SP. .T, REPUBLiQUE DU SENEGAL ...
SP.
.T,
REPUBLiQUE DU SENEGAL
____------
MINISTERE DU DEVELOPPEMENT RURAL
----------
TNSTZTUT SENEGALAIS DE RECHERCffES
AGRTCÛLES (T.S.R.A.1
___-------
LABORATOTRE NATiUNAL DE L'ELEVAGE
ET DE RECHERCtlES VETERiNAiRES
BP 2057
DAKAR - ffANN
RAPPORT DE M7SSlON
STAGE REGAZN 7987 - 798
HYBRTDOMES : PREPARATION d'ANTTCURF
MONOCLONAUX
INSTITUT PASTEUR PARTS
25 SEPTEMBRE - 1.5 OCTOBRE
PcUr
Il& Mamady KONTE
REF. N“b3/MlCROBiU.
NOVEMBRE 1967.
RAPPORT DE MTSSZON
STAGE REGAIN 7987 - J98
HYBRIDOMES : PREPARATION R'ANTTCORF
MONOC
'LONAUX
1NSTZTUT PASTEUR PARZS
25 SE?TEMBRE - 15 OCTOBRE
Pah
04
Mamady KONTE
Cc doge. REGAZN, Re da.kème du gente
uquek noUn avoti paktic.Lp@ en
7987,
a potié au4 LU hybtidomti, p4tipa4a/tion
d ' a
rco4pb manoc,kTonaux. 11
n’a pah kté
y'
exp4ud6ment ohganiné à l’intention
du A n ‘em E.k?ve,s de. L’ ItiaX.tti Paxs&w~
comme de couhne, rn& a con&i.Xué. nimp&.me
uvx ptie. du car annuel
d'lmmuno
&ogie giinii4a.k e.X d’lmmuno;technologie
de L’itititi
q u e &a &agiiaihti o n t 5~~2
au.Xoti& à htég4eh.
"
LU Stagiti~ REGAiN,
adm& au nombne CT quattLe (4), ont donc ntivi 1~
a.teli~~ d’lmmunotechno~ogiie axéa au.4 lk~
e..t dh..igés pa/z. Mon..hc~ut
Jean-Claude MAZTE du dépantement Hyb4..ido&ab-
7. VOYAGE
ET ACCUEIL
Dép& de Dahan : mencnedi 23 bepakmbhe 1967 à 23 heuta
AttiLivée à Pdrtin (CUG - RT)
: jeudi 24 A pkmbne 1967 à 8 hema,
Accueil - hébe,tgement :
R'TSRA a innové e n la
mtièhte ;
i.-t a pUbhé w con-
vention avec Lc? Cevu% Znt~nationall
der, E~U
e,t Stagiaiten de Pattin (CTE-S)
powt % p'tine en chcurge de ae~ d;tagia&cti
en dofUna$ion cn F4ance e.2 L a ge&ion
e~&tive
du c,téti coNttipondant à .t’alTo tien d e 6;tage.
f
NOM
avoti phédé4i L’hâ;tel au
aoye&: d'é udian.Ls
phopoaé patt le. Cl ES pou4
notie hQbetrgemen;t.
. . . / . . .
'II. DEROULEMENT DU STAGE
I
A. Pkoghamme du b.tage
7L componte deux
pWea :
/
- un
expob6 thliohi~ue, abohdati dé&&Ltioti
ti pho~tacu& d e
phLiipaha,tiOn dti
UtiCohpb monocto naux ;
- cjua,tte a.t&enn d’immunoXechnoLogie 4r-0~ &
hybtidomti
: phépahtion d ’ u n
Uticohpb monoclonc&
anti-a6hurn a l b u m i n e #naine.
:
B- Déhcx&n@ti du a.tuge
1’ ) Expo&! ;théotique
71 a eù lieu Le vendhedi 25 bepte.mbhe à 9 h e2 non plti à 7 5 h
comme
iwemeti phévu.
L~A &tagiahen REGAZN non
phéVenuA de ce changement d’hohtaihe, ont eu dhokt
à une néance de
hemptacement co~~~~entie ~CUL L. 3-C. MAZTE.
LU pokt.t% duivati aoti abohdéa :
- Véj$in&ion :
. u n hybtidome : c’e& une c&uRe hybtide
de
&a &.Lon [ou hybtidtion)
d’une c&uRe
de mytilome ou plti ~xac2e.m
de
phmocy;tome avec un immunocyXe
b&uRé i n vive ;
iAt pobbède &?A cahacté
. tiqueh du d e u x C&~RU
pah.ULtd~b,
à bavoih : Le ca,hacAèhe
immotiel du miqélom pehmeJ2an.t
bu hephoducCibi&Xé
indé&kLe
est la capacité de b ynthPbe d’un
ticuhpb bpéci@(iu~ dihxige conthe.
un antigène donné
appotié patc La c&~Lee
‘i
' munocompé;tente b;timutée in vive
ou .in vi.&0 ;
- u n
aticohpb mono&onat : c’eht un
anticoh 6 tigé conthe un épitope
unique
ou un
ghOUpe d’ éptiopti
henltrttiti, appaht riant à une
C,&Lbbe d’i.mmunogLo butine
donnée ti d’avidité dé&&&. 71 e~n;t:
dibu d une poputktion Lymphocyak&e homo-
g2ne détivart;t d’un LymphocyXe unique ou d’ n mtie clone c&Ue.
:
. . ./ . . .
- 3
. Choix
du C&~RU pattei&&c
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Le. myélome do-Lt avoti un
mutqueuh géné;I
que qti e.hA phQnqU& XO~j0Wk5 &I
dé,$i,tience en une enzyme
du mé;tabotime pw u e , l’hypoxanthine-guanine phoapho-
tibonil-;than~étLan
e. (HGPRT- 1.
Lymphe
cyke 8.
. Techniyuti
------ ---
Fukon en
mah6e ou &hCon
dwL &LiWre, 4
ELiSA), techniques de c.Lonage
au nombhe de 4
- Ob&wtion d’anticohp~ monoclov
IX en ghande. quatié
. p a h ctitie
cotinue
dati du @o&e.h géa te,h pah ag.ita;teti
. Pa/r pansage 6uh hOWd kin~OCOtnpa&dkk ,K XA obhuh de.h tic.ite~, bien
ph.a hichu e n
aniicohph.
- EXude du
Und%eOhph monoclonau
L~A anticohp~ monoclonaux phodti aoti
conh;tatie mol%X.&&e, c..tUne &t
hOUh-Ck!aM e
-
S.ixb~é du lignéti
S;tabi.Lté de l’hybtidome ob;tenue
Uphb
w virzgtine d e diviLoti C~L&-
,!.ai~~e~. La co~~&~ôLen avant de phocédm à kk îngékkZi.on.
- Appl.icafioti du
U&COhpht mor cl0 naux
. Domaine médical :
---------------
Viagnoatic,
hqX%CLge de c&lLeti maLigr 6, dohage trxd.io immunol?ogique,
dohage enzyme immunoeogique,
héhoXhéhapik CI Oa bactétiu et Xotin~, ktoxica-
“’
Lion5 médicamenteu4e,4, puk&kaZion
eti;rtaci pOhk?&fk pah &ixiLtion
d'UticOhph
hLllt du membtine-l, ~XC.. .
/
. . . . . .
- 4
. Pumaine
Ugho-&etitihc :
**------- --*-----------
Vétetion d'élémeti
vitaux o u ba.caZé eti indéaitablti peuh L a a&xLté
de. kk
hanté publique, tic...
2 ” ) kt&w d’immuno;technologie -
- Séance du mahdi
29 hep&zmbhe 1987 : 9 h - 12 h : ob&xti.on d’un hybtidome.
C&dti de myUome en c
& c&dai/re :
___****--*-** --------*-.
************
IL &u,t 107 C&~RU d e myélome. peut Ob hp-&ZnocyXti de La
hO& immunisée..
fa c~u,&?J h
camp&% (C&~RU dc
e huhnageant- &AL~
p@h celdAi~ugtion
e-t étintion du htinageati,
he.huh ppendtte e cu.loX à 107 cQeeuReA/ml duti le
midku hanA héhum.
SpLénoc@eh :
* -*-*- - - -
I
Ph6parttiOn : hUthi&i&k &A hOWÙA p
dAlaction veh.tébha& -
La ;trLemp~~~
dan.~ un bi?cha d’alcool - neattoqti .lu p.laq
de kX?ge à &‘aLcooL - me&% unt!
- phé&v&& &IL ha,.&
e,t kk poherr hwt & &mih - &X découpw en
p
monceaux que L'on éthane à
l’aide d'un lk.be
à hCmo&yhe. h~&i.A?e - &I/Cnc
ee tamd avec le. lTli.ceu hune hiihum -
ml- &i,ke u n camptige
de c&tie,h au bleu
Thqpan (50 &) de
a
nkon c&uRaihe, 50 ,&
de bleu
Th ypan,
400 ,ul d' eau
phyhioktogique) - ce.
auges 5 Mn à
700 g - fi5tliminU Le but-
anh héhum à 107 cd-
l?.utU/lmL.
. Fubion c-e
U&A de myé.tome-
e une michogouL.te
/
. . . . . .
- 5
PEG 1000 godte à gouLte -ajouA% 1
ml de n il.ieu bati hé&um pendant f mn pu.&
?
ml pendant encotrc 1 mn,
puA encohe 3
ml xndant 2 mn ti en&& 5
mL de.
milieu
aélectifj gode à gouXe e--t .thiAnti agih 3 nn - ajoutcst 10
ml de milieu aati
~étu.un pti 80 ml pauh annive~ à 700 ml de n i&eu
hmh héhum -d&txibueh .ta
bunpennion tx.UlLeaihe dam qua.the
pl!.aque~ G ! 24
puiL ù hai.Aon de 1
mi!/pti-
p&cetr à .te’é;tuve à 37°C Aou4 Cc72 eA en aAmc
,phChe humide pendant 5 - 10 jow .
- Séance du ma&i 6 octobhe 7987 :
hepéhage du Qbi& QOhi.i&$h
QUA lu technique
de L’ELlSA : examen de
de c-e
au mhxoacope
hQhS@
-
hepéhtk &LA QUi.tA Où .i/t lj CL CU
c&~e - phé.teveh Le hUhKUgeUti
de CU pu,& & &a centti@gti 5 mn à 700
- houmtie CeA hwLnagean& au &%t
de L’ ELiSA - hemeklxe du miLieu neub
danh L
Qti QhéteVéh.
RemeXhe à l’é&.~ve
à co2.
- Séance du j~.~di b octobhe 1987 :
le cLanage d e @Lt pan diX.uZon LimLte
Comptage d’un pu-i& mche [ QOhtid
eh
Ca huhpendion c&u-
laite dati le milieu de cuRtwLe powt avoih
O?,&hde/200 jd hOti 2,s C&&e/rne
(phévo.& 20
ml au ko&d
pou- une placjue CO6
96 puiL&) - cL&&.ibua 200 @lpuhtn
@ihe 4 Q~~SW.A
de 96 pubtA
pcvr ghoupe.
: cu.Muhe e n mtihe.
où 42 y a une
choA5ance c&u-
.ikihe - .toti p&
pohiaZi6 h L’ ELiSA coN~eA
nt à UM cLone babtiquant un an&-
COhQh monock?ond-kkb pUÜ2 pohtidd
bord h
onéa
dati de ghanden bob% (ou
dti boLta de Pétil .
Si L’on choiA.t de phoduihe &e monocXon
en
mahae, huh hOWÙh ti;tocompa-
LibLe, Qh6Tdéheh une
h0Wi.i.h kLb/c eX phocéd
: ptitavuk.tion
(injecta 0,5 ml
d e ak5tmmé;thyl petiodlka
6, 10, 7 4
Q#L voie ,buYlapéti-
tanéate) - 8 jow
aph$n, injectck envikon
on 5, f06 C~~A houh u n vo.&~~.
de 0,5 mL paft voie in&.apétionéaiTe - L”a
e eht hecuti pah ponction plihi-
Xonéde - &A
UticOhph obatenti peuvent
. . /. ..*
Conile,tvaLion du cWe~ :
ptLéalable à -3OOC en 2 à 3 h,
7 - 8 joua).
Le con.LtôLe de
da.Lt ae @i.he e n ptincipe
toun Les ;tttoAn ma&,
Lieu ;toun L~A deux ati
(décangéLaLon tapide en plongeant l'ampo
e dati u n bain à 37’C, c-e
puin a3at à L'EL?SA).
Remanquti : te ,temp/~ cotiacné à l’éfude deA hybtidomcin dati L e
ca&e géné/tal d u
cow d’immunologie n’a par pe~~~ti d’abottd
.t’immunochimie du anticortpb mono-
ctonaux
phoduith, à bavait, hpik&$ici;té,
c a Xante. mol!QcuRai/re, ctanaeh e.2 houh-
dhhheb.
‘i
711. ENSEZGNEMENTS DU STAGE ET PROGRAMME DE RECHERWE PU LNERV
l’exéction compRQ;te du pho~oco.te de p épana;tion du
UbU%.LOhph manationaux,
depti L’immuninaikon du
hOti juciyu'à 1'
munochimie
du anticonph pttadti ,
néCt?Ahtie 3
mOkh, e,t kk maXtt.&e pa~~&iRe
d
cet/te ;technoLogie n’e.& concevable
.
qU'Uphi?h
un an de
pha.tique.
t
C’e&t dihe que ce
htige noti a donné L
btiti
hci.enti~,@LA powL comphen-
dtre ti ekt.tXephendhe d e .t&
OpéhtiOVU, m
q u e peut
du atioti .immédiatti
m&ant en
Oeuvhe .&A
CLtiCOhph tnOROCtOWUX,
L~A ti d.iApanibLti dati L e com-
mehce
hont 6 eutA indiquéh .
Danh le cadhe du hechexhen
hWr k?
Le de &
htephOdUCtiOkI
chez &Q
hWninUti domtitiquti, &e
CkUgnOhtiC bacté
ologique de ChlamgcLa, objet d’un
phécédeti &age (happoti de
tihiOR, héd.
janv,& 19871, @i.bai;t
déjà appel
aux UticOhph monotionaux.
amme, la mihe en évi-
dence
de geme.h du gehne Li&t&, Camp
, kp,tOhpdu.l ti de/s tich&iti
en Xunt
qU'OpéhdOn de hechekche du
hertvic
d e Bac;tétioLogie, dev/ta LLCLLLAM
&eA anticohph monoc.lonaux, paha.LWkme
/
. . . . . .
c
ç
- 7
le mat@ti& néctiaaite à ce ~awa.X &..Lt L’objet d’une demande
d@jà
ancienne main
toujouh5 non NLtiAt&iAe ; Lt se
compobe. d’une Ltuve à COp, d’une
hotie à &?ux taninaine,
d’une
cenC?.i&qeuh
h6!@.kJi!hife
de ghande capacLt6, d’un
m,k,toacope invmé Qtipé peuh k
@uoh~c nce, de peAk2 maBtie& e.2
de phO-
dLLi;tn ckuniqua de
&botaXotie, no;tamment
eux destinés à La technique
d'EL7SA.
/
Il'. CONTACTS ffORS STAGE
u phoj&$ CEE &,Y &
.tkuXe con2xe~t.a Cowchiose e;t la Vekmtiop
O~C? den &nan&.
Le LNERV deuha adttinaeh
d'urgence à M.
VRE, hécemment dé&gné
coohdonnateu
pour L'TEMVT, te Tchad ti te Sénégti!, d
phO~OCO& de nechehche accompagné
d’ un budgeX
phéU&iOnnti gto baX 1 &tanc
eti CEE ti conhepahXi.e h6P&J&&e).
: avec Me.lXe Mtie-
culoae : accepie d e
n atige 6uh te diagno.4
tic bac~étiologique de
à pahtk du 16 novembhe 1981 pou,%
deux A emainti .
.
du ~echéXa&& du
ec Le ~hO&?AeWt
&‘accohd de a%ob
d’immuno~luoh~cence ti d’enzyme-imnunot g.ie appL&éti
au diagnostic de la
Q
hage, à pa,t&&
du 7 6 novembae 1987.
Docu.ment jokt : ti;te du ptitipant~.
I
- b
PARTICTPAN:
MeHe VEVlLLECffA8RULLE Ar&?e
OuhA 1.P. 1959
20,
nue de l%x~.&Cnv~m
iidech,
io.togXn;te dti ffôptiux
75076 - PARTS
M. FUUCAULT Bemattd
oum 7.P. 7971
Labotiotie de Biologie C%hique
‘hamnatien
76, Quai de Toud
'AecteuL L.A.M.
31000 - TOULOUSE
ti. KONTE Mamadq
Labonatoite de Rechehckb VC;thiuzçwL~
ColLa 7.P. 7983 - 1984
(L.N.E.R.V.)
V&Qkindihe
B.P. 2057
Ched
du demice de 8acthhloghe
DAKAR-ffANN (SWgal-)
M. NEMTROVSKY Mako S.
-
Coum I.P. 7965
ZXip&emenX d'Ana;tomie E
Médecin
l3ia&ogie C-e
Phofjkmeut
Faculté
de Médecine,
Utivehntie de Sff ERBROOKE
SffERBROOKE, QuEbec, 31f-l 5N4 (Canada)