ*..**.e.o~..*.*..**
0,3 gllitre
0 acide ol¨¦ique....OI......O...........
15 mg
0 extrait frais de levuremO.OOC.DO.OO.e. 100 ml
. s¨¦rum de cheval d¨¦compl¨¦ment¨¦,....,.., 100 ml
0 p ?nicilline .,...**,~*...~~..d~0~"~..~.
1.000.000 unit¨¦s
Le pH est amen¨¦ 2 8,l avec une solution de soude 10 M. Lgacide
oldique est m&lang6 a 5 ml de soude 0,l Mg le gel fort& est dissous par
agitation magnGtique.
5
.
/
.
6e
*
?:
(+) Actuellement, seul le lait ¨¦cr¨¦m¨¦ sec est utilis¨¦ comme support de lyo-
philisation dans la pr6paration des vaccins lyophilis¨¦s contre la p¨¦ri-
pneumonie bovine.
w
3
- extrait de levure : l'extrait de levure prgpar¨¦ extemporan¨¦ment pr¨¦sente
des qualit¨¦s supgrieures aux produits correspondants que l'on trouve dans
le commerce o La technique de pr¨¦paration retenue est la suivante :
(1.E.M.V.T. .- laboratoire de microbiologie)
0 mettre en suspension homog¨¨ne 1 kg,de levure fra ?che de bo¨¹lan-
gerie dans un litre dveau distill¨¦e en pr¨¦sence de 8 ml de
chloroforme
. laisser au bain-marie 24 heures ¨¤ 5O'C en agitant de temps en
temps, centrifuger et recueillir un premier surnageant que lgon
conserve au froid
. reprendre les culots dans un litre d'eau distill6e et les soumettre
& quatre cycles gel-d¨¦gel
. centrifuger ¨¤ nouveau et recueillir le deuxi¨¨me surnageant
. melanger les deux surnageants
. filtrer sur filtre Seitz EKS 1, conservation a -2O'C.
Pour la pr¨¦paration du vaccin, on utilise une culture de 72 heures.
Au cours des derni¨¨res 24 heures, les ballons sont port¨¦s sur agitateur magn¨¦.-
tique.
La r¨¦partition se fait sous un volume de 5 ml par flacon type p¨¦ni-
cilline de 20 ml.
Au moment de l'emploi, le contenu de chaque flacon est reconstitu¨¦
avec 20 ml dgeau distill6e st6rile froide (20 doses vaccinales). Dans ces
conditions, le titrage des vaccins par la m¨¦thode des dilutions donne un
minimum de 109 unit& viables par ml. Ce titre est ¨¦gal ou sup¨¦rieur ¨¤ celui
des meilleurs lots de vaccin-culture mesur¨¦ au moment de leur conditionnement.
B =* TEST D'INMUNITE
a/-, Principe de la m¨¦thode
Les animaux vacci&s ont et6 ¨¦prouv6s en utilisant la methode de
mise en contact etroit d¨¦crite par les auteurs australiens. Cette technique
consiste ¨¤ mettre en pr¨¦sence,¨¤ans une enceinte close ¨¤e volume restreint,
un lot d'animaux vaccin&, un lot dPanimau.x temoins non vaccin¨¦s et un lot
de bovins infect¨¦s exp6rimentalement par voie endobronchique. Pour que lvex-
p¨¦rience soit concluante, dans lfabsolu, il convient qu'en fin d'exp&iencc
les bovins intub¨¦s et les t¨¦moins non vaccin& succombent de p¨¦ripneumonie
alors que les animaux vaccines r¨¦sistent,
4
bj- B ?timent
En tenant compte des dimensions relatives du b ?timent construit
par les chercheurs australiens du CSIRO, une ¨ªStable a ¨¦t¨¦ sp¨¦cialement am¨¦-
nag¨¦e ¨¤ Sangalkam pour rgaliser les 6preuves d?immunit¨¦ par la m¨¦thode de
contact,
Dimensions : longueur..... 10 m
largew.,.... 5 m
hauteur,..... 3 m,
Pour assurer l'alimentation des animaux, deux mangeoires de 5 m de
long sont plac¨¦es de chaque c ?tS. Le foin stock¨¦ sur le faux-plafond en planches
est directement amen¨¦ dans les mangeoires gr ?ce ¨¤ des trappes <amenag¨¦es ¨¤.
cet effet.
L'a¨¦ration est assu&e par 7 ouvertures de 1 m x 0,50 m situ¨¦es
¨¤ 2,35 m du sol.
A l'ext¨¦rieur, WI parc de 120 m2 pourvu d'un abreuvoir permet de
recevoir les animaux chaque matin pendant environ une demi-heure. Une fois
par semaine, lors des prises de sang, ce temps est prolong de deux ¨¤ trois
heures.
c/- Protocole exp¨¦rimental
Tous les bovins utilis¨¦s appartiennent 5 la race NDama.
Au jour Jo9 11 bovins sont vaccin& par voie sous-cutanee, & la
c ?te, avec 1 ml de vaccin KH3J lyophilis¨¦ reconstitu¨¦ avec de l'eau distill¨¦e
sterile rafr&hie (If* des animaux : 0001 I.~ 0002 == 0003 .. 0883 Ca 1505 p., 0885 -
1519 La 0871. .., 0887 - 0900 '.* 0896).
Le titre du vaccin est compris entre 10' et 1010 unit& viables
par ml (titrage par la methode des dilutions pasteuriennes).
Au jaur JQ + 14, 11 bovins sont inocul¨¦s par voie endobronchique
(NO de s animaux : Gd77 = 0872 aa 0889 I-p 0874 - 0875 -= 0882 =. 0881 -- 0873 -=
0894 - 0892 - o899L
Inoculum : apr¨¨s anesth¨¦sie au chloral intraveineux, chaque animal
re ?oit une injection intra-trach¨¦ale administrge ¨¤ la sonde, suivant la tech-
nique classique, de 20 ml d'un mglange ¨¤ parties ¨¦gales de :
. broyat de l¨¦sions pulmonaires p¨¦ripneumoniques,
D lymphe p6ripneumonique,
. bouillon coeur s¨¦rum (milieu F 66 modifi¨¦),
5
Les lEsions pulmonaires et la lmphe p¨¦ripneumonique sont r&olt6es
15 jours auparavant sur un malade au dernier stade de la maladie, sacrifik
sur le terrain, sur notre demande (Nioro-dw:Rip),
et conserv¨¦es jusqupau
moment de l'emploi ¨¤ -2O'C.
Un isolement de.M.mycoides ¨¤ partir des l¨¦sions pulmonaires et de
la lymphe est effectug au moment de la pr¨¦paration de l'inoculum pour confir-
mer la qualit du mat¨¦riel utilis6.
3 ¡®= Mise en contact ¨¦troit des trois lots d'animaux (vaccin&s
"7""r-=~----Y""~-rr,-~~~,~~~-=~,-~~~~.
,,,,,,,,,,,.,,,,,,,,,,,.,,;.,,~
temolns non vaccines Intubes
,~~~~~=-~~~~.J-.--,-"-"*-,9,,,,,,,,
Au jour JC + 28, les animaux vaccines et les animaux infectants
sont group¨¦s dans l'&able am¨¦na&e ¨¤ cet effet, en presence de llbovins
t&oins.(M" des t¨¦moins : 1536 - 1501. - 898 $= 1576 - 893 - 1542 =. 884 1%a 1523 -
890 - 1530 (3 895).
d/- Evolution des animaux
Les observations s'arr¨ºtent au jour JC + 100.
1 - Evolution des animaux infectants
-">---L;I~-r-u~I---~~~--~~~,-~~~~.,~~~~~-~,~
La r¨¦action ¨¤ l'infection intrav,trach6ale a ¨¦t¨¦ suivie sur les
plans thermique 3 clinique et s¨¦rologique (d6viation du compl¨¦ment),
Evolution thermique
Les temp&atures du @me au 36¨¨me jour ont 6t¨¦ reproduites d¡®ans
le tableau 1 :
Sur 11 animaux intub¨¦s :
- 7 ont pr¨¦sent6 une ¨¦l¨¦vation thermique significative (temp¨¦rature sup&ieure
¨¤ 40Oc (no0899 -a 0892 r- 0873 -a 0882 -1 0874 C=l 0889 .- 0877)o
Parmi ces animaux, on peut distinguer 5 bovins ayant manifest¨¦ une r¨¦action
pr¨¦coce (6, 7, 8) g¨¨me jour) (no0899 -' 0892 .-- 0873 s9 0882 - 0877) et deux
une r¨¦action tardive (18¨¨me jour).
Sur ces 7 bovins, 6 sont morts en cours d'expkience en offrant ¨¤ lgautopsie
des l¨¦sions caract¨¦ristiques, le 7¨¨me (0877) a ¨¦tt sacrifi¨¦ en fin dOcxp&-
rience; des l¨¦sions p¨¦ripneumoniques pulmonaires, Xycoplasma mycoides a
¨º-t¨¦ isoll,
- 4 n'ont pas manifest¨¦ dP¨¦l¨¦vation de temp¨¦rature ccract&istique
(tJOO894 -
0881 - 0875 == 0872)~ Trois de ces bovins sont morts en cours d'exp¨¦rience
(no0875 va 0881 - 0872), seuls les no0872 et 0881 pr¨¦sentent des l¨¦sions
p¨¦ripneumoniques,
Le bovin 0894 sacrifi¨¦ en fin d'exp¨¦rience nFoffre
aucune Gsion.
En conclusion, sur 11 bovins intubes, 9 ont contra& la p¨¦ripneu-
monie et 2 animaux nIont pas r6agi 2 l'intubation (no0875 r= 0804), On peut
?galement supposer que cette op¨¦ration ait Etd mal ex¨¦cutk, ce qui est peu
probable.
-.
Tableau 1 - Evolution de la temp¨¦rature chez les animaux infectants
---T-l-I
Nombre de jours
'
apr¨¨s d¨¦but de
JO+18 Jo+ly/JO+20~Jo+21~Jo+22
,~~+26 ~~+27 Jo+28 JO+29 3 +32 J +35 J +42 J +& J 950
l'exp¨¦rience
1
l
??Ombre de jours
12
13
14 1.5
4
9
10
11
apr¨¨s intubation
1415 l6 l7 la
1
1 39,2/ 38,71 3961 3921 398 40,2i 4091 3?,7 40,2 40~3 40,2 40,2
l
0892
39,2
3997
3938 j 40,5
40,7
40,9/ 4027
40,5
40 ,I 40,7
40,L +
l¨¦sions
-
-
0894
38,7
38,5
38,21 3a,6
3a91
38,4
38,6
3a,3
383
38,3
30,5 38,6 3
9
j 38.2/ 36~1 3~41
1 38,51 39,2l 39361 40 t 40
39,7
40,5
4057
40
40,2f 40,5 40,3
38251 * [
lesions
I
I
I
f 3921 38,51 3%,5/ 39,1/ 3992
39,4
39,4
3936
3923
39,a 39,4
3%,61 39 1 + f l¨¦sions
39,3
--
l
1
!
I
38,Zl 38,2j 38,8[ 40,5/ 3939
40,9
40,a 40~3
4039
4OJ 41,l 41-z
40,8i 3
9
j 33,11 39931
I
0875
1 3%,5/ 3894 3%,5 3835) 3832 38,3 39,31 38,% 3932 3999 3937 3995 3g,81 + 1 <ibsence Iksion
38,5
3%,4
38,5
38,5
38,2 38,3 39,3 38,8 3932 39.;9
0874
-i-
39,7
39,5 41 1 40,21 39,9/+ l¨¦sions
38,1! 39
39,21 38,7
38,2
39,3
38
383%
3896
39
38,7 382 3F!4u,6j
0889
I
l
37d 373% 3% 1 37,y 37,7 3%,5 38,2 37,7
0872
I
I
37,%
3732
37,7 37,9
3K7 3735 78,4 37,8
I
3737
38
39,2
39,2/ 3%,7
40,l
40
40,6
40,2
40
40,5 40
0877
39,l 38,2
-t
38 38
/
La mort d'un animal est indiqu¨¦e par le signe +
Remarque : Chez tous les animaux morts de peripneumonie, les 16sions
pulmonaires sont des plus typiques (h¨¦patisation englobant parfois la tota-
lit¨¦ dPun poumon avec scl¨¦rose intersticielle), Toutefois, jamais n'apparazt
l'¨¦panchement pleur¨¦tique important que l'on observe si souvent dans la mala-
die naturelle,
Evolution s¨¦rologique
La d¨¦viation du compl¨¦ment a ¨¦t¨¦ effectu¨¦e par la m¨¦thode de
Kolmer avec fixation d7une nuit ¨¤ 4'C.
Le r¨¦sultat des diffgrents titrages a ¨¦t¨¦ reproduit dans le ta-
bleau 2. Seules les r¨¦actions ++++ sont mentionn¨¦es,
Sur 11 animaux intub¨¦s, 9 ont r¨¦agi s¨¦rologiquement. Les no0872
et 0894 sont n¨¦gatifs, toutefois le 0872 succombe en pr¨¦sentant des l¨¦sions
de p¨¦ripneumonie (po ssibilit¨¦ d'une hypoga3nmaglobulin6mie).
.-
Le 0894, sacrif%
en fin d'exp¨¦rience, est indemne de p¨¦ripneumonie. Four cet animal, il est
possible d'envisager soit quoi1 n'ait pas r¨¦agi ¨¤ Ilinfection intra--trachGale,
soit que lrop¨¦ration ait ¨¦t¨¦ mal effectu¨¦e (sonde introduite dans l'oesophage),
Pour le nOo875, mort avec absence de l&ion pulmonaire, sans jamais avoir pr&
sent6 de pouss¨¦e thermique, 1"errour de manipulation est ¨¤ ¨¦carter, car 14 jours
aprk l'intubation, cet animal fixe le compl¨ºment au 11320.
Pour ce bovin, tout semble s'¨ºtre passe comme si l'intubation avait
¨¦t¨¦ effectu¨¦e avec une culture en bouillon d'une souche virulente de M.myc~i;~
des. Dans ce cas, on observe une mont¨¦e r¨¦guli¨¨re dPanticorps sans trace de
l¨¦sion pulmonaire ? lPautopsie. La r¨¦action s¨¦rologique semble seulement re--
fl¨¦ter la phagocytose de substances ¨¦trang¨¨res introduites dans l'appareil
pulmonaire.
Evolution clinique
La presque totalit¨¦ des animaux ¨¤ s¨¦rologie positive pr¨¦sente de la
toux le matin au moment de l'abreuvement. Le phenom?ne est apparu chez les
premiers bovins, 10 jours apr¨¨s l'intubation.
Evolution thermique et s¨¦rologique
Pour les bovins t6moins, la courbe de temp¨¦rature se superpose 5
lP¨¦l¨¦vation des taux des anticorps fixant le compl¨¦ment. Aussi, seule lq¨¦vo-
lution s¨¦rologique des animaux t¨¦moins figure-t-elle dans le tableau 3.
.
0. /.
.
8
.
Pi . Ii+ l-i
ml
5
CU
c
.
9
Tableau 3 y= Evolution shologique des ani ?na,ux t¨¦moins
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmcr)
!
Nombre de jours
apr¨¨s d¨¦but
JO+42
JO+59
JO+71
JO+75
~0+82
JO@9
JO+95
exp¨¦rience
Nombre de jours
~apr¨¨s mise en
1.4
31
43
47
54
61
67
contact
1536
.:a
.Y
1/20
lb30
L+B
1501
ca
L.f.B
0898
'
m
abshce
l
L.PA3.j
1576
Le"
1/10
1/160
1/320
1/320
1/640
LAI?
0893
I-2
abs&ce
L.P.9
1542
.a
I...,
1/160
1/640
L3.B
0884
..A
a.bsCnce
L.P,B
1523
L?I
Y
1/320
1/640
1/640
1/640
1/640
+
L,P,B,
0890
l/lO
l/lO
1/160
+
L.P.B
1530
u5
115
1/40
1/320
+
L.POB
0895
+
absence
L.P.B
1 0
Sur 11 animaux t¨ºmoins :
y 7 sont morts naturellement en offrant ¨¤ lvautopsie des l¨ºsions peripnew
moniques d'oii M.rqycoides est isol¨¦. Sur ces 7 bovins, un seul (1.501) n'a
pas pr¨ºsent¨º une mont¨¦e appr¨¦ciable des anticorps fixant le compl¨¦ment
(mort excessivement rapide 33 jours apr¨¨s la mise en contact ou hypogammaL-
globulin¨ºmie). Les 6 autres traduisent s¨¦rologiquement l'infection entre
35 et 40 jours apr¨ºs la mise en contact avec les bovins infectants.
- 4 sont morts naturellement, tr¨¨s rapidement, sans pr¨¦senter la moindre
l¨¦sion n¨¦cropsique d ?e ¨¤ la p¨¦ripneumonie. La disparition de ces animaux
est cons¨¦cutive aux conditions particuli¨¨rement s¨¦v¨¨res du stress qu'impose
le confinement. Ces accidents proviennent du fait qu'¨¤ l'achat les animaux
ne sont pas homog¨¨nes et que les sujets plus petits, plus faibles, ne
peuvent s"alimenter convenablement. Ecart¨¦s des mangeoires, ils se couchent
et succombent apr¨¨s avoir ¨ºt¨¦ pi¨¦tin¨¦s,
.
Evolution s¨ºrologique apr¨¨s la vaccination
La vaccination avec KH J n'entra ?ne aucune montee post-vaccinale
des anticorps fixant le compl¨ºme t.
a
.
Evolution s¨¦rologique apr¨¨s la mise en contact
Les r¨¦sultats figurent dans le tableau 4.
r
*
4
.
1
.*
¡®
.4
.
Tableau 4 CR Evolution s¨¦rologique des animaux vaccin¨¦s apr¨¨s la mise en contact
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
Sombre de jours apr¨¨S
Jo+59' Jo+71
Jo+-?+ ~~+82
d¨¦but exphience
5*+28
Jo+42
I
5,+89
J,+95
I
I
l
1
Hombre de jours apr¨¨s
mise en contact
0
14
31
1
113
IL7
r-1.
labs ncel
0871
8
L. .B
-
1519
--
-.
abs % nce
L. .B
0885
1/40
abs nce
i
I
..a
"l" L g B
.A.
0883
s?.
abs nce
ci.2
L. i3 .B
0887
l/lC
115
u5
l/lO
l/lO
abs nce
%
L. .B
-
0002
.z*
=Ca
1
1/20
L.8.B
0001
x
115
1/5
l/lO
l/lO
l/lO
l/lO
l/lO
sacrifi¨¦
L.P.B.
0900
c.m
1/20
-
1/10
l/lO
l/lO
1/20
l/lO
sacrifi6
aucune L.P,B,
1505
1/10
-
us
1-/5
l/lO
1/20
1/40
sacrifi¨¦
aucune L.P.B,
0003
FS
1/5
1/5
l/lO
l/lO
l/lO
sacrifi6
aucune L.P.3,
0896
7..
sacrifi¨¦
l/lfSO
1/80
1/160
1/80
l/%O
1/80
1/160
aucune L.P.B.
visible
-
1 2
Sur 11 bovins vaccin¨¦s en vue de realiser l'exp¨¦rience :
1 meurt le jour de la mise en contact (nO0871) sans pr¨¦senter la moindre
atteinte de pkipneumonie,
5 succombent naturellement dans des temps variables, 4 n'offrent aucune
l¨¦sion pkipneumonique
(1519, 0885, 0883, 0887); par contre, le no0002
pr¨¦sente, 34 jours apr¨¨s la mise en contact, un s¨¦questre p¨¦ripneumonique
d'o¨´ M,mycoides est isol¨¦.
5 sont sacrif& en fin d'exp¨¦rience : sur ces 5 bovins, 4 &v¨¨lent a
l'autopsie des poumons indemnes de p¨¦ripneumonic (n'0900, 1505, 0003, 0896);
le s¨¦rum du bovin 0896 fixe le compl¨¦ment 8 un taux Qev¨¦ (1/160), sans
qu'aucune l¨¦sion ne puisse ¨ºtre d¨¦cel¨¦e, Par contre, le no0001 montre deux
s¨¦questres p&ipneumoniques
dPoU M.mycoides est isol¨¦ par culture,
En conclusion, la vaccination avec le vaccin KH3J lyophilis~ a donc
. .
apparemment favorise la cr¨¦ation de deux bovins porteurs chroniques sur
11 animaux vaccin¨¦s un mois avant la mise en contact avec les sujets infec-
tants.
CONCLUSIONS
L'exp&ience contact destinee a
' *
apprecier la valeur de lgimmunit¨¦
conf¨¦r¨¦e par un vaccin lyophilise pr¨¦pare & partir de la souche KH3J un mois
apr¨¨s la vaccination montre :
l/,-, quvunc immunite certaine s'est d¨¦velopp& chez les sujets vaccin¨¦s,
7 temoins morts de p&ipneumonie pr¨¦sentent des l¨¦sions volumineuses
des $~US caract¨¦ristiques, Aucun vaccin6 n'offre des ldsions d'une telle
importance.
2/- que cette immunit¨¦ est loin d'¨ºtre totale, 2 bovins pr¨¦sentent ¨¤ l'autop=-
sie effectu¨¦e, soit apr¨¨s la mort naturelle, soit apr¨¨s abattage, des
s¨¦questres de la grosseur d'une pomme d'o¨´ M.mycoides est isolee par
culture. Au contact d'animaux infectants, d&x animaux porteurs chroni-
ques ont ainsi ¨¦tG cr¨¦¨¦s.
3/- que seules des vaccinations r¨¦p&$es au moins tous les 5 mois, pendant
plusieurs ann¨¦es, sur la quasi totalit¨¦ du troupeau peuvent entra ?ner
une r¨¦gression de la maladie.
13
/ VALEUR DE LsIMMU!?ITE CONFEREE PAR LA SOUCHE T, /
A- VACCIN UTILISE
Il r¨¦sulte de la lyoph ?lisation dvun m¨¦lange & volume ¨¦gal d'une
culture de Mycoplasma mycoides, souche Tl, et de mist dessicans, Le milieu
utilis6 pour la culture est celui d&r ?t pr¨¦c¨¦demment (F 66 modifi¨¦),
Le vaccin reconstitu6 au moment de l'emploi titre un peu plus
de 10g unit¨¦s viables par dose vaccinale (1 ml),
B- TEST DPIMMJNITE
.
a/- B ?timent
Afin de pouvoir mener lvexp¨ºrimentation sur un nombre plus ¨¦lev¨¦
d'animaux, la superficie du b ?timent ainsi que le nombre des mangeoires ont
¨¦t¨¦ doubl¨¦s :
longueur,.,., 10 m
largeur...... 10 m
Hauteur...... 3 m.
b/- Protocole exp&?imental
Tous les bovins utilis¨¦s appartiennent comme pr¨¦c¨¦demment 2 la
race NDama. Achet¨¦s au S¨¦n¨¦gal Oriental, ils sont garantis par le vendeur
comme non-vaccin¨¦s.
Le but de l'exp¨¦rience consiste ¨¤ appr¨¦cier la valeur de l'irnmu-
nit¨º que pr¨¦sentent des animaux vaccin¨¦s avec le vaccin Tl lyophilis¨º 3 mois,
7 mois et 12 mois apr¨¨s la vaccination. 50 bovins ont donc ¨¦t¨¦ vaccin¨¦s et
conserv¨¦s ¨¤ !a ferme de Sangalkam. Ils ont ¨¦t¨¦ r¨¦partis en trois lots utili-
sables respectivement 3, 7 et 12 mois apr¨¨s la vaccination. Seule la premi¨¨re
phase de l'exp¨¦rience (valeur de l'immunit¨¦ 3 mois apr¨¨s la vaccination)
fait l'objet de la description et des conclusions qui suivent :
c
.
Les 15 bovins vaccines utilis¨¦s lors de l'exp¨¦rience contact
groupent 7 animaux qui n'ont pas prdsent¨¦ de r¨¦action locale post-vaccinale
au point dPinoculation (n025, 24, 9, 42, 83, 10, 79) et 8 bovins qui offri-
rent une r¨¦action locale ne d¨¦passant pas la taille de la main (ntl B, 80,
go, 11, 82, 2, 18 B, 93).
L'&olution s¨¦rologique post-vaccinale de ces 15 animaux figure
dans le tableau 5 (deviation du compl¨¦ment Kolmer).
*. / . .
14
Tableau 5 - S¨¦rologie post-vaccinale des animaux vaccin¨¦s
avec T1 avant la mise en contact
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
No des animaux
Vaccination J +l?
JO
0 +
Jo+20
JO+28
JO+41
R¨¦action locale au
point d'inoculation
25
1/5
1/40
1/160
1/80
24
ca
u5
1/40
1/40
1/20
I>
9
sa
I
-7
42
l/lO
1/10
Il20
1/10
a3
il
CI
_I
10
-2
1110
l/lO
-
'=
I
79
.x
1/5
1120
l/lO
1/5
11 B
e.'
1/5
1/10
1/10
1/5
++f (taille d e la
main)
a0
D
l/lO
aia0
1/160
1/320
+-t-k
l
90
l/lO
1/40
1/160
1/160
+++
11
-3
l/lO
1140
1180
1/20
-l-4-+
a2
"3
1110
i/40
l/lO
l/lO ++
l
2
i-
1/5
1/5
1/5
.-:,
++
18 B
I
l/lO 1 1/20
l/lO
+++
93
-s
115
1110
1/5
-=
+++
. ./ . .
15
Sur 15 animaux vaccin¨¦s, 13 ont montr¨¦ une r¨¦action s¨¦rologique
posi+vaccinalc dqintensit¨¦ variable selon les sujets, proportionnelle ¨¤
l'importance de la r¨¦action locale, Toutefois, le no25 qui riva pr¨¦sent¨¦ aucune
r¨¦action locale, fixe le compl6ment au 1/160, 28 jours apr¨¨s la vaccination.
2 ~1 Intubation des animaux destin& & devenir infectants
Y_. lIus.al dMO .m,.m 1.11S.7.C *Lil..?l*-Tr > s.r9L:,..~nlO"L- . ..III.IIP_U___NI..__.~--~~~~,~~~~~~~~,-,
L'inoculation intra-trach¨¦ale de la suspension infectante est
effectu¨¦e comme pr¨¦c¨¦demment.
Deux lots d'animaux ont ¨¦t¨¦ successivement rendus infectants, En
effet, la mortalit¨¦ tr¨¨s rapide des animaux du premier lot a fait craindre
la possibilit¨¦ d'une mauvaise contamination des t¨¦moins et des vaccin¨¦s. Un
second lot de bovins infectants a donc ¨¦t¨¦ pr¨¦par¨¦. Ces animaux ont ¨¦t¨º
introduits 21 jours apr¨¨s le d¨¦but de la mise en contact, il ne restait alors
plus que trois bovins infectants survivants du premier lot.
(13, 88, 3 2 , 4 4 , 3 6 , 2 9 , 14
No des bovins infectants du ler lot (15 bovins) (26, 5 6 , 23, 57, 15, 1 8 , 7 6 ,
(95
No d e s bovins infectants du 2Gme lot (12 bovins) (702, 709, 710, 721, 722, 724,
(715, 34, 717, 716, 711, 718
Trois mois apr¨¨s la vaccination, 15 bovins vaccin¨¦s ont ¨¦t¨¦ group¨¦s
avec 1 5 bovins infectants
(ler lot) en pr¨¦sence de 15 t¨¦moins (n0759 43, 38,
40, 2 2 , 31, 50, 3, 63 B, 41, 5 B, 4, 91, 20, 74). Le deuxi¨¨me lot de bovins
infectants a ¨¦t6 introduit dans l'¨¦table exp¨¦rimentale 21 jours apr¨¨s le d¨¦but
de la mise en contact.
c/- Evolution des animaux
Les observations s"arr¨ºtent 94 jours apr¨¨s le d¨¦but de la mise en
contact.
1 ca Evolution des animaux infectants
wm.L:r ~__-:_/..~-'_.-~r~Y.~~~~-~.~~~~~,~~~~.,,~~,
.li t.:z
Seule lv¨¦volution s¨ºrologique est rapport¨¦e dans les tableaux qui
suivent. Le devenir des anticorps fixant le compl¨¦ment a ¨ºt¨¦ suivi par la
m¨¦thode de Kolmer. La recherche de l'antig¨¨ne circulant a ¨¦t¨¦ effectu¨¦e par
pr¨ºcipito-diffusion en bo ?te de P¨¦tri (g¨ºlosc noble ¨¤ 1 p.100 dissoute dans
un tampon v¨¦ronal ¨¤ pH 7,3 - 7,4, merthiolat¨¦ ¨¤ 0,04 p.100).
Les r¨¦sultats obtenus figurent dans les tableaux 6, 7, 8 et 9
(ler et P¨¨me lot d'animaux infectants). En mati¨¨re de dhiation du compl¨¦ment,
seules les r¨¦actions ++++ ont ¨¦-te retenues,
.
/
.
0.
L
.
.¡±
<¡±
Tableau 6 .- Evolution s¨¦rologique des animaux intub¨¦s du premier lot
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
1
I
I
I
1
1
I
I
Nombre de jours aprh 7
-rl
l?intubation
13 21
28 j 35 1 41 1 49 ) 56 ) 63 1 70 ] 77 / 84 1 91 1
No des animaux
I
I
13
1/160
1/80
1/40
1/40
1/40
1/x0 l/ao 1/5 1/5 m Sacrifi¨¦.Absence'
1/10 1/320 1/320
l¨¦sion p&.-ipn.
/
/
L+B
1
1/20 1/160 1/320
88
I
!
I
t--
L,P,B
3 2
1/40
t
44
L.P,B
I
-
1/320 +
I
I
I
36
1/5 1/80 1/320 1/640 1/320
1/80
1/80
1/80
1,'40
1,'20
1/20
1/20
1/201~;~~~~i;~+&s~ce *
-
L.P.B
29
1/80
+
-
14
1/5
1/40 L*y*B
v-
26
'L.P.B
1/80
+
-
56
1/40 f LeP*B
+
23
L.P.B
J-/40
+
57
L.P.B
1/320 +
15
1,'5 1/80 1/160 L,P.B
+
18
L.P.B
1/80 +
I
I
I
I
76
cs.
x/80 1/160 2&,20 1/160 l/lG;O
1/80
1/40
1/40
1/40
1/20
1,'20
1/20(S:crifi¨¦-
Gros
iSecpeStre p¨¦rip.
f
I
I
35
I
1/10 1/160 Ln+PaB
L.P.B.
+ : mort avec l¨¦sions p¨¦ripneumoniques
R
f
--
I
1
L
D
6
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--
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I
P
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1
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i
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--
i
i-
9
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-
-
-
-
1
-
/-
I
3
17
<
.
I
:*
¡®T
Tableau 8 II Evolution s¨¦-ologique des animaux intub¨¦s du deuxi¨¨me lot
(D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
I
16
24
31
38
45
52
l/lO
l
1/160 , L.P.B* 1
1
a
+
I
j 1/80 f 1/80
L.P.3.j
I
I
/
+
I
I
710
m
1/20
L.P.B.
lb30
+
721
115
1/20
1/80
1/320
1/160
1/160
L.P.B.
+
I
<
8
L
!
1/20
1/80
1/160
L.P.B,
.
+
1/40
1/160
11'80
1/40
1/10
I/l0
1
1/40
L.P.B.
715
1/5
l/lO
1/20
t
+
,
1
i
1
34
L.P,B.
m.,
1/20
1/x0
+
l
717
L.P.B.
l
I
r,
1/20
1/40
+
1
1.
716
I FD ( 115 1 l/5
1/40
L.P.B.
+
711
CI
1/20
1/80
+ 1
I
I
7-18
1
7.. 1 1/5 1 1/40
L.P.B.
1/160
+
L.P.B.
+
: mort avec l¨¦sions p¨¦ripneumoniques
M CO
2
l------
I
Ii PI Pi
f
-
--
-
e
+
l--.-l-
-
-
l-7 Pl. P; -
1
*
+
.
-
l-i D-I- 4 - I
6
+
1¡± a k
19
20
Sur 27 bovins infect¨¦s par voie endobronchique, 23 ont succomb6
en pr¨¦sentant ¨¤ l'autopsie des lissions p¨¦ripneumoniques et 4 ont ¨¦t¨¦ sacrifi¨¦s
en fin d'exp¨¦rience, Le maximum des mortalit¨¦s d ?es ¨¤ la maladie exp¨¦rimen-
tale se situe vers le 20¨¨me jour qui suit l'intubation, Chez les survivants,
la pr¨¦sence de s¨¦questres encapsul¨¦s a ¨¦t¨¦ constatee chez 2 sujets (76 et
724). Le poumon ¨¦tait totalement indemne chez les deux autres (13 et 36).
Le 36 fixait le complemcnt & un taux ¨¦lev¨¦9 de plus l'antig¨¨ne circulant a
¨¦t¨¦ d¨¦cel¨¦ entre le 35¨¨me et le 75¨¨me jour. Ces deux animaux s¨¦rologiquement
n¨¦gatifs au d¨¦part pr~sentnient une immunit¨¦ certaine. Dans ce cas, l'¨¦volw
tion s&ologique ne semble traduire que la r¨¦action de l'organisme ¨¤ l'intro=
duction d'une substance altig¨¨nique ¨¦trang¨¨re en quantit ? importante.
L'¨¦volution s&ologique fait l'objet des tableaux 10 et 11. (D¨¦-
tiation du compl¨¦ment, recherche de l'antigene circulant).
Sur 15 t¨¦moins, 11 sont morts de p¨¦ripneumonie bovine entre le
35smc et 63eme jour qui suivirent la mise en contact, Les 4 survivants ont
¨¦t¨¦ sacrifi¨¦s au 95¨¨me jour, 3 (43, 38 et 40) montraient des s¨¦questres
cncapsul¨¦s, 1 (38) une lgsion ¨¦volutive englobant la totalit¨¦ d'un lobe
pulmonaire.
3 c- Evolution des animaux vaccin¨¦s
cm."3¡®sa-u~~ry.
*-u, ~~j,~l~D~<~~.."~~.Il-.~~l~~.~.~,~.~~
L'¨¦volution s¨¦rologique (d¨¦viation du compl¨¦ment)fait l'objet du
tableau 12,
Sur 15 animaux vaccin¨¦s, 3 (n'9, 42, 93) ont succomb¨¦ en cours d'ex-
p¨¦rience sans que lvexamen post-mortem ne r¨¦v¨¨le la moindre l¨¦sion pulmonaire.
La mort de ces animaux peut s9expl.iquer par le fait que, dans les conditions
difficiles impos¨¦es par le confinement, des diff¨¦rences de taille et de vita==
lit¨¦ emp¨ºchent certains sujets d'atteindre les mangeoires et de s'alimenter
normalement. La cachexie s'installe et la mort survient par ¨¦puisement.
Les 12 bovins vaccin¨¦s survivants ont ¨¦-te sacrifi¨¦s 95 jours apr¨¨s
la mise en contact avec les animaux infectants. Aucun de ces individus ne
prdsentait la moindre atteinte pulmonaire et M.mycoides n'a pu ¨ºtre isol¨¦
d'aucun ganglion trach¨¦e-bronchiquc.
Sur le plan s¨¦rologique, la presque totalitG des animaux vaccin¨¦s
a pr¨¦sent¨¦ une mont¨¦e d'anticorps fixant le compl¨¦ment au cours du contact
avec les animaux infect¨¦s exp¨¦rimentalement et les t¨¦moins en cours d'infec-
tion. Cette ¨¦volution traduit l'existence d'un stimulus antig¨¦nique certain
qui ne vas pas, g&ce ¨¤ l'immunit¨¦ existante, jusqu'au d¨¦veloppement de
l¨¦sion pulmonaire,
0. /.
.
.
M CO
!
1
Il
l
I-
M
-
- s
I
I
a
8
f
-
c-
-
-
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0
0
I
-
8
I
2 g - i c+ 9
-
2 21
.
.
I
.
,
.
.
Tableau 11 - Evolution shologique des animaux t¨¦moins apr¨¨s la mise en contact
(Antig¨¨ne circulant d¨¦cel¨¦ par pr¨¦cipita-diffusion en bo ?te de P¨¦tri)
Nombre de jours apr¨¨s
la mise en contact
35
42 i 49 i 56
' 63 ' 70
77
U" des animaux
75
Mort
43
-.*
!
38
I
I +
- I
It
-Mort t+t-i-?
1 - 1 + l + 1 Mort 1
!
!
i
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50
x.
-t l Mort I
Mort
1
z7
I
1 M o r t
l
I
I + l + I + l + 1 +
I Mort I
+
+
Mort
74
l
Mort
+ : apparition de l'antig¨¨ne circulant
,
Fa
.
.
Tableau 12 a Evolution s¨¦rolog;ique des animaux vac&-&s apr¨¨s la
mise en contact (D¨¦viation du compl¨¦ment Kolmer)
Nombre de jours
apr¨¨s la mise
0
7
14
21
27
35
42
49
56
63
70
77
95
en contact
Na des animaux
25
c"
l/lO l/lO l/lO
l/lO
1/20
l/lO
l/lo
_
II
_
-
Sacrifi¨¦.Pou-
mon indemne
24
1/5
1/5
1/5
l
-
,Y+
Sacrifi¨¦.pou-
mon indemne
n
ZB
l
Mort sans
7
l¨¦sion P.B]
I
t
4 2
115
u5
1/5 :
-
-
Mort sans
I
l¨¦sion P.B
fi-
l
l
i
u3
1/5
1/5 wo
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I^
. .
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1/40
1/20
l/lO
1/5
1/5 l/lO "'~~~~,~"~
10
1/5
115
J-/5
l/lO
-
-
1/5 Sacrifi¨¦.Pou-
-
mon indemne
79
1
-
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l/lO
l/lO
l/lO
-
-
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l
1
1/5 l/lO mon indemne
11 B
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u5
u5
115
115
1/5
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mon indemne
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1/5
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_
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-
mon indemne
90
1/51 1/20
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l/lO i l/lO
1/5
1/5
_ 1 -
,_
_ _ SacrifiC,Pou-
i
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11
1/5
1/5
115
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-
Sacrifi6,Pou-
82
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mon indemne
1
-
I
_ 1
u5
-
us 1/5 S&rifi¨¦.Pou-
mon indemne
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-2
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-
Sacrifi¨¦.Pouz
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-
- mon indemne
*A
B
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1
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I
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1/5
1/40
1/40
1/80
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I
I
I
l-
1
1
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1
l
1
t
I-
I
l
!
l
l
(l¨¦sion P.B(
1
i
I
I
w
24
CONCLUSION
A la suite doune exp¨¦rience contact r¨¦alis¨¦e 3 mois apr¨¨s la vacci-
nation avec 14 bovins vaccin¨¦s ¨¤ l'aide dsun vaccin lyophilis¨¦ pr¨¦par¨¦ avec
la souche Tl (41¨¨me passage), 3 bovins ont succomb¨¦ pour des raisons ¨¦trang&
res ¨¤ la p6ripneumonie bovine, les 12 survivants, sacrifigs 95 jours apr¨¨s
le d¨¦but de la mise en contact, ont pr¨¦sent& ¨¤ 19autopsie un appareil pulrno-
l
naire indemne de toute atteinte p¨¦ripneumonique. Ce r¨¦sultat a ¨¦t6 observ¨¦
¨¤ la fois chez des anirraux qui avaient offert une r¨¦action locale post-vacci-
nale au point d9inoculation et chez des individus o¨´ aucune r¨¦action locale
n'avait ¨¦t¨¦ enregistr¨¦e.
Cette exp¨¦rience souligne la valeur de l'immunit¨¦ d¨¦velopp¨¦e ¨¤ la
suite de la vaccination ¨¤ l'aide de la souche Tl (j+k?me passage)*
c
25
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conference of the JP/lT/phase IV Rinderpest Campaign == Na ?robi
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