IZFPURLIQUE DU SENEGAL -m.---------- ...
IZFPURLIQUE DU SENEGAL
-m.----------
-INSlXTUI' SENEJZ&~IS DE RECHERC%S
ilGlW!OES (I.S.R.A.)
------------
YJBORATOIRE NATIONAL DE L'ELEVAGE
ETDERECHERCHESVEI'ERINAIIIES
cIEu(RR-HANN
-.-:-:-:-:
.
EJ?IZOOTIOLOGIE DES TRYPANOSOMIASES
ETAUTREZ HEWPARASI'IES (x1
---mm
RAPPORTSURUNETOUIWEEEFFECWEE
DANS LE DEP-DE FOUNDIOUGNE
(REGION CU SINE-SILOUM) DU 13 AU 22 FEVRIER 1978
ET PROPOSITIONS FOUR DES BQJE'IES ULm
(*) Men¨¦e avec la contribution
Par M. SEYE et L. WADE
financi¨¨re de la F.A.O.
Service de Parasitologie
kms la directicm de S.M. TOU?E)

Une ¨¦quipe du Laboratoire de Parasitologie (LNERV) s'est rendue dans le
d&ar-temnt de Foundiougne, &gion du Sine-Saloum, du 13 au 22 f¨¦vrier 1978,
Les objectifs de cette mission ¨¦taient :
- de d¨¦terminer les conditions d'une utilisation optimale sur le terrain de
la kthode de d¨¦tection des txypanoscms par centrifugation du sang recueil-
li en micro-tubes ¨¤ h¨¦matocrite ;
- d'app&cier l'an¨¦mie ¨¦ventuelle chez les Ndama des localit¨¦s visit¨¦es en
mesurant le pourcentage voluktrique des cellules sari-es par rapport au
sang entier(h¨¦matocrite);
- enfin, d'actualiser les donnees relatives 2 la f&quence des Trypanosomiases
animles dans le Niombato, ainsi que des autres h¨¦mparasites.
1. McALITESETPREr;EVEMENTS
Toutes les localit¨¦s visit¨¦es se situent au sud de Sokone, dans le
Niotiato. L'¨¦quipe s'est rendu successivement ¨¤ :
-KeurOusseynouDieng
- Keur S¨¦ni Gu¨¨ye
-Ndombouth
- Keur Lahine Fatim
- Keur?kmLamine
- Keur Aliou Gu¨¨ye
-Pakala
- Keur Serigne Khodia
Les pr6l¨¨vements ont pox-6 sur un total de 500 animaux, soit 495 bo-
vins Ndama et 5 kes. Ils ont consist¨¦ ¨¤ recueillir, ¨¤ la pointe de l'oreil-
le, suffismmmt de sang pour remplir un microtube ¨¤ h&tocrite par animal;
et ¨¤ r&.liser un tittis et une goutte ¨¦paisse sur les animux suspects. Les
microtubes ainsi remplis sont centrifug¨¦s pendant 2 ¨¤ 5 minutes. Apr¨¨s lectu-
re de l'h¨¦mtocrite, l'interphase entre le plasma et les globules ( ou buffy
mat, selon certains auteurs anglais) est examin¨¦ entre lame et lamelle au
0.. /. . .

2
microscope sur fond noir. La lamelle est ensuite d¨¦tach¨¦e et la pr6paration
plong¨¦e 5 ¨¤ 30 minutes dans le fixateur de Schaudinn pxr ¨ºtre color¨¦e ¨¤ l'ar-
riv¨¦e au Laboratoire. Cette fixation ex tempomne est un essai con?u pour
mieux exploiter les lames de retour au Laboratoire.
Les analyses sur le terrain sont faites ¨¤ l'int¨¦rieur d'un camion labo-
ratoire dot¨¦ d'un gmupe ¨¦lectrog¨¨ne.
A noter qu'une panne du groupe ¨¦lectrog¨¨ne de ce cmmion a limit¨¦ les
pr¨¦l¨¨vements en micrwtubes aux 370 premiers Ndama et i! 5 ?nes. IGknmoins,
l'examen classique de la \\goutte de sang entre lame et lamelle ¨¤ lfCaide du
microscope ¨¦clair6 par une lampe de poche Wbnder, ainsi que la confection de
frottis et de gouttes ¨¦paisses ont ¨¦t¨¦ poursuivis SUT chacm des 225 derniers
NdLSllFi.
II. RESULTATS
II. 1 - Fxamen de l'interphase
P A R A S I T E S
Ncnnbrede
Ndama positifs
T. cmngolense
7
T. vivax
1
. ..
T. theileri
8
I
Microfilaires
29
l
Deux des Ndama pr¨¦sentent des micmfilaires et des trypanosomes.
Des 5 ?nes examin¨¦s, 1 seul est positif, ¨¤ mimofilaires.
Des 125 Ndama examin¨¦s par la &thode classique, 2 sont positifs ¨¤ -oso-
m et 1 ¨¤ micmfilaire.
-
.a. I. . .

3
II. 2 - Examen ap&s coloration
ks lames fix¨¦es ¨¤ partir du "buffy ccwt" que nms traduisons provi-
soiremznt par "interphase" se sont rGl6vl¨¦es illisibles ap&s colomtion. Un
bain de quelques heures dans l'eau distill¨¦e avant la coloration n'a pas a.&-
1ioI-e la qualit¨¦ des pr¨¦parations. D'autres rkthodes son$ 2 envisager.
Par con-hx?, les frottis et gouttes ¨¦paisses r&lis¨¦s sur les .snimux
suspects, tout en confirmant en g¨¦n¨¦ral les r¨¦sultats de 17examn direct de
l'interphase, ont permis de d¨¦celer d'autres parmsites, cm le montre le
tableau suivant.
Nl.m&?o
Eklffy coat
Goutte ¨¦paisse
Frottis
06
Microfilaire
N¨¦gatif
T. brucei ; Microfilaim
07
Mkmfilaire
Microfilaire
T.mtans ; B bigemina
21
Microfilaire
Microfilaire
M?cmfilaire
115
T, corigolense T. congolense
T. congolense
116
T. theileri
N¨¦gatif
N¨¦gatif
117
Microfilaire
Micmfilaire
N¨¦gatif
120
T. theileri
Micmfilaim
Micmfilaire
2 274
Micmfilaire
Microfilaire
Ricrofilaim
317
T. congolense T. congolense ; T. vivax
B. bigemina ; T. mtans
343
T. theileri
Micmfilaire
B.bigemina ;T.rnrtans ;Microfilaire
350
T. congolense T.congolense ;T.vivax ;%X~E. T,agolense ;T.viva; B.big-;emina
T. rrutans
l *. /
. . .

4
II. 3 - H¨¦mtocrite
- Ndmtxypanosom% ¨¤l'exammdel'interphase
,4?¨¦mie&te
NoAxd'animux
H¨¦matoczite %
Ncxnb~d~anciraux
18 p.100
1
30
1
22 p.100
1
33
2
23 p.100
1
35
1
25 p.100
1
36
2
27 p.100
2
38
a
28 p.100
1
39
1
.
l .* /
. . .

5
- H¨¦matocrite des &iimux n¨¦gatifs ¨¤ Txypanosom ¨¤ l'examen de l'l?-&er@mse
H&mtocrite
Ncmibred'animux
H¨¦matocrite
Nmibredvanimaux
10 p.100
2
31 p.100
24
14 PAO0
1
32 p.100
25
15 p.100
1
33 p.100
18
.
16 p.100
1
34 p.100
12
17 p.100
1
35 p.100
24
18 p.100
3
36 p.100
16
19 p.100
2
37 p.100
13
20 p.100
7
38 p.100
6
21 p.100
5
39 p.100
4
22 p.100
7
40 p.100
6
23 p.100
10
42 p.100
3
24 p.100
6
43 0.100
7
25 p.100
18
4 4 p.100
1
.26 p.100
21
4 5 p.100
4
k
2 7 p.100
2 2
4 7 p.100
1
2 8 p.100
24
48 p.100
2
29 p.100
16
49 p.100
1
3 0 p.100
40
5 3 p.100
1
Ces tableaux mmtrent que pour les Ndarm trypanosorkk, la valeur moyenne
de l'h&mtccrite est ¨¦gale ¨¤ 24,28 i 1,66.
Pour les 355 Ndarm non trypanosom¨¦s, l'h¨¦mtmrite myenne est de
30,52 f 0,71.
.c.. /.
. .

6
Naus retiendrons de cette enqu¨ºte les points suivants :
1) La sensibilit¨¦ de la dthode de d¨¦tection des txypanoscmes par centrifuga-
tion du sang en microtubes ¨¤ h¨¦matocrite est ¨¦vidente. En outre, l'utilisa-
tion d'un mimcope ¨¤ fond noir permt de d¨¦terminer .assez facilement l'es-
p¨¨ce de trypanosom renconttie. Un cas de T. brucei a ¨¦t¨¦ d¨¦c836 incidemnent
sur un fmttis alors que l'interphase et la gcutte ¨¦paisse n'ont rien r¨¦v&¨¦,
Cependant, quelques difficult¨¦s d'ordre pratique sont ¨¤ silaler :
- la mithode comporte une s¨¦rie de manipulations qui prennent toutes du
temps, alors que les &eveurs se mntrent savent press¨¦s d'emwner
pa?tre les animmx.
Nous avons essay¨¦ de surmonter cette difficult¨¦ en effectuant, pour
chaque -peau, llensemble des p&l¨¨vements, avant de ccsnmencer les
centrifugations et la lecture de l'interphase. %ais la rencontre de
micmfilaires rrmts ncxm a fait renoncer ¨¤ ce protocole, au profit du
pri¨¦l¨¨vemnt par groupes de 5 animaux, qui peuvent ¨ºtre examin¨¦s dans
les 30 minutes ;
- l'utilisation ¨¤ mande ¨¦chelle de cette &thode n¨¦cessite, ¨¤ notre
avis, un personnel d'au moins 3 agents, dont l'un assure les psl¨¨ve-
mts, l'autre les centrifugations et la mesure de 19h¨¦matocrite, et
le troisi¨¨me la lecture des lames ;
- l'absence quasi-g¨¦n¨¦rale de samce d'¨¦nergie Electrique en milieu ru-
ral et le risque de panne du groupe ¨¦lectrog¨¨ne du camion-laboratoire
constituent ¨¦galement des difficult¨¦s dont il faudrait tenir ccmpte.
2) L'amplitude de l'h¨¦mtocrite est de 10 ¨¤ 53 p.100. Sur les 355 Ndama n¨¦gatifs
2 TWpmoSama 3 l'emmn du"buffy ooat!: 187 pr6xnten-t des valeurs allant de
10 p.100 ¨¤ 30 p.100, soit plus de la miti¨¦ des bovins n¨¦gatifs. En autre 244
de ces &ES ani.mmx (soit plus des 2/3) donnent des valeurs ccmprises entre
25 et 35 p.100, la valeur la plus fr¨¦quente ¨¦tant 30 p.100 trouv¨¦e chez 40
animaux. Pour l'ensemble, la myenne est 30,52 f 0,71.
Une l¨¦,$%-e an¨¦mie semble donc ¨ºtre la r¨¨gle chez les animaux de cette zo-
ne car, l'h¨¦matocrite moyenne des Ndam du S¨¦n¨¦gal est ¨¦gale ¨¤ 34,7 f 1,2 (se-
lon D. F'RICYT et H. CALVEX (1).

7
3) En ce qui concerne la f-r¨¦quence des Trypanosomiases, les cas visualisables
sont rares. Les s¨¦quelles des ann¨¦es de s¨¦cheresse et les traiterrmtsau B¨¦&-
ni1 pratiqu¨¦s p&iodiquemnt pw les agmts de 1'ElevaTe et ceux de la SODEVA
semblent en ¨ºtre les principales explications.
Parcontre,un g~?and ncanbred'animux atteints de Filarioseou de Babe-
sioses a ¨¦t¨¦ tiv¨¦l¨¦ aussi bien par l'examen du Ixf@ coat que par les fmttis
et yxttes ¨¦paisses, amnelemontm cetableau :
FREXVEMENTSDE EWNDIOUGNE - FEVRIER1978
Nombre d¡¯animaux
P A R A S I T E S
b3ur 222 f. et?Z?Y'
* II
protttis
\\ G. ¨¦paisse
T. Congolense seul
1
2
T. 'viv* seul
0
1
T. theileri seul.
0
4
Infection mixte ou mltiple ¨¤ Trypanosorm
3
4
Microfilaixe seule
4
17
Infection mixte ¨¤ Txypanosom + Micmfi&iXe
1
3
Theilerti mtans seul
78
1
Babesia bigemina seule
6
0
Infection miste Theilmia e Babesia
44
1
Autres associations : Babesia + Theileria t n?y-
panoscm ca.~ B. t Th. t Micmfilaire ou Babesia +
7
@
Micmfilaire, etc...
T. brucei seul
0
0

& rkapitulant ncus avons :
- naibre de frottis et gouttes epaisses examin¨¦s : 222
- ncm&e dtarhaux parasit¨¦s : 166, soit 74 p.100
- Theileriose seule : 78 cas, soit - 35 p.100 des pS%Wments, ou z 46 p.100
des cas positifs.
- Ehbesiose seule : 6 cas, soit f: 2 p.100 des p-r¨¦l¨¨vements,ou 2- 3 p.100 des
cas positifs.
- 'Ikypanosms patho&cs : 10 ES, soit - 4 p.100 des p&l¨¨vemmts, ou 6 p.100
des cas positifs.
- association Theileriose-Ekbesiose : 44 cas, soit - 19 p.100 des px¨¦l¨¨vemnts
m - 26 p.103 des cas positifs.
- Filariose seule : 17 cas, soit 7 p.100 des pr¨¦l¨¨vemnts, ou = 10 p.100 des
cas positifs.
TrypanoscmTheileri : 4 cas
-fkrtres associations : 7 cas.
Il appara?t, dans cette enqu¨ºte, que la lecture mx@¨¨te des frottis
et gouttes ¨¦paisses &v¨¨le beauCCUp de cas de p6mWitose 6anglke..
-
Nos conclusions, apr¨¨s d'autres essais sur le termin, pratiqu¨¦s entre
nt3.i et d&mibre sont :
a) la technique de WOO (centri.f&ation micrch¨¦matocrite) suivie d*observation mi-
croscopique sur fond noir, renseigne assez ra$dmant sur la nature et le de&
de parasit¨¦mie ; cependant, elle comporte des restrictions :
- si T. congolense est rare, on peut ne pas voir ce parasite ;
-l'observateur,enpr&ence
de no&reuxtrypanosomes dont certains sont tr¨¨s
mobiles et d'autres peu actifs, en partie masqu¨¦s par les globules mges,
pdt conclure ¨¤ une infection mixte T. vivax - T. congolense alors qu'il s'a-
git de la premi¨¨re esp¨¨ce seulement ;Une infection mixte delle peut ¨ºtxe R-G
connue.
b) les frottis et gouttes ¨¦paisses restent indispensables pour confirmer les es-
p¨¨ces aprk coloration ;

WOC (3) considke que seulement 30 % des infections dues ¨¤ T. congolense
peuvent ¨ºtre d¨¦cel¨¦es par microh¨¦~tocrite.
Walter (4) a?roIxx¨¦ une~&hode
pour pallier cet inconv&ient d? au fait que T. wngolense a la J&E gravit¨¦
sp¨¦cifique que les globules rouges. Il a utilis¨¦, pur ce faim, un tampon :
glycerol 9 p.100 (v/v) ; magn¨¦sium sufate 9 p.100 (p/v) ; Tris 0,l p.100 (p/v) ;
$J 8,0 gmuge de ph¨¦nol 1 p.100.000. Ce milieu conserve la n&ilitG des trypa-
nosornes. La m¨¦thode ax6lioratrice consiste ¨¤ &langer sur une plaque ¨¤ titm-
tien 50 @, de tcsnpon et 50 PR de sang. A~I% 15 minutes ¨¤ 24 heures, les ¨¦&an-
tillons sont centrifug& en tubes capillaires pendant deux minutes et examin¨¦s
sur fond noir. Selon l'auteur on peut d¨¦celer des infections aussi faibles que
35 parwi.tesparkL de sangetuntechnicienpourrait~erungrandn~
bre de pr+rations par jour.
I
Cette tithode sera essay¨¦e dans les pmchaines journ¨¦es mais nous avons
des appr¨¦hensions quant ¨¤ l'ex¨¦cution sur un grand no&re d'aniswx.
Nous nous proposons n¨¦anwins depmc¨¦der~ suit :
- rwueillir le sang ¨¤ l'oreille des anixxawc cxxs~ au cours de la pr&ente
enqu¨ºte, en double ¨¦chantillon pour chaque b$te ;
- examiner une prwni¨¨m s¨¦rie sur le terrain;
- conserver la deuxi¨¨me s¨¦rie dans l'azote liquide ;
- proc¨¦der ¨¤ la m¨¦thode de klker au laboratoire sur la deuxi& s¨¦rie ;
- fxaparerles tisultats.
A la fin du semestre dernier, nous avions pm63.¨¦ au Laboratoire ¨¤ l'exa-
rwn diff¨¦1-¨¦ des ticmtubes. Il est rem-arquable qu'au bout de 4 ¨¤ 8 heures les
trypanoscsnrs dellinterphase -cent ¨¤ fomwr des colonies en rosace. L'exa-
men diff¨¦ti peut-il a&liomr les rkultats ? C'est aussi un dcxraine d'inves-
tigation.

10
Le service de Parasitologie adresse ses ccmplimnts et ses -mie-
rmrts ¨¤ la F.A.0 et aux agents de la Direction de la Sant¨¦ et des pmductions
animales qui ont beaucoup contmbu¨¦ ¨¤ la &lisation de ce tmvail.
R E F E R E N C E S
1. FRW, D. et CAWET, H. - Biochimie et ¨¦levage au S&n&@. Rev. Elev. M¨¦d.
v¨¦t. Pays trop., 1973, 26 (4) = 75a - 98a.
2. WOO, P.T.K. - A technique forthe pamsitological diagnosis of AErican n?y-
ymmn.iasis.. Trans. R. Soc. tmp. !+S$d., 1971, 65 (2) : 249
-
3. WOO, P.T.K. - Ati&istical studyofthe sensitivi~ofthehaemtocritcen-
trifige technique in the detection of trypanoscms in blond. Wans. R.
Soc. tmp. ad., 1974, 68 (4) : 319-326.
-
4, WALXER, P.J - Capillary concentr?ation technique applicable to infections of
Te CTFlme 111 ~ttle. TBI-IS. Ray. SOC trap. ?I¨¦d. Q., 1972, 66 (2) :
348.